DAN XIANG XUAN ZE TI
一、單項(xiàng)選擇題(每題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一個(gè)選項(xiàng)是符合題目要求的)1．(2023·押題卷)醬油的釀造起源于我國(guó)，已有3000多年的歷史。利用自然發(fā)酵法釀造醬油的流程如下：煮黃豆→冷卻后在黃豆表面抹上一層面粉→制曲→加鹽水制成醬醅→在烈日下曝曬、定期翻醬，進(jìn)一步發(fā)酵。下列說法錯(cuò)誤的是(　　)A．制曲就是利用大豆和面粉選擇培養(yǎng)微生物，為制作醬油提供菌種B．加鹽水的主要目的是抑制產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶的微生物的生長(zhǎng)C．定期翻醬能使醬醅和空氣充分接觸，同時(shí)抑制厭氧微生物的生長(zhǎng)D．豆瓣醬、腐乳等發(fā)酵食品和調(diào)味品的制作也能利用自然發(fā)酵法
2．(2023·廣東，10) 研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來(lái)判斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是(　　)A．a(chǎn)點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B．b點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C．b點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D．c點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基
解析　由圖可知，隨著堆肥時(shí)間的延長(zhǎng)，堆肥溫度先升高后保持穩(wěn)定，a點(diǎn)時(shí)堆肥溫度最低，c點(diǎn)時(shí)堆肥溫度最高。該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，應(yīng)該用以角蛋白為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選培養(yǎng)，且應(yīng)該在高溫條件下取樣，即c點(diǎn)時(shí)取樣，D符合題意。
3．(2023·杭州高三聯(lián)考)納米硒具有高效、低毒的特性，在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。不同濃度納米硒的抑菌效果如圖所示。下列敘述正確的是(　　)A．用稀釋涂布平板法對(duì)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)的對(duì)象是培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)B．顯微鏡計(jì)數(shù)法比稀釋涂布平板法更利于計(jì)算活體的大腸桿菌數(shù)目C．據(jù)圖可知，納米硒的抑菌效果隨納米硒溶液濃度的升高和抑菌時(shí)間的增加而提高D．據(jù)圖可知，5 g/L的納米硒溶液對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果都達(dá)100%
解析　用稀釋涂布平板法對(duì)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)的對(duì)象是培養(yǎng)基上由單個(gè)細(xì)胞或連在一起的多個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)成的菌落數(shù)，A錯(cuò)誤；用顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)，不能直接區(qū)分活菌和死菌，所得結(jié)果往往是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，而用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，只有活細(xì)胞才可以長(zhǎng)成菌落，故稀釋涂布平板法比顯微鏡計(jì)數(shù)法更有利于計(jì)算活體的大腸桿菌數(shù)目，B錯(cuò)誤；題圖中橫軸是納米硒溶液的濃度，縱軸是抑菌效果，沒有體現(xiàn)抑菌時(shí)間，故據(jù)題圖可知，納米硒的抑菌效果隨納米硒溶液濃度的升高而提高，不能得出納米硒的抑菌效果隨抑菌時(shí)間的增加而提高，C錯(cuò)誤；由題圖可知，納米硒溶液的濃度為5 g/L時(shí)，其對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果均為100%，D正確。
4．(2023·測(cè)評(píng)題)用添加了瓊脂的培養(yǎng)基在試管中制成斜面，在此面上對(duì)細(xì)菌、霉菌等微生物進(jìn)行培養(yǎng)稱為斜面培養(yǎng)。斜面培養(yǎng)有利于觀察所培養(yǎng)的微生物的生長(zhǎng)狀態(tài)。如圖為某興趣小組從土壤中分離尿素分解菌的過程。下列說法錯(cuò)誤的是(　　)A．圖中接種之前，配制好的固體培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌后倒平板B．過程①所用的接種方法便于對(duì)平板上的尿素分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)C．利用圖中方法統(tǒng)計(jì)得到的菌落數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目少D．培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿和錐形瓶等都必須通過干熱滅菌法進(jìn)行滅菌
解析　配制好的固體培養(yǎng)基應(yīng)先滅菌后倒平板，對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常采用的方法是高壓蒸汽滅菌法(屬于濕熱滅菌)，培養(yǎng)皿和錐形瓶常用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌，A正確，D錯(cuò)誤；根據(jù)題圖可知，過程①所用的接種工具為涂布器，所以過程①的接種方法為涂布平板法，過程②所用的接種工具為接種環(huán)，該接種方法為平板劃線法，其中涂布平板法更適合用于對(duì)平板上的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，B正確；用稀釋涂布平板法接種時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比實(shí)際數(shù)目少，C正確。
5．(2023·測(cè)評(píng)題)人參皂甙是人參的主要成分，可延緩神經(jīng)細(xì)胞衰老和降低老年發(fā)生的記憶損傷?？蒲腥藛T將人參的根細(xì)胞接種到MS液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)，利用酶技術(shù)縮短細(xì)胞培養(yǎng)周期來(lái)生產(chǎn)人參皂甙，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)A．MS培養(yǎng)基中的蔗糖能為植物細(xì)胞生長(zhǎng)提供能源物質(zhì)及維持植物細(xì)胞滲透壓B．利用果膠酶將人參根組織分散成單個(gè)細(xì)胞，有利于細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)C．誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值高D．人參皂甙的工廠化生產(chǎn)具有不占耕地、幾乎不受季節(jié)和天氣等限制的優(yōu)點(diǎn)
解析　MS培養(yǎng)基中添加的是蔗糖，既為植物細(xì)胞生長(zhǎng)提供能源物質(zhì)，同時(shí)也維持細(xì)胞的滲透壓，A正確；利用果膠酶將人參根組織分散成單個(gè)細(xì)胞，有利于細(xì)胞吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，從而縮短細(xì)胞培養(yǎng)周期，B正確；誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值適中，當(dāng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)會(huì)誘導(dǎo)根的分化，C錯(cuò)誤。
6．(2021·福建卷)科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育矮牽牛新品種，技術(shù)流程示意圖如下：下列敘述正確的是(　　)A．愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞分化形成的B．獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀C．可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合和細(xì)胞壁再生D．用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體
解析　愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞脫分化形成的，A錯(cuò)誤；由于基因的選擇性表達(dá)和基因間的互作效應(yīng)，獲得的雜種植株不一定能夠表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀，B錯(cuò)誤；可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合，但不能誘導(dǎo)細(xì)胞壁的再生，C錯(cuò)誤。
7．(2023·安徽名校聯(lián)盟第一次質(zhì)檢)HPV是一種雙鏈DNA病毒，該病毒持續(xù)感染人體可引起宮頸癌，臨床上可利用單克隆抗體治療HPV感染。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是(　　)A．制備單克隆抗體時(shí)，需要先將滅活的HPV注射到小鼠體內(nèi)B．抗HPV的單克隆抗體還可用于檢測(cè)人體是否被HPV感染C．同時(shí)注射HPV疫苗和抗HPV單克隆抗體可形成對(duì)HPV感染的雙重防護(hù)D．可用抗原—抗體雜交技術(shù)對(duì)獲取的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)
解析　制備單克隆抗體時(shí)，需要先將滅活的HPV注射到小鼠體內(nèi)，以便獲得能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；抗HPV的單克隆抗體除用于疾病治療外，還可用于檢測(cè)人體內(nèi)是否含有HPV抗原，即人體是否被HPV感染，B正確；同時(shí)注射HPV疫苗和抗HPV單克隆抗體時(shí)，抗HPV單克隆抗體可能會(huì)與HPV疫苗結(jié)合，使防護(hù)效果減弱，C錯(cuò)誤；可用抗原—抗體雜交技術(shù)對(duì)獲取的單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)，D正確。
8．(2023·山東高三開學(xué)摸底考試)羊奶的脂肪顆粒體積為牛奶的三分之一，更利于人體吸收，其維生素及微量元素含量明顯高于牛奶。欲利用胚胎工程技術(shù)加快高產(chǎn)奶的薩能山羊的繁殖，下列說法正確的是(　　)A．為使薩能母羊超數(shù)排卵，可在其飼料中添加適量的促性腺激素B．卵裂期的細(xì)胞數(shù)量增加，但細(xì)胞的體積和細(xì)胞內(nèi)有機(jī)物的種類會(huì)減少C．為提高胚胎利用率，可采用胚胎分割移植等無(wú)性繁殖技術(shù)D．生產(chǎn)上可選用原腸胚細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定
解析　促性腺激素的化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白，如果飼喂會(huì)被消化道中的消化酶分解，所以不能飼喂，應(yīng)采用注射的方式，A錯(cuò)誤；卵裂期細(xì)胞內(nèi)的有機(jī)物種類會(huì)增加，B錯(cuò)誤；為提高胚胎利用率，可采用胚胎分割移植等無(wú)性繁殖技術(shù)，C正確；性別鑒定是在囊胚期利用滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行的，D錯(cuò)誤。
9．(2023·測(cè)評(píng)題)蛋白質(zhì)工程是對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的需求。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)A．蛋白質(zhì)改造不需要通過轉(zhuǎn)錄和翻譯就能實(shí)現(xiàn)B．蛋白質(zhì)工程可以改造酶的結(jié)構(gòu)，提高酶的熱穩(wěn)定性C．蛋白質(zhì)工程可以對(duì)胰島素進(jìn)行改造，合成速效型胰島素類似物D．蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在的蛋白質(zhì)分子
10．(2023·遼寧省葫蘆島市高三一模略改)基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述正確的是(　　)A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的5′-端進(jìn)行子鏈合成C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上
解析　啟動(dòng)子是位于DNA上RNA聚合酶的結(jié)合部位，mRNA是由基因啟動(dòng)子后面的序列編碼而來(lái)的，若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列，A正確；引物的延伸方向?yàn)?′-端→3′-端，擴(kuò)增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成，B錯(cuò)誤；導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞，而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞，C錯(cuò)誤；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把含目的基因的T-DNA整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，D錯(cuò)誤。
11．(2023·江蘇南京高三六校聯(lián)考)下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　)A．馬鈴薯的莖段經(jīng)酒精和氯化汞消毒后可培養(yǎng)成脫毒作物B．紫草細(xì)胞要經(jīng)過再分化成愈傷組織，才可進(jìn)行工廠化生產(chǎn)提取藥物和色素C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞，原理均為細(xì)胞增殖D．可選用動(dòng)物的受精卵、二分裂球和囊胚等進(jìn)行胚胎分割，不能用原腸胚
解析　培育脫毒作物時(shí)應(yīng)選擇植物的莖尖、芽尖等分生組織作材料，A錯(cuò)誤；紫草細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，B錯(cuò)誤；在進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚，D錯(cuò)誤。
BU DING XIANG XUAN ZE TI
二、不定項(xiàng)選擇題(每題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有的只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求，有的有多個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)12．(2023·山東，20，改編)果酒的家庭制作與啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)相比，共同點(diǎn)有(　　)A．都利用了酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理B．都需要一定的有氧環(huán)境供發(fā)酵菌種繁殖C．發(fā)酵前都需要對(duì)原料進(jìn)行滅菌D．發(fā)酵結(jié)束后都必須進(jìn)行消毒以延長(zhǎng)保存期
解析　果酒的家庭制作和啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)所用的菌種都是酵母菌，都利用了酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的原理，A錯(cuò)誤；發(fā)酵初期提供一定的有氧環(huán)境，利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，增加酵母菌數(shù)量以提高發(fā)酵效率，B正確；果酒的家庭制作利用的是附著在水果果皮上的野生酵母菌，因此發(fā)酵前不能對(duì)原料進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；發(fā)酵結(jié)束后家庭制作的果酒不需要再進(jìn)行消毒，D錯(cuò)誤。
13．(2023·遼寧省阜新市高三4月聯(lián)考)近年來(lái)，微生物學(xué)和發(fā)酵工程技術(shù)的進(jìn)步為我國(guó)發(fā)酵食品提供了更多可能的發(fā)展路徑，技術(shù)應(yīng)用可降低發(fā)酵周期并提升質(zhì)量。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)和發(fā)酵工程的敘述，正確的是(　　)A．用酵母菌發(fā)酵釀制果酒時(shí)，可選擇溴麝香草酚藍(lán)溶液檢測(cè)產(chǎn)生的酒精B．啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生和積累主要在主發(fā)酵階段完成C．用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，可通過發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取D．多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉
解析　用酵母菌發(fā)酵釀制果酒時(shí)，可選擇酸性重鉻酸鉀溶液檢測(cè)產(chǎn)生的酒精，溴麝香草酚藍(lán)溶液可用于檢測(cè)CO2，A錯(cuò)誤；啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生和積累主要在主發(fā)酵階段完成，B正確；用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，其中的單細(xì)胞蛋白是指微生物菌體，并不是通過發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取獲得，C錯(cuò)誤。
14．(2023·江蘇南京高三六校聯(lián)考改編)下列有關(guān)生物技術(shù)的應(yīng)用的說法或做法，錯(cuò)誤的是(　　)A．在我國(guó)，通過生殖性克隆有可能解決一些夫婦不孕不育的問題B．用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育含有β-胡蘿卜素的黃金米可以補(bǔ)充人體缺乏的維生素AC．利用基因編輯技術(shù)設(shè)計(jì)完美嬰兒，以期獲得臉蛋漂亮、智力超群的嬰兒D．胚胎移植時(shí)為避免受體對(duì)來(lái)自供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，往往需要對(duì)受體注射免疫抑制劑
解析　通過試管嬰兒技術(shù)有可能解決一些夫婦不孕不育的問題，在我國(guó)，不允許進(jìn)行任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，A錯(cuò)誤；設(shè)計(jì)完美嬰兒的想法與尊重自然、尊重生命的理念相沖突，我國(guó)不允許設(shè)計(jì)完美嬰兒，C錯(cuò)誤；受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎一般不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，進(jìn)行胚胎移植時(shí)不需要對(duì)受體注射免疫抑制劑，D錯(cuò)誤。
FEI XUAN ZE TI
三、非選擇題15．(2023·全國(guó)乙卷，37)某研究小組設(shè)計(jì)了一個(gè)利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇的小型實(shí)驗(yàn)，其主要步驟是：先將粉碎的作物秸稈堆放在底部有小孔的托盤中，噴水浸潤(rùn)、接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后，再用清水淋洗秸稈堆(清水淋洗時(shí)菌T不會(huì)流失)，在裝有淋洗液的瓶中接種酵母菌，進(jìn)行乙醇發(fā)酵(酒精發(fā)酵)，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。
回答下列問題。(1)在粉碎的秸稈中接種菌T，培養(yǎng)一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn)菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解，其原因是_______________________________。(2)采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中還需要加入氮源等營(yíng)養(yǎng)成分，氮源的主要作用是__________________________________(答出1點(diǎn)即可)。通常，可采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。在使用該方法時(shí)，為了達(dá)到良好的滅菌效果，需要注意的事項(xiàng)有_____________________________________ ______________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。
用于合成蛋白質(zhì)、核酸等含氮物質(zhì)
待滅菌的物品不宜放置過擠；必須將鍋內(nèi)的冷空氣充分排出；滅菌完畢后，不可立即打開排氣閥，待壓力表的壓力降到零時(shí)，才能打開
(3)將酵母菌接種到滅菌后的培養(yǎng)基中，擰緊瓶蓋，置于適宜溫度下培養(yǎng)、發(fā)酵。擰緊瓶蓋的主要目的是____________________________。但是在酵母菌發(fā)酵過程中，還需適時(shí)擰松瓶蓋，原因是______________________________________________________________________________。發(fā)酵液中的乙醇可用________________溶液檢測(cè)。(4)本實(shí)驗(yàn)收集的淋洗液中的________可以作為酵母菌生產(chǎn)乙醇的原料。與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，本實(shí)驗(yàn)中乙醇生產(chǎn)方式的優(yōu)點(diǎn)是__________________________________________________________。
創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，利于酒精的產(chǎn)生
酒精發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2會(huì)導(dǎo)致瓶?jī)?nèi)壓強(qiáng)升高，及時(shí)排出CO2可以防止發(fā)酵瓶破裂
提高了能量利用率、減少了對(duì)環(huán)境的污染、保障糧食安全
解析　(1)纖維素的分解需要纖維素酶的催化。(3)酒精發(fā)酵離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。要使酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵，需要?jiǎng)?chuàng)造無(wú)氧環(huán)境。酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精的過程中，會(huì)不斷產(chǎn)生二氧化碳，要適時(shí)擰松瓶蓋放出CO2，以免發(fā)酵瓶破裂。在酸性條件下，橙色的重鉻酸鉀溶液可與乙醇發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，變成灰綠色。(4)菌T可分泌纖維素酶，纖維素酶可以將纖維素分解成葡萄糖。用秸稈替代糧食生產(chǎn)乙醇，一方面提高了能量利用率，減少了環(huán)境污染，另一方面減少了對(duì)糧食的消耗，從而保障糧食安全。
16．(2023·杭州高三聯(lián)考)某研究表明，孤獨(dú)癥譜系障礙與某基因(以下稱為基因S)的變異有關(guān)，科研人員對(duì)獼猴的基因S進(jìn)行編輯，首次獲得孤獨(dú)癥譜系障礙模型猴。該模型猴可用于藥物效果評(píng)價(jià)研究?；卮鹣铝袉栴}：(1)以獼猴mRNA為模板經(jīng)________過程合成cDNA，再以cDNA為模板利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，可獲得大量基因S。與構(gòu)建的基因組文庫(kù)相比，構(gòu)建的cDNA文庫(kù)不包括基因中的_______________________(答出2項(xiàng))序列。
啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子
(2)用于擴(kuò)增基因S的引物需滿足的條件是_______________________________________________；為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割，需在引物上添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列，該限制酶識(shí)別序列應(yīng)添加在引物的5′端。PCR過程中的每次循環(huán)可分為變性、退火(復(fù)性)、延伸三步，其中退火(復(fù)性)的結(jié)果是________________________________________。(3)先構(gòu)建含有編輯后的基因S的基因表達(dá)載體，再將其通過顯微注射法導(dǎo)入_______中，然后利用胚胎工程中的______________________ (答出2項(xiàng))等技術(shù)手段獲得轉(zhuǎn)基因孤獨(dú)癥譜系障礙模型猴。
兩種引物分別與兩條模板鏈3′端的堿基序列互補(bǔ)配對(duì)
引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與單鏈DNA結(jié)合
早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植
(4)為獲得更多孤獨(dú)癥譜系障礙模型猴，科研人員采用細(xì)胞核移植技術(shù)克隆獼猴，發(fā)現(xiàn)囊胚細(xì)胞核移植途徑比體細(xì)胞核移植途徑更有優(yōu)勢(shì)，其原因是____________________________________________________。若以保存的良種囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體雌性獼猴為材料進(jìn)行操作，以獲得具有優(yōu)良性狀的后代。該過程主要的操作步驟是__________ __________________________________________________________________________________________________________________________。(5)為了獲取大量獼猴胚胎細(xì)胞用于藥物篩選，可用胰蛋白酶處理獼猴囊胚的________，取分散的胚胎干細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)可進(jìn)行________培養(yǎng)。
提供細(xì)胞核的囊胚細(xì)胞的分化程度更低，更容易表現(xiàn)全能性
對(duì)受體雌性獼猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，將保存的囊胚進(jìn)行胚胎移植，對(duì)受體雌性獼猴進(jìn)行是否妊娠的檢查，一段時(shí)間后受體雌性獼猴產(chǎn)下具有優(yōu)良性狀的后代
解析　(1)以mRNA為模板經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程可合成cDNA。與構(gòu)建的基因組文庫(kù)相比，構(gòu)建的cDNA文庫(kù)不包括基因中的啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子等序列。(2)用于擴(kuò)增目的基因的引物需要滿足的條件是兩種引物分別與兩條模板鏈3′端的堿基序列互補(bǔ)配對(duì)。在PCR過程中，變性的結(jié)果是雙鏈DNA解聚為單鏈；退火(復(fù)性)的結(jié)果是引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與單鏈DNA結(jié)合；延伸的結(jié)果是4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。
17．(2023·海南，20)基因遞送是植物遺傳改良的重要技術(shù)之一，我國(guó)多個(gè)實(shí)驗(yàn)室合作開發(fā)了一種新型基因遞送系統(tǒng)(切—浸—生芽Cut-Dip-Budding，簡(jiǎn)稱CDB法)。圖1與圖2分別是利用常規(guī)轉(zhuǎn)化法和CDB法在某植物中遞送基因的示意圖。
回答下列問題。(1)圖1中，從外植體轉(zhuǎn)變成愈傷組織的過程屬于________；從愈傷組織到幼苗的培養(yǎng)過程需要的激素有生長(zhǎng)素和____________，該過程還需要光照，其作用是________________________________________。(2)圖1中的愈傷組織，若不經(jīng)過共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的植株可以保持植株A的_________。圖1中，含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A若用于生產(chǎn)種子，其包裝需標(biāo)注____________。(3)圖1與圖2中，農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，可將外源基因遞送到植物細(xì)胞中的原因是________________________________________________ ___________________________________________________。
誘導(dǎo)葉綠素的形成，使幼苗能夠進(jìn)行光合作用
農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T－DNA轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體DNA上
(4)已知某酶(PDS)缺失會(huì)導(dǎo)致植株白化。某團(tuán)隊(duì)構(gòu)建了用于敲除PDS基因的CRISPR/Cas9基因編輯載體(含有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因)，利用圖2中的CDB法將該重組載體導(dǎo)入植株B，長(zhǎng)出毛狀根，成功獲得轉(zhuǎn)化植株B。據(jù)此分析，從毛狀根中獲得陽(yáng)性毛狀根段的方法是___________ _________________，圖2中，鑒定導(dǎo)入幼苗中的基因編輯載體是否成功發(fā)揮作用的方法是______________________________________________ _____________________，依據(jù)是_________________________________ ______________________________________________________________________________。
檢測(cè)毛狀根段是否有綠色熒光
植物PDS中靶區(qū)域測(cè)序(或根據(jù)PDS基因的堿基序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增)
若導(dǎo)入幼苗的基因編輯載體成功發(fā)揮作用，則PDS基因被敲除，靶區(qū)域的測(cè)序就會(huì)出現(xiàn)序列缺失(或PCR無(wú)法擴(kuò)增出條帶)
(5)與常規(guī)轉(zhuǎn)化法相比，采用CDB法進(jìn)行基因遞送的優(yōu)點(diǎn)是____________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。
不需要無(wú)菌操作、不需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)、操作簡(jiǎn)便
解析　(1)外植體經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化形成幼苗，再分化培養(yǎng)基需要有一定比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。葉綠素的形成需要光，故再分化過程中需要適宜的光照以誘導(dǎo)葉綠素的形成。(2)圖1中，若不經(jīng)過愈傷組織與含重組載體的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)環(huán)節(jié)，直接誘導(dǎo)培養(yǎng)植株，則獲得的植株遺傳物質(zhì)全部來(lái)自植株A，這種無(wú)性繁殖的方式可以保持植株A的遺傳特性。為遵守我國(guó)對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行的標(biāo)識(shí)制度，需對(duì)含有外源基因的轉(zhuǎn)化植株A生產(chǎn)的種子的包裝標(biāo)注“轉(zhuǎn)基因種子”。

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