
1. 下列傳統(tǒng)發(fā)酵食品的生產(chǎn)與所用主要微生物對(duì)應(yīng)正確的是( )
A. AB. BC. CD. D
【答案】A
【解析】
【分析】 果酒制作原理:在無(wú)氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。方程式:C?H??O?→2C?H?OH+2CO?
果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。方程式:C?H?OH+O?→CH?COOH+ H?O果酒在發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生CO?,所以發(fā)酵后,PH會(huì)變小。果醋在發(fā)酵過(guò)程中生成醋酸,所以發(fā)酵后,pH會(huì)變小。
腐乳是好氧發(fā)酵,主要用的是毛霉,是霉菌。它是利用毛霉產(chǎn)生的蛋白酶分解豆制品中的蛋白質(zhì),使用不易消化吸收的大分子蛋白質(zhì)分解為易于吸收的多肽,并產(chǎn)生多種風(fēng)味物質(zhì)。
泡菜是厭氧發(fā)酵,主要用的是乳酸菌,是細(xì)菌。它是利用乳酸菌在厭氧條件下產(chǎn)生乳酸,使蔬菜產(chǎn)生酸味,同時(shí)產(chǎn)生多種風(fēng)味物質(zhì)。
【詳解】A、果酒制作是在無(wú)氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵,酵母菌是真核生物,A正確;
B、發(fā)酵制果醋利用的微生物是醋酸菌,其為原核生物,B錯(cuò)誤;
C、制泡菜利用的微生物是乳酸菌,其為原核生物,C錯(cuò)誤;
D、制腐乳利用的微生物是毛霉,其為真核生物,D錯(cuò)誤。
故選A。
2. 用紙片擴(kuò)散法測(cè)定某病原菌對(duì)各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn),是在某病原菌均勻分布的平板上,鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果,其中抑菌圈是在紙片周圍出現(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是( )
A. 在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線法接種病原菌
B. 未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異
C. 形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感
D. 不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響
【答案】D
【解析】
【分析】紙片擴(kuò)散法是藥敏實(shí)驗(yàn)一種常用的方法,它將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測(cè)試菌的瓊脂平板上,紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散,形成遞減的梯度濃度,在紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的細(xì)菌生長(zhǎng)被抑制,形成透明的抑菌圈。
【詳解】A、在圖示固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種病原菌,A錯(cuò)誤;
B、病原菌發(fā)生抗性變異在接觸之前,未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌對(duì)該抗生素不敏感,B錯(cuò)誤;
C、微生物對(duì)藥物較敏感形成的抑菌圈應(yīng)較大,形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物敏感程度較低,C錯(cuò)誤;
D、紙片所含的藥物吸取平板中的水分溶解后便不斷向紙片周圍區(qū)域擴(kuò)散,不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響,D正確。
故選D。
3. 限量補(bǔ)充培養(yǎng)法可用于檢測(cè)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株(如圖)。將誘變后菌株接種在基本培養(yǎng)基上,野生型菌株迅速形成較大菌落,營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株生長(zhǎng)、繁殖緩慢,不出現(xiàn)菌落或形成微小菌落?;九囵B(yǎng)基中補(bǔ)充精氨酸后,營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株快速繁殖。下列敘述正確的是( )
A. 用紫外線照射可誘導(dǎo)野生型菌株發(fā)生定向突變
B. 精氨酸缺陷型菌株缺乏吸收利用精氨酸的能力
C. ③步驟加入精氨酸后抑制了野生型菌株的生長(zhǎng)
D. 選擇圖乙中菌落B分離精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株
【答案】D
【解析】
【分析】將誘變后的菌株接種在基本培養(yǎng)基上,野生型菌株迅速形成較大菌落,營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株生長(zhǎng)緩慢,不出現(xiàn)菌落或形成微小菌落。分析題圖:A表示野生型菌株形成的較大的菌落,B表示營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株形成的較小的菌落。
【詳解】A、用紫外線照射誘導(dǎo)野生型菌株發(fā)生的變異是基因突變,是不定向的,A錯(cuò)誤;
B、精氨酸缺陷型菌株缺乏將其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化為精氨酸的能力,B錯(cuò)誤;
C、圖中A表示野生型菌株形成的菌落,將圖乙與圖甲對(duì)比可知,③步驟加入精氨酸后促進(jìn)了野生型菌株的生長(zhǎng),C錯(cuò)誤;
D、對(duì)比圖甲和圖乙并結(jié)合題干信息可知,③步驟加入精氨酸后B(精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株)快速繁殖,所以可以選擇菌落B分離精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株,D正確。
故選D。
4. 檸檬酸廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)療和化工領(lǐng)域,具有重要的商業(yè)價(jià)值。以玉米粉為原料,利用黑曲霉有氧發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的基本流程如圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是
A. 玉米清液可以為黑曲霉提供碳源和能源
B. 發(fā)酵前將黑曲霉孢子接種到種子培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
C. 發(fā)酵培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基滅菌后加入到發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵
D. 需嚴(yán)格控制發(fā)酵罐內(nèi)的溫度、溶解氧和pH等條件
【答案】C
【解析】
【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。通常含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。
【詳解】A、玉米清液中含有蛋白質(zhì)和糖類等物質(zhì),故可以為黑曲霉提供碳源和能源,A正確;
B、據(jù)圖可知,發(fā)酵前將黑曲霉孢子接種到種子培養(yǎng)基,該措施的目的是進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),增加黑曲霉孢子的數(shù)量,B正確;
C、種子培養(yǎng)基中有發(fā)酵所需的菌種,若進(jìn)行滅菌處理會(huì)殺滅菌種而導(dǎo)致發(fā)酵失敗,C錯(cuò)誤;
D、黑曲霉屬于需氧生物,且微生物發(fā)酵過(guò)程需要適宜條件,所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件,D正確。
故選C。
5. 將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過(guò)程中,下列不屬于必需條件的是( )
A. 外植體細(xì)胞處于未分化狀態(tài)B. 細(xì)胞處于離體狀態(tài)
C. 細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核D. 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物激素
【答案】A
【解析】
【分析】
1、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性,其具體過(guò)程:外植體脫分化形成愈傷組織,再分化形成胚狀體,進(jìn)而形成新植體,其中脫分化過(guò)程要避光,而再分化過(guò)程需光。
2、植物組織培養(yǎng)的條件:①細(xì)胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等)。②一定的營(yíng)養(yǎng)(無(wú)機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)。
【詳解】AB、將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗,利用了植物細(xì)胞的全能性,植物細(xì)胞全能性的體現(xiàn)是高度分化的植物細(xì)胞只有處于離體狀態(tài)時(shí)才具有,A符合題意;B不符合題意;
C、細(xì)胞核是遺傳和代謝的控制中心,是遺傳信息庫(kù),故將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過(guò)程中植物細(xì)胞具有完整的細(xì)胞核,C不符合題意;
D、將蘭花細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗過(guò)程中需要一定的條件,如營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等植物激素、適宜的溫度、pH等,D不符合題意。
故選A。
【點(diǎn)睛】
6. 科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響,結(jié)果如下圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 脫毒苗的形成是基因突變的結(jié)果
B. 培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖大小為0.27mm最適宜
C. 莖尖越小脫毒率越高,成苗率越低
D. 莖尖培育成完整植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】圖示表示莖尖外植體大小對(duì)苗的脫毒率和成苗率的影響。莖尖越小,脫毒率越高,成苗率越低。在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí),脫毒率和成苗率均較高,因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm。
【詳解】A、馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無(wú)病毒,因此可利用馬鈴薯莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)形成脫毒苗,所依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性,A錯(cuò)誤;
B、在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí),脫毒率和成苗率均較高,因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm,B正確;
C、圖中,莖尖越小,脫毒率越高,成苗率越低,C正確;
D、細(xì)胞的全能性 是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后,仍具有產(chǎn)生完整 有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性。尖培育成完整植株體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性,D正確。
故選A。
7. 下圖表示矮牽牛的植物組織培養(yǎng)過(guò)程,相關(guān)敘述正確的是( )
A. 矮牽牛是自養(yǎng)生物,培養(yǎng)基中無(wú)需添加有機(jī)碳源
B. ①、②、③過(guò)程均可發(fā)生基因突變和基因重組
C. 植物細(xì)胞的全能性是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)
D. 用花粉和葉片做外植體獲得的植株基因型相同
【答案】C
【解析】
【分析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,然后再分化生成根、芽,最終形成植物體。
【詳解】A、矮牽牛組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需添加有機(jī)碳源作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),A錯(cuò)誤;
B、該過(guò)程中細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖,不會(huì)發(fā)生基因重組,B錯(cuò)誤;
C、植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性,C正確;
D、體細(xì)胞的基因型相同,通過(guò)減數(shù)分裂形成花粉粒,可以導(dǎo)致等位基因分離,非同源染色體上的非等位基因自由組合等,使得花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同,因此用花粉和葉片做外植體獲得的植株基因型可能不同,D錯(cuò)誤。
故選C。
8. 自然條件下蘭花雜交后代不易萌發(fā)。科研人員用四倍體品種綠寶石和二倍體品種春劍進(jìn)行雜交,獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)雜交蘭,并對(duì)其進(jìn)行染色體觀察與計(jì)數(shù),培育過(guò)程如下圖。下列分析不正確的是( )
A. 調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素的配比可影響原球莖的分裂與分化
B. 從雜交蘭組織中選擇有絲分裂中期的細(xì)胞觀察染色體并計(jì)數(shù)
C. 所得雜交蘭植株的體細(xì)胞染色體數(shù)目為120條
D. 通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)從雜種胚繁殖得到的大量雜交蘭性狀一致
【答案】C
【解析】
【分析】
1、植物組織培養(yǎng)過(guò)程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織,然后再分化生成根、芽,最終形成植物體.植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。
2、分析題圖:該圖是雜交育種和植物組織培養(yǎng)過(guò)程:春劍和綠寶石雜交獲得的雜種胚發(fā)育成原球莖為雜交育種;原球莖脫分化和再分化為試管苗為植物組織培養(yǎng)過(guò)程。
【詳解】A、原球莖經(jīng)脫分化和再分化發(fā)育成試管苗,此過(guò)程需要不斷調(diào)整培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素這兩種激素的比例,A正確;
B、有絲分裂中期,染色體形態(tài)、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,數(shù)目清晰,是觀察染色體的最佳時(shí)期,所以從雜交蘭組織中選擇有絲分裂中期的細(xì)胞觀察染色體并計(jì)數(shù),B正確;
C、春劍配子中染色體數(shù)目為20條,綠寶石配子的染色體數(shù)目為40條,春劍和綠寶石雜交,獲得的雜種胚染色體數(shù)目為60,雜種胚增殖分化過(guò)程中,遺傳物質(zhì)不變,所得雜交蘭植株的體細(xì)胞染色體數(shù)目為60條,C錯(cuò)誤;
D、通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行植物繁育,可以很好地保持親本的優(yōu)良性狀,原因是植物組織培養(yǎng)過(guò)程遺傳物質(zhì)不變,通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)從雜種胚繁殖得到的大量雜交蘭性狀一致,D正確。
故選C。
9. 從燒傷患者身上取少量健康的皮膚進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng),可構(gòu)建人造皮膚用于自體移植。下列不會(huì)發(fā)生在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的是( )
A. 減數(shù)分裂B. 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)
C. 接觸抑制D. 遺傳物質(zhì)發(fā)生改變
【答案】A
【解析】
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程:取動(dòng)物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞--制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液--轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的原理是細(xì)胞增殖,該過(guò)程發(fā)生的主要是有絲分裂,A符合題意;
BC、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)會(huì)發(fā)生細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制兩個(gè)現(xiàn)象,BC不符合題意;
D、在傳代培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變,D不符合題意。
故選A。
10. 為檢測(cè)某藥物X的抗癌活性, 在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞,使其貼壁生長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組加入溶于二甲基亞礬的藥物X,培養(yǎng) 72小時(shí)后進(jìn)行計(jì)數(shù),比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組每個(gè)孔中細(xì)胞數(shù)目。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清等天然成分
B. 對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無(wú)菌水, 其他條件一致
C. 可用胰蛋白酶處理使貼壁的肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)
D. 若實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)低于對(duì)照組, 可初步判斷此藥物有抗癌效果
【答案】B
【解析】
【分析】1、分析題干可知:自變量是藥物X,因變量是檢測(cè)癌細(xì)胞數(shù)量。2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素,防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染;③定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝廢物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(2)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)溫度和pH。(4)氣體環(huán)境:95%空氣和5%的CO2(CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH)。
【詳解】A、培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清,A正確;
B、實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X,故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬(溶劑),B錯(cuò)誤;
C、對(duì)于已經(jīng)貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞,可用胰蛋白酶處理,使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù),C正確;
D、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,添加藥物X的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)低于對(duì)照組,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好,D正確。
故選B。
11. 治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。與下圖所示流程相關(guān)的敘述不正確的是( )
A. 去核卵細(xì)胞一般取自處于減數(shù)分裂Ⅰ的卵母細(xì)胞
B. 過(guò)程①需要提供CO2,主要作用是維持培養(yǎng)液的酸堿度
C. 胚胎干細(xì)胞可取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),具有分化為各種類型細(xì)胞的能力
D. 圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體B理論上不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)
【答案】A
【解析】
【分析】治療性克隆主要應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù),該技術(shù)由高度分化的體細(xì)胞提供細(xì)胞核,處于減數(shù)分裂Ⅱ中期的卵母細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì);胚胎干細(xì)胞可來(lái)自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),其具有分化為各種體細(xì)胞的能力。
【詳解】A、去核卵細(xì)胞一般取自處于減數(shù)分裂Ⅱ中期的卵母細(xì)胞,A錯(cuò)誤;
B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需將培養(yǎng)液至于95%空氣+5%CO2氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱中,CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的酸堿度,B正確;
C、囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有分化為其他體細(xì)胞的能力,C正確;
D、個(gè)體B為提供細(xì)胞核的個(gè)體,和組織器官的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)相同,理論上不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng),D正確。
故選A。
12. 科學(xué)家將4個(gè)“關(guān)鍵基因”通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠的成纖維細(xì)胞,使其變成多能干細(xì)胞,并可分化為心臟細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞。下列有關(guān)敘述不正確的是( )
A. 本研究可避免從人體胚胎提取千細(xì)胞引起的倫理問(wèn)題
B. 研究中運(yùn)用的逆轉(zhuǎn)錄病毒屬于基因工程中的載體
C. 導(dǎo)入的4個(gè)“關(guān)鍵基因”可能與基因表達(dá)調(diào)控有關(guān)
D. 小鼠成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槎嗄芨杉?xì)胞是基因突變的結(jié)果
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程可將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,定向改造生物的性狀;常用的目的基因載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒等。
【詳解】A、多能干細(xì)胞是通過(guò)改造小鼠的成纖維細(xì)胞獲得,A正確;
B、逆轉(zhuǎn)錄病毒可作為目的基因的運(yùn)載體,B正確;
C、4個(gè)“關(guān)鍵基因”讓成纖維細(xì)胞變成多能干細(xì)胞,該過(guò)程可能與成纖維細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控有關(guān),C正確;
D、成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槎嗄芨杉?xì)胞是基因重組的結(jié)果,D錯(cuò)誤;
故選D。
13. 利用新鮮洋蔥作為實(shí)驗(yàn)材料提取DNA時(shí)( )
A. 可將洋蔥置于清水中,細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來(lái)
B. 離心后上清液中加入75%冷酒精,出現(xiàn)的白色絲狀物就是純凈的DNA
C. 將晾干的白色絲狀物置于2ml/L的NaCl溶液中,會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象
D. 可利用DNA在低溫下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)的特性對(duì)其進(jìn)行鑒定
【答案】C
【解析】
【分析】DNA粗提取和鑒定的原理:
1、DNA的溶解性:
(1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同(0.14ml/L溶解度最低),利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。
(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。
2、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80℃的高溫,而DNA在80℃以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對(duì)DNA沒(méi)有影響。
3、DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】A、洋蔥是植物細(xì)胞,其細(xì)胞壁有保護(hù)和支撐的作用,不會(huì)吸水漲破,需要用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜,A錯(cuò)誤;
B、在上清液中加入等體積的95%的冷酒精,白色絲狀物是粗提取的DNA,B錯(cuò)誤;
C、DNA在2ml/L的氯化鈉溶液中溶解度較大,所以將晾干的白色絲狀物置于2ml/L的NaCl溶液中,會(huì)發(fā)生溶解現(xiàn)象,C正確;
D、DNA在沸水浴條件下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng),D錯(cuò)誤。
故選C。
【點(diǎn)睛】
14. 利用PCR技術(shù)分析糞便已成為珍稀野生動(dòng)物種群調(diào)查的有效手段。同種生物不同個(gè)體在同源染色體某些位置上DNA片段長(zhǎng)度存在差異,這些片段可作為辨別不同個(gè)體的依據(jù)。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 需去除糞便中微生物的DNA以免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果
B. 設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮物種特異性
C. 反應(yīng)體系中需加入四種脫氧核苷酸作為原料
D. PCR獲得的不同長(zhǎng)度片段可通過(guò)電泳檢測(cè)
【答案】A
【解析】
【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù);過(guò)程:①高溫變性:DNA解旋過(guò)程;②低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈,PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)。
【詳解】A、由于不同的生物DNA具有特異性,故利用PCR技術(shù)辨別不同個(gè)體時(shí)不需要去除糞便中微生物的DNA,A錯(cuò)誤;
B、引物是一端目的基因的核苷酸序列,設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)需要考慮物種特異性,B正確;
C、PCR是對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增的技術(shù),反應(yīng)體系中需加入四種脫氧核苷酸作為原料,C正確;
D、PCR獲得的不同長(zhǎng)度片段可通過(guò)電泳檢測(cè),D正確。
故選A
15. 為了防止轉(zhuǎn)基因作物的目的基因通過(guò)花粉轉(zhuǎn)移到自然界中其他植物,研究人員設(shè)法將目的基因整合到受體細(xì)胞的葉綠體基因組中,其原因是( )
A. 葉綠體基因不會(huì)進(jìn)入到生殖細(xì)胞中
B. 受精卵中的細(xì)胞質(zhì)基因幾乎全部來(lái)自卵細(xì)胞
C. 轉(zhuǎn)基因植物與其他植物不能通過(guò)花粉進(jìn)行基因交流
D. 轉(zhuǎn)基因植物與其他植物雜交的后代不出現(xiàn)一定的性狀分離比
【答案】B
【解析】
【分析】花粉中含有精子,精子幾乎不含細(xì)胞質(zhì),受精卵中的細(xì)胞質(zhì)幾乎全來(lái)自卵細(xì)胞。
【詳解】由于受精卵中的細(xì)胞質(zhì)幾乎全部來(lái)自卵細(xì)胞,精子中幾乎不含細(xì)胞質(zhì),因此將目的基因整合到受體細(xì)胞的葉綠體基因組,可以避免目的基因通過(guò)花粉轉(zhuǎn)移到自然界中其他植物,B正確。
故選B
16. 將黑色小鼠囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)部分細(xì)胞注射到白色小鼠囊胚腔中,接受注射的囊胚發(fā)育為黑白相間的小鼠(Mc)。據(jù)此分析,下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 獲得Mc的生物技術(shù)屬于核移植
B. Mc表皮中有兩種基因型的細(xì)胞
C. 注射入的細(xì)胞會(huì)分化成Mc的多種組織
D. 將接受注射的囊胚均分為二,可發(fā)育成兩只幼鼠
【答案】A
【解析】
【分析】胚胎發(fā)育的過(guò)程:①卵裂期:細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)量增加,胚胎總體積不增加;②桑葚胚:32個(gè)細(xì)胞左右的胚胎(之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞);③囊胚:細(xì)胞開(kāi)始分化,其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胎兒的各種組織;而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔(注:囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂胚胎伸展出來(lái),這一過(guò)程叫孵化)﹔④原腸胚:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層,下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚層包圍的囊腔叫原腸腔。
【詳解】A、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)是已經(jīng)分化的細(xì)胞組成,獲得Mc的生物技術(shù)并未利用核移植技術(shù),A錯(cuò)誤;
B、接受注射的囊胚發(fā)育為黑白相間的小鼠,說(shuō)明Mc表皮中有兩種基因型的細(xì)胞,B正確;
C、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)能發(fā)育成胎兒的各種組織,注射的細(xì)胞來(lái)自黑色小鼠的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),會(huì)分化成Mc的多種組織,C正確;
D、利用胚胎分割技術(shù)將接受注射的囊胚均分為二,可發(fā)育成兩只幼鼠,D正確。
故選A。
17. 為了對(duì)重金屬污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù),研究者將從楊樹(shù)中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動(dòng)子連接,導(dǎo)入楊樹(shù)基因組中(如圖)。
為檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因,同時(shí)避免內(nèi)源HMA3基因的干擾,在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),應(yīng)選擇的引物組合是( )
A. ①+③B. ①+②C. ③+②D. ③+④
【答案】B
【解析】
【分析】根據(jù)圖示中引物的位置可知,引物①擴(kuò)增的片段含有啟動(dòng)子和HMA3基因,引物③擴(kuò)增的片段不含啟動(dòng)子,引物②擴(kuò)增的片段既含有啟動(dòng)子,又含有HMA3基因序列。
【詳解】圖示中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動(dòng)子連接,導(dǎo)入楊樹(shù)基因組中,若要檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因和高效啟動(dòng)子,需要檢測(cè)是否含有高效啟動(dòng)子序列和HMA3基因序列,應(yīng)選擇的引物組合是①+②,即B正確,ACD錯(cuò)誤。
故選B。
18. 為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無(wú)籽柑橘,研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述不正確的是( )
A. 過(guò)程①需使用胰蛋白酶處理
B. 實(shí)現(xiàn)過(guò)程②依賴膜的流動(dòng)性
C. 過(guò)程③需應(yīng)用植物組培技術(shù)
D. 三倍體植株可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘
【答案】A
【解析】
【分析】分析圖示可知,①過(guò)程為原生質(zhì)體的制備過(guò)程,需要纖維素酶和果膠酶,②過(guò)程為原生質(zhì)體的融合過(guò)程,需要誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合,③過(guò)程為植物組織培養(yǎng)的過(guò)程。
【詳解】A、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,所以過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理,A錯(cuò)誤;
B、②過(guò)程為細(xì)胞融合過(guò)程,該過(guò)程依賴膜的流動(dòng)性,B正確;
C、過(guò)程③需應(yīng)用植物組培技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)形成個(gè)體,C正確;
D、三倍體植株含有三個(gè)染色體組,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂,可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘,D正確。
故選A。
19. 用XhI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段,酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是( )
A. 如圖中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同
B. 如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNA
C. 泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物
D. 圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA
【答案】D
【解析】
【詳解】【分析】該題考查DNA的結(jié)構(gòu)、限制酶的特點(diǎn)和功能等。DNA一般是雙螺旋結(jié)構(gòu);限制酶可以識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列,并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割。
【詳解】限制酶識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列,不同的限制酶能識(shí)別不同的核苷酸序列,由電泳圖可知XhI和SalI兩種酶分別切割時(shí),識(shí)別的序列不同,A正確;同種限制酶切割出的DNA片段,具有相同的黏性末端,再用DNA連接酶進(jìn)行連接,可以構(gòu)成重組DNA,B正確;Sal I將DNA片段切成4段,Xh I將DNA片段切成3段,根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為Sal I,泳道②為Xh I,C正確;限制酶切割雙鏈DNA,酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA,D錯(cuò)誤,所以選D。
【點(diǎn)睛】注意圖1兩種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)數(shù)量,Sal I有3個(gè)識(shí)別位點(diǎn),能將DNA片段切成4段,Xh I有2個(gè)識(shí)別位點(diǎn),能將DNA片段切成3段。
20. 甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株,再將二者雜交后得到F1,結(jié)合單倍體育種技術(shù),培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種,以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述,錯(cuò)誤的是
A. 將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞
B. 通過(guò)接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定
C. 調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株
D. 經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體
【答案】D
【解析】
【分析】由題意可知,同時(shí)抗甲、乙的植物新品種的培養(yǎng)過(guò)程為:把含抗甲的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞,獲得抗甲植株,同時(shí)把含抗乙的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞,獲得抗乙植株,通過(guò)雜交獲得F1(二倍體植株),取F1的花粉經(jīng)花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株,用秋水仙素處理單倍體植株獲得純合的同時(shí)抗甲、乙的植物新品種(二倍體)。
【詳解】要獲得轉(zhuǎn)基因的抗甲或抗乙植株,需要構(gòu)建基因表達(dá)載體(含目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)),再把基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中,A正確;對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以通過(guò)抗病接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè),B正確;對(duì)F1的花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),需要經(jīng)過(guò)脫分化和再分化過(guò)程,其中生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例高時(shí)利于根的分化,比例低時(shí)利于芽的分化,C正確;經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的植株是單倍體,D錯(cuò)誤。因此,本題答案選D。
第二部分 本部分共5題,共60分。
21. 我國(guó)科研人員對(duì)秸稈資源的合理利用進(jìn)行研究。
(1)秸稈的主要成分包括植物細(xì)胞壁中的纖維素和半纖維素等多種物質(zhì),纖維素徹底水解后得到 _________(物質(zhì)名稱)。
(2)科研人員首先從土壤中分離纖維素分解菌和半纖維素分解菌。分離纖維素分解菌的方法是:①制備培養(yǎng)基:制備以纖維素為_(kāi)________的培養(yǎng)基,并加入剛果紅。
②接種:將收集的土壤加入無(wú)菌水后搖勻,進(jìn)行梯度稀釋,將稀釋液_________在制備的選擇培養(yǎng)基平板上。
③纖維素分解菌的分離:纖維素分解菌能夠分泌纖維素酶,依據(jù)_________的比值,篩選得到能高效分解纖維素的菌種。
(3)用所得菌種進(jìn)行發(fā)酵,分解秸稈中的纖維素和半纖維素,其中,半纖維素水解產(chǎn)物中的醋酸鹽是進(jìn)一步發(fā)酵的抑制劑??蒲腥藛T嘗試?yán)么x途徑較多的酵母菌株S將醋酸鹽消耗掉,并在此基礎(chǔ)上改造菌種,發(fā)酵產(chǎn)生維生素A等更多有價(jià)值的產(chǎn)物。
①科研人員進(jìn)行圖1所示實(shí)驗(yàn),探究不同底物條件下醋酸鹽對(duì)菌株S發(fā)酵的影響。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出的結(jié)論是:_________。
②研究發(fā)現(xiàn),菌株S能吸收木糖和醋酸鹽等物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵,代謝途徑如圖2。
由圖2可知,葡萄糖和木糖進(jìn)入酵母細(xì)胞后,通過(guò)_________過(guò)程為酵母菌的生長(zhǎng)和分裂提供大量能量。據(jù)圖2分析,圖1中3組酵母細(xì)胞干重小于6組的原因是:葡萄糖一方面可以_________,另一方面可以____,進(jìn)而影響脂類物質(zhì)的合成。
(4)將工程菌加入到含有秸稈水解產(chǎn)物的發(fā)酵罐中,嚴(yán)格控制發(fā)酵條件,隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量和_________等,以便及時(shí)補(bǔ)充發(fā)酵原料,實(shí)現(xiàn)秸稈資源的充分利用。
【答案】(1)葡萄糖 (2) ①. 唯一碳源 ②. 涂布 ③. 菌落直徑與透明圈直徑
(3) ①. ①葡萄糖為底物的條件下,不同濃度醋酸鹽均抑制菌株S生長(zhǎng),濃度越高抑制作用越強(qiáng);木糖為底物的條件下則相反 ②. 有氧呼吸 ③. 抑制醋酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入酵母細(xì)胞. ④. 抑制醋酸鹽轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A
(4)產(chǎn)物濃度##底物濃度
【解析】
【分析】1、分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理:
①土壤中存在著大量纖維素分解酶,包括真菌、細(xì)菊和放線菌等,它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶,可以把纖維素分解為纖維二糖,進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用,故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中,纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng),其他微生物則不能生長(zhǎng)。
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅,可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解后,紅色復(fù)合物不能形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,從而可篩選纖維素分解菌。
2、有氧呼吸的全過(guò)程,可以分為三個(gè)階段:第一個(gè)階段,一個(gè)分子的葡萄糖分解成兩個(gè)分子的丙酮酸,在分解的過(guò)程中產(chǎn)生少量的[H],同時(shí)釋放出少量的能量,這個(gè)階段是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行的;第二個(gè)階段,丙酮酸和水經(jīng)過(guò)一系列的反應(yīng),分解成二氧化碳和[H],同時(shí)釋放出少量的能量。這個(gè)階段是在線粒體基質(zhì)中進(jìn)行的;第三個(gè)階段,前兩個(gè)階段產(chǎn)生的[H],經(jīng)過(guò)一系列的反應(yīng),與氧結(jié)合而形成水,同時(shí)釋放出大量的能量。
【小問(wèn)1詳解】
纖維素屬于多糖,是葡萄糖脫水縮合形成的多聚物,因此水解后得到葡萄糖。
【小問(wèn)2詳解】
①分離纖維素分解菌,首先制備以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,在其上能生長(zhǎng)的即為能利用纖維素的微生物。②稀釋涂布平板法可以用來(lái)分離菌種,將稀釋液涂布在制備的選擇培養(yǎng)基平板上。③纖維素被分解,會(huì)使菌落周圍出現(xiàn)透明圈,因此透明圈直徑與菌落直徑比值大的,即為降解纖維素能力強(qiáng)的菌種。
【小問(wèn)3詳解】
①根據(jù)圖1所示結(jié)果,自變量為不同底物(葡萄糖或者木糖)、醋酸鹽濃度,因變量為細(xì)胞干重。組別1、2、3為葡萄糖為底物醋酸鹽的作用,1為對(duì)照組,可知,葡萄糖為底物的條件下,不同濃度醋酸鹽均抑制菌株S生長(zhǎng),濃度越高抑制作用越強(qiáng);4、5、6為木糖為底物,4為對(duì)照組,可知木糖為底物的條件下,不同濃度醋酸鹽均促進(jìn)菌株S生長(zhǎng),濃度越高促進(jìn)作用越強(qiáng)。②由圖2可知,葡萄糖和木糖進(jìn)入酵母細(xì)胞后,首先轉(zhuǎn)化為丙酮酸,再進(jìn)入線粒體中氧化分解釋放能量,合成ATP,即通過(guò)有氧呼吸(氧化分解)過(guò)程為酵母菌的生長(zhǎng)和分裂提供大量能量。據(jù)圖2分析,葡萄糖可以通過(guò)作用于兩個(gè)過(guò)程來(lái)抑制脂類物質(zhì)的合成,一方面可以抑制醋酸鹽進(jìn)入酵母菌細(xì)胞,另一方面可以抑制醋酸鹽與ATP反應(yīng)生成乙酰輔酶A。
【小問(wèn)4詳解】
發(fā)酵過(guò)程是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),在發(fā)酵過(guò)程中,要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等,以了解發(fā)酵進(jìn)程,以便及時(shí)補(bǔ)充發(fā)酵原料,實(shí)現(xiàn)秸稈資源的充分利用。
22. 由致病疫霉引起的晚疫病是造成馬鈴薯嚴(yán)重減產(chǎn)的毀滅性病害。馬鈴薯野生種中含有抗晚疫病基因,但由于存在生殖隔離,難以通過(guò)常規(guī)雜交育種方法將其導(dǎo)入栽培種中??蒲腥藛T利用抗病的二倍體馬鈴薯野生種(2n=24)和易感病的四倍體馬鈴薯栽培種(4n=48)進(jìn)行體細(xì)胞雜交,培育抗晚疫病馬鈴薯。
(1)將馬鈴薯野生種和栽培種的葉片用____________酶處理,獲得有活力的原生質(zhì)體,加入________試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。將融合細(xì)胞形成的愈傷組織接種到含有_____________和營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基上,發(fā)育形成完整的再生植株。
(2)如圖是對(duì)雙親及再生植株的基因組DNA特異性片段進(jìn)行體外擴(kuò)增后的電泳結(jié)果。圖中泳道____________代表再生植株,判斷依據(jù)是____________。
(3)科研人員借助流式細(xì)胞儀測(cè)定馬鈴薯野生種、馬鈴薯栽培種和再生植株的DNA相對(duì)含量,由結(jié)果推測(cè)再生植株為_(kāi)___________倍體,理由是_____________。
(4)為確定該再生植株是否符合育種要求,還需對(duì)其進(jìn)行____________鑒定。
【答案】 ①. 纖維素酶和果膠 ②. 聚乙二醇(PEG) ③. 植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等) ④. 3 ⑤. 3同時(shí)具有1和2的DNA特異性片段 ⑥. 六 ⑦. 再生植株細(xì)胞中DNA相對(duì)含量為150,由一個(gè)四倍體馬鈴薯栽培種原生質(zhì)體和一個(gè)二倍體馬鈴薯野生種原生質(zhì)體融合得到的雜種細(xì)胞發(fā)育而來(lái) ⑧. 晚疫病抗性
【解析】
【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)由兩種不同植株通過(guò)纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,獲得兩種不同原生質(zhì)體,原生質(zhì)體通過(guò)聚乙二醇(PEG)試劑誘導(dǎo)融合,融合后的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁,獲得雜種植株。
【詳解】(1)植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,將馬鈴薯野生種和栽培種的葉片用纖維素酶和果膠酶處理,獲得有活力的原生質(zhì)體,加入聚乙二醇(PEG)試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。將融合細(xì)胞形成的愈傷組織接種到含有植物激素(生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等)和營(yíng)養(yǎng)的培養(yǎng)基上,發(fā)育形成完整的再生植株;
(2)再生植株同時(shí)含有兩種植物的基因,圖中泳道3同時(shí)具有1和2的DNA特異性片段,故泳道3代表再生植株。
(3)由結(jié)果推測(cè)再生植株為六倍體,理由是再生植株細(xì)胞中DNA相對(duì)含量為150,由一個(gè)四倍體馬鈴薯栽培種原生質(zhì)體和一個(gè)二倍體馬鈴薯野生種原生質(zhì)體融合得到的雜種細(xì)胞發(fā)育而來(lái),二倍體馬鈴薯野生種含有2個(gè)染色體組,易感病的四倍體馬鈴薯含有4個(gè)染色體組,因此再生植株含有6個(gè)染色體組,所以再生植株為六倍體。
(4)為確定該再生植株是否符合育種要求(是否具有抗晚疫病特性),還需對(duì)其進(jìn)行晚疫病抗性鑒定。
【點(diǎn)睛】本題主要考查植物體細(xì)胞雜交技術(shù),如何鑒定雜種植株是否符合育種要求。
23. 為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體——藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取________________區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取________________細(xì)胞,利用________________誘導(dǎo)此細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)篩選得到雜交瘤細(xì)胞,通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè),多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終可通過(guò)________________培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DM1結(jié)合構(gòu)建抗體——藥物偶聯(lián)物CLDN6-DM1。用不同濃度的游離DM1、CLDN6-DM1或lgG-DM1(無(wú)關(guān)抗體-DM1)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖。
①由圖可知,CLDN6-DM1能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是________________。
②研究發(fā)現(xiàn),DM1是一種小分子物質(zhì),能夠抑制紡錘體微管的形成,由此分析DM1能夠進(jìn)入細(xì)胞中通過(guò)抑制細(xì)胞的_________________過(guò)程起到抗癌的作用。
③下圖表示抗體-藥物偶聯(lián)物CLDN6-DM1的作用機(jī)制。
由圖分析,CLDN6-DM1能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是________________。若用紅色熒光標(biāo)記的CLDN6-DM1和lgG-DM1處理肝腫瘤細(xì)胞來(lái)證明上述機(jī)制,則應(yīng)觀察到的現(xiàn)象是_________________。
【答案】(1)胞外 (2) ①. 免疫的B淋巴 ②. PEG(聚乙二醇)或滅活病毒 ③. 體內(nèi)或體外
(3) ①. 與低表達(dá)CLDN6細(xì)胞相比,隨CLDN6ab—DM1處理濃度的升高,高表達(dá)CLDN6細(xì)胞活力下降幅度大,而用IgG-DM1處理兩種細(xì)胞結(jié)果無(wú)明顯差異 ②. 有絲分裂 ③. CLDN6—DM1與高表達(dá)CLDN6細(xì)胞上的CLDN6蛋白特異性結(jié)合的多,進(jìn)入細(xì)胞中,通過(guò)溶酶體裂解,將DM1釋放出來(lái)發(fā)揮作用 ④. 用紅色熒光標(biāo)記的CLDN6—DM1處理肝腫瘤細(xì)胞可在細(xì)胞中及溶酶體中檢測(cè)到紅色熒光,而用IgG-DM1處理則不能檢測(cè)到
【解析】
【分析】單克隆抗體制備的基本步驟:對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過(guò)篩選、克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體。
【小問(wèn)1詳解】
CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),其中抗原特性由胞外區(qū)決定,因此制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取胞外區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
【小問(wèn)2詳解】
將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),能引發(fā)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞。誘導(dǎo)動(dòng)物融合中常用的生物誘導(dǎo)因素是:PEG(聚乙二醇)或滅活病毒。多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可以在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)(體外培養(yǎng)),或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖(體內(nèi)培養(yǎng))。
【小問(wèn)3詳解】
①據(jù)圖可知,與低表達(dá)CLDN6細(xì)胞相比,隨CLDN6ab—DM1處理濃度的升高,高表達(dá)CLDN6細(xì)胞活力下降幅度大,而用IgG-DM1處理兩種細(xì)胞結(jié)果無(wú)明顯差異,因此CLDN6-DM1能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞。
②癌細(xì)胞分裂方式為有絲分裂,在有絲分裂前期,由中心體發(fā)出的星射線形成紡錘體,DM1是一種小分子物質(zhì),能夠抑制紡錘體微管的形成,據(jù)此推測(cè),DM1能夠進(jìn)入細(xì)胞中通過(guò)抑制細(xì)胞的有絲分裂過(guò)程起到抗癌的作用。
③據(jù)圖可知,CLDN6—DM1包括3部分,抗體、藥物DM1、接頭,抗體部分能與高表達(dá)CLDN6細(xì)胞上的CLDN6蛋白特異性結(jié)合的多,進(jìn)入細(xì)胞中,通過(guò)溶酶體裂解,將DM1釋放出來(lái)發(fā)揮作用,因此CLDN6-DM1能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞。lgG-DM1是無(wú)關(guān)抗體,不能與腫瘤細(xì)胞上的CLDN6蛋白結(jié)合,因此若用紅色熒光標(biāo)記的CLDN6-DM1和lgG-DM1處理肝腫瘤細(xì)胞來(lái)證明上述機(jī)制,紅色熒光標(biāo)記的CLDN6—DM1處理肝腫瘤細(xì)胞可在細(xì)胞中及溶酶體中檢測(cè)到紅色熒光,而用IgG-DM1處理則不能檢測(cè)到。
24. 閱讀下面的材料,完成(1)~(4)題。
轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品已經(jīng)越來(lái)越多地進(jìn)入了人們的生活。2020年7月,兩種國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物獲得生物安全證書(shū)。這是近十年來(lái)第二批獲得生物安全證書(shū)的國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)基因作物,一種是轉(zhuǎn)epsps和pat基因抗除草劑玉米(DBN9858),另一種是轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆。我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó),對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物的管理非常嚴(yán)格。根據(jù)我國(guó)法規(guī),除需對(duì)國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物進(jìn)行檢測(cè)外,進(jìn)出境的所有農(nóng)產(chǎn)品均需進(jìn)行轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)。
對(duì)轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的檢測(cè)方法,目前主要有兩類:一類是以導(dǎo)入外源基因的特定DNA序列為檢測(cè)對(duì)象;另一類則是以外源基因表達(dá)的蛋白質(zhì)為檢測(cè)對(duì)象。通常被檢測(cè)的特定DNA序列包括兩類:一類是非目的基因序列,主要為載體上通常具有的各種組成元件;另一類被檢測(cè)的則是目的基因序列本身。
基因芯片技術(shù)是一種能有效地對(duì)轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行檢測(cè)的新技術(shù)。以對(duì)DBN9858的檢測(cè)為例,第一步,針對(duì)待測(cè)的特定DNA片段設(shè)計(jì)引物,擴(kuò)增出的特定DNA片段帶上標(biāo)記制成探針,經(jīng)變性后通過(guò)芯片點(diǎn)樣儀固定到雜交膜上,再經(jīng)過(guò)一定的處理,便得到可用于檢測(cè)的DNA芯片(如圖1);第二步,從待測(cè)植物中提取DNA作為模板,加入引物進(jìn)行擴(kuò)增;第三步,將擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)過(guò)變性處理后鋪于芯片表面,放入雜交盒中,在適宜條件下進(jìn)行雜交;第四步,待反應(yīng)結(jié)束后,對(duì)芯片進(jìn)行清洗等處理,用儀器檢測(cè)芯片上的雜交結(jié)果。利用基因芯片可以實(shí)現(xiàn)一次性高通量快速檢測(cè),是一種具有良好發(fā)展前景的檢測(cè)手段。
(1)利用基因芯片可檢測(cè)特定DNA序列依據(jù)的是____________原則。對(duì)DBN9858進(jìn)行檢測(cè)的基因芯片的陣列設(shè)計(jì)為:第1列為空白對(duì)照,第2列固定玉米植株的內(nèi)源基因作為陽(yáng)性對(duì)照,第3列固定與玉米DNA序列高度____________(填“同源”或“非同源”)的DNA片段作為陰性對(duì)照,第4~6列可分別固定____________、____________、____________進(jìn)行檢測(cè),每列重復(fù)多次以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(2)制備探針可采用缺口平移法(如圖2),即先利用DNA酶使DNA分子上產(chǎn)生____________(填“單鏈”或“雙鏈”)缺口,再利用DNA聚合酶具有的核酸外切酶活性和聚合酶活性,在缺口處的5'末端每切除一個(gè)脫氧核苷酸,同時(shí)在3'末端添加一個(gè)_____________的脫氧核苷酸,最終制成所需探針。
(3)若該基因芯片檢測(cè)有效,轉(zhuǎn)基因玉米DBN9858的樣本在芯片的第____________列上均應(yīng)出現(xiàn)檢測(cè)信號(hào),非轉(zhuǎn)基因玉米則應(yīng)在第____________列上出現(xiàn)檢測(cè)信號(hào)。若該基因芯片準(zhǔn)備商品化,你認(rèn)為還應(yīng)該在哪些方面進(jìn)一步改進(jìn)? ____________(至少一點(diǎn))
(4)除了基因檢測(cè),還可以采用____________方法檢測(cè)農(nóng)產(chǎn)品中的蛋白質(zhì).對(duì)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)時(shí),常常會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果,下列分析合理的是____________。
A.某些檢測(cè)成分在植物中天然存在,導(dǎo)致檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
B.PCR引物設(shè)計(jì)復(fù)雜,若引物間發(fā)生結(jié)合,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
C.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中外源基因表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞中被加工、修飾,難以檢測(cè),出現(xiàn)假陰性結(jié)果
D.轉(zhuǎn)基因作物中的外源成分含量低、在加工過(guò)程中易變性,導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果
【答案】 ①. 堿基互補(bǔ)配對(duì) ②. 非同源 ③. epsps基因 ④. pat基因 ⑤. 啟動(dòng)子(或終止子、標(biāo)記基因)(3空順序可變) ⑥. 單鏈 ⑦. 帶標(biāo)記 ⑧. 2456 ⑨. 2 ⑩. 提高檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性;增加可檢測(cè)DNA序列種類,提高通用性;改進(jìn)技術(shù)簡(jiǎn)化檢測(cè)過(guò)程、提高自動(dòng)化水平等 ?. 抗原-抗體雜交 ?. ACD
【解析】
【分析】探針是指以放射性同位素、生物素或熒光染料等進(jìn)行標(biāo)記的已知核苷酸序列的核酸片段,可用于核酸分子雜交以檢測(cè)目標(biāo)核苷酸序列是否存在。目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因:DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA:分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原-抗體雜交技術(shù)。
【詳解】(1)利用基因芯片可檢測(cè)特定DNA序列依據(jù)的是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。DBN9858是一種轉(zhuǎn)epsps和pat基因抗除草劑玉米,對(duì)DBN9858進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí),需要設(shè)置不含epsps和pat基因的對(duì)照組,由于啟動(dòng)子可調(diào)控epsps和pat基因的表達(dá),故啟動(dòng)子的序列也需要檢測(cè),因此基因芯片的陣列設(shè)計(jì)為:第1列為空白對(duì)照,第2列固定玉米植株的內(nèi)源基因作為陽(yáng)性對(duì)照,第3列固定與玉米DNA序列高度非同源的DNA片段作為陰性對(duì)照,第4~6列可分別固定epsps基因、pat基因、啟動(dòng)子(或終止子、標(biāo)記基因)進(jìn)行檢測(cè),每列重復(fù)多次以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
(2)據(jù)圖可知,利用DNA酶可使DNA分子上產(chǎn)生單鏈缺口,再利用DNA聚合酶具有的核酸外切酶活性和聚合酶活性,在缺口處的5'末端每切除一個(gè)脫氧核苷酸,同時(shí)在3'末端添加一個(gè)帶標(biāo)記的脫氧核苷酸,最終制成所需帶標(biāo)記的探針。
(3)若該基因芯片檢測(cè)有效,則轉(zhuǎn)基因玉米DBN9858的樣本含有玉米植株的內(nèi)源基因、epsps和pat基因和啟動(dòng)子序列,故在芯片的第2、4、5、6列上均應(yīng)出現(xiàn)檢測(cè)信號(hào),而非轉(zhuǎn)基因玉米只含普通玉米的內(nèi)源基因,則應(yīng)在第2列上出現(xiàn)檢測(cè)信號(hào)。若該基因芯片準(zhǔn)備商品化,還需要提高檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性;增加可檢測(cè)DNA序列種類,提高通用性;改進(jìn)技術(shù)簡(jiǎn)化檢測(cè)過(guò)程、提高自動(dòng)化水平等。
(4)檢測(cè)基因表達(dá)的產(chǎn)物蛋白質(zhì)還可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。
A、某些檢測(cè)成分在植物中天然存在,會(huì)導(dǎo)致抗原-抗體檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,A正確;
B、PCR引物間若發(fā)生結(jié)合,會(huì)導(dǎo)致PCR復(fù)制過(guò)程不能進(jìn)行,不會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,B錯(cuò)誤;
C、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中外源基因表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞中被加工、修飾,則導(dǎo)致抗原與外源基因表達(dá)產(chǎn)物不能結(jié)合,難以檢測(cè),從而出現(xiàn)假陰性結(jié)果,C正確;
D、轉(zhuǎn)基因作物中的外源成分含量低、在加工過(guò)程中易變性,導(dǎo)致抗原與外源基因表達(dá)產(chǎn)物不能識(shí)別,從而出現(xiàn)假陰性結(jié)果,D正確。
故選ACD。
【點(diǎn)睛】本題考查轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)品的檢測(cè)方法,意在考查考生獲取信息,并應(yīng)用所學(xué)知識(shí)解決問(wèn)題的能力。
25. 提高光合速率是提高作物產(chǎn)量的重要手段。Rubisc是催化光合作用CO2固定過(guò)程的關(guān)鍵酶,RCA是一種核基因編碼的葉綠體蛋白,對(duì)Rubisc作用的發(fā)揮有影響。研究人員通過(guò)反義RNA技術(shù)有針對(duì)性地使水稻中rca基因沉默,以研究RCA與Rubisc間的調(diào)控關(guān)系。
(1)反義RNA分子能夠依據(jù)________________原則與特定序列相結(jié)合。推測(cè)反義mRNA使基因沉默的原理可能是_________________。
(2)得到反義RNA的關(guān)鍵是把原DNA序列反方向插入到表達(dá)載體中合適的啟動(dòng)子和終止子之間。反義rca基因表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程示意圖如圖1。圖中過(guò)程①用限制酶________________和DNA連接酶處理,將rca基因連接到載體Ⅰ上,經(jīng)篩選獲得如圖所示結(jié)果,使rca兩端引入與表達(dá)載體Ⅱ相匹配的酶切位點(diǎn);過(guò)程②中,用限制酶________________和DNA連接酶處理,獲得重組基因表達(dá)載體。為鑒定該基因表達(dá)載體中rca基因的插入方向,選用限制酶EcRI對(duì)上述表達(dá)載體進(jìn)行切割,若切下片段為_(kāi)_______________(選填“rca和終止子”或“僅終止子”),則為反義RCA基因表達(dá)載體。
(3)采用電激法將反義rca基因表達(dá)載體導(dǎo)入________________中,再將其與水稻愈傷組織共培養(yǎng)成T0代幼苗。擬通過(guò)PCR篩選出轉(zhuǎn)基因成功的T0代水稻幼苗。某同學(xué)提出應(yīng)針對(duì)rca基因的特定序列設(shè)計(jì)引物,你認(rèn)為該想法是否可行?請(qǐng)說(shuō)明理由________________。
(4)T0代幼苗移栽后45d內(nèi)16株苗相繼死亡,最終成活的突變體僅僅3株,株高都明顯低于野生型水稻,為探究其原因,科研人員對(duì)轉(zhuǎn)基因水稻和野生型水稻光合速率進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如圖2,分析結(jié)果可知rca基因能夠水稻的光合速率。
進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞中相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果如表所示。綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測(cè),rca基因影響水稻株高性狀的機(jī)制是________________。
【答案】(1) ①. 堿基互補(bǔ)配對(duì) ②. 反義RNA與正義RNA結(jié)合,抑制核糖體與其結(jié)合,阻斷翻譯過(guò)程進(jìn)而抑制基因表達(dá)(或反義RNA與正義RNA結(jié)合,引發(fā)正義RNA降解,抑制翻譯過(guò)程進(jìn)而抑制基因表達(dá);反義RNA與前體mRNA結(jié)合,抑制前體RNA的加工,抑制翻譯過(guò)程進(jìn)而抑制基因表達(dá);反義RNA與DNA上相關(guān)基因的啟動(dòng)子結(jié)合,抑制該基因的正常轉(zhuǎn)錄,進(jìn)而抑制基因表達(dá))(寫(xiě)出其中一種即可)
(2) ①. EcRI ②. BamHI ③. rca和終止子
(3) ①. 農(nóng)桿菌 ②. 不可行,無(wú)論是否轉(zhuǎn)入反義 rca基因,植物體內(nèi)都有內(nèi)源的rca基因
(4)提高rca基因提升Rubisc活力,促進(jìn)CO2固定,提高光合速率,進(jìn)而增加有機(jī)物積累量,促進(jìn)植株生長(zhǎng)
【解析】
【分析】分析圖2可知,提高rca基因能提升Rubisc活力,促進(jìn)CO2固定,提高光合速率,進(jìn)而增加有機(jī)物積累量,促進(jìn)植株生長(zhǎng)。
【小問(wèn)1詳解】
反義RNA分子能夠依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與特定序列相結(jié)合。反義mRNA使基因沉默的原理可能是反義RNA與正義RNA結(jié)合,抑制核糖體與其結(jié)合,阻斷翻譯過(guò)程進(jìn)而抑制基因表達(dá)。
【小問(wèn)2詳解】
利用同一種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因產(chǎn)生的黏性末端相同,這樣容易導(dǎo)致質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化。據(jù)圖可知,反義rca基因的兩端含有限制酶EcRI和BamHI識(shí)別位點(diǎn),載體中也有這兩種酶的識(shí)別位點(diǎn),因此得到反義RNA的關(guān)鍵是把原DNA序列反方向插入到表達(dá)載體中合適的啟動(dòng)子和終止子之間。反義rca基因表達(dá)載體構(gòu)建過(guò)程示意圖如圖1。圖中過(guò)程①用限制酶EcRI和DNA連接酶處理,將rca基因連接到載體Ⅰ上,經(jīng)篩選獲得如圖所示結(jié)果,使rca兩端引入與表達(dá)載體Ⅱ相匹配的酶切位點(diǎn);過(guò)程②中,用限制酶BamHI和DNA連接酶處理,獲得重組基因表達(dá)載體。為鑒定該基因表達(dá)載體中rca基因的插入方向,選用限制酶EcRI對(duì)上述表達(dá)載體進(jìn)行切割,若切下片段為rca和終止子,則為反義RCA基因表達(dá)載體。
【小問(wèn)3詳解】
采用電激法將反義rca基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中,再將其與水稻愈傷組織共培養(yǎng)成T0代幼苗。擬通過(guò)PCR篩選出轉(zhuǎn)基因成功的T0代水稻幼苗。無(wú)論是否轉(zhuǎn)入反義 rca基因,植物體內(nèi)都有內(nèi)源的rca基因,故不能針對(duì)rca基因的特定序列設(shè)計(jì)引物。
【小問(wèn)4詳解】
分析圖2和表格可知,提高rca基因能提升Rubisc活力,促進(jìn)CO2固定,提高光合速率,進(jìn)而增加有機(jī)物積累量,促進(jìn)植株生長(zhǎng)。選項(xiàng)
傳統(tǒng)發(fā)酵食品
微生物
A
果酒
真核生物,酵母菌
B
果醋
原核生物,乳酸菌
C
泡菜
原核生物,醋酸菌
D
腐乳
原核生物,毛霉
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