一、單選題
1．下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說法，正確的是( )
A.制作腐乳過程中主要利用毛霉將蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸
B.制作泡菜過程中先將蔬菜裝至八成滿，然后迅速倒入煮沸冷卻的鹽水
C.當(dāng)缺少糖源時醋酸菌進(jìn)行無氧呼吸將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸
D.制作果酒過程中應(yīng)先將去除枝梗的葡萄用清水沖洗1～2次，然后晾干備用
2．下圖為微生物實驗室培養(yǎng)的有關(guān)操作，下列敘述正確的是( )
A.圖中接種方法是平板劃線法，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性
B.圖示操作的正確步驟是：d→b→f→a→e→c→h→g
C.步驟d為滅菌操作，需將接種工具灼燒至變紅，本次操作一共進(jìn)行了5次步驟d
D.該過程使用的是固體培養(yǎng)基，接種前需要對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和滅菌
3．丙草胺（C17H26ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如下圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列有關(guān)敘述錯誤的是( )
A.該實驗中土樣稀釋了10倍
B.利用該方法計數(shù)結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目偏小
C.配制以丙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可以分離出降解菌
D.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×109個
4．結(jié)核病又叫“癆病”，是由結(jié)核桿菌引起的一種慢性傳染病，臨床上常采用利福平（一種抗生素）進(jìn)行治療，隨著藥物利福平不斷使用，使得結(jié)核病患者對利福平的耐藥率不斷上升給結(jié)核病的治療帶來較大的困難。為了篩選新的抗結(jié)核藥物，科研人員進(jìn)行了下圖所示的研究。已知羅氏固體培養(yǎng)基中有抑制雜菌生長的物質(zhì)，鏈霉素能作用于結(jié)核桿菌的核糖體，通過誘導(dǎo)遺傳密碼的錯讀來抑菌。下列說法錯誤的是( )
A.圖中步驟①與步驟②目的不同，其中步驟①的目的是為了擴(kuò)大培養(yǎng)結(jié)核桿菌
B.圖中羅氏固體培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，可通過觀察菌落的形態(tài)來初步鑒定目的菌株
C.不同抗生素選擇的方向不同，多種抗生素同時聯(lián)合用藥能延緩耐藥菌株的出現(xiàn)
D.鏈霉素可通過抑制結(jié)核桿菌翻譯過程來抑制蛋白質(zhì)的合成進(jìn)而來抑制結(jié)核桿菌
5．由于發(fā)酵工程生產(chǎn)條件溫和、原料來源豐富、價格低廉等，在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，下列有關(guān)發(fā)酵工程應(yīng)用的描述，正確的是( )
A.日常生活中食用醬油的制作以大麥為主要原料，利用產(chǎn)蛋白酶的霉菌的作用，將原料中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸
B.啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段，其中，酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，大部分糖的分解和代謝物的生成在后發(fā)酵階段完成
C.以淀粉或纖維素的水解液為原料，通過發(fā)酵獲得大量的微生物菌體即單細(xì)胞蛋白
D.科學(xué)家利用基因工程，將病原體的某個抗原基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈⑸锛?xì)胞，獲得的表達(dá)產(chǎn)物可直接用于免疫治療
6．下圖1表示植物激素X和植物激素Y的濃度比對未分化細(xì)胞群變化情況的影響，圖2為利用某種耐酸植物甲（4N）和高產(chǎn)植物乙（2N）培育高產(chǎn)耐酸植物丙的過程。下列相關(guān)敘述正確的是( )
A.植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，誘導(dǎo)未分化細(xì)胞群分化出根
B.①是利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁的過程，此過程應(yīng)在低滲溶液中進(jìn)行
C.②是在植物激素X與Y的濃度比為1的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)雜種細(xì)胞發(fā)生脫分化的過程
D.植物丙是六倍體可育植株，其成功培育說明植物甲和乙不存在生殖隔離
7．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域，辣椒素的獲得途徑如圖所示。下列表述正確的是( )
A.實驗中的外植體要經(jīng)過滅菌處理才能進(jìn)行后續(xù)實驗
B.外植體獲得果實的過程需要固體培養(yǎng)基，獲得細(xì)胞培養(yǎng)物需要液體培養(yǎng)基
C.脫毒苗移植到消毒的蛭石或珍珠巖上，可以從中獲得充足的營養(yǎng)物質(zhì)
D.通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得辣椒素，可提高單個細(xì)胞產(chǎn)物的含量
8．雙特異性抗體是指同時具有兩種抗原結(jié)合位點的人造抗體，研究人員用新的技術(shù)構(gòu)建了一種雙特異性抗體，該抗體可同時特異性識別肝癌細(xì)胞上的GPC-3以及T淋巴細(xì)胞表面的特殊蛋白質(zhì)CD3。下圖表示該雙特異性抗體的制備過程，下列相關(guān)敘述錯誤的是( )
A.圖1中過程②可使用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合，此方法也可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞融合
B.HAT培養(yǎng)基會抑制單個的骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞的增殖，而B淋巴細(xì)胞分裂能力弱，只有雜交瘤細(xì)胞可以正常增殖
C.由圖2可知，該雙特異性抗體可同時識別肝癌細(xì)胞膜上的GPC-3和T淋巴細(xì)胞膜上的CD3，從而將肝癌細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞緊密接近（將T細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在的位置），有利于T淋巴細(xì)胞特異性地殺傷肝癌細(xì)胞，促使巨噬細(xì)胞吞噬肝癌細(xì)胞
D.培養(yǎng)淋巴細(xì)胞時，除必須保證環(huán)境是無菌、無毒外，還必須定期更換培養(yǎng)液，提供的氣體環(huán)境應(yīng)為95%的空氣和5%的CO2
9．下圖是經(jīng)體外受精和胚胎分割培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程。下列相關(guān)敘述正確的是( )
A.胚胎工程操作中，常以觀察到兩個極體作為受精完成的標(biāo)志
B.將囊胚期的胚胎均分后，取樣內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的部分做DNA分析和鑒定性別
C.胚胎移植實質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移
D.胚胎移植時，受體母牛必須經(jīng)過免疫學(xué)檢驗以避免發(fā)生免疫排斥
10．動物的某種退行性神經(jīng)疾病由基因t突變?yōu)榛騎導(dǎo)致。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù)的出現(xiàn)，為治療該疾病提供了如下新思路。以下說法錯誤的是( )
A.①過程需采用MⅡ期卵母細(xì)胞
B.ES細(xì)胞能分化為動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞
C.過程④的培養(yǎng)基中需要添加誘導(dǎo)分化因子
D.移植的神經(jīng)干細(xì)胞會成為抗原，引發(fā)免疫排斥反應(yīng)
11．下圖表示不同的限制酶在目的基因的提取和基因表達(dá)載體的構(gòu)建中的作用，下列有關(guān)敘述錯誤的是( )
A.限制酶沿識別序列的中軸線兩側(cè)將DNA兩條鏈切開
B.在圖1和圖2中將分別產(chǎn)生4個和2個粘性末端
C.限制酶切割的是特定核苷酸序列之間的磷酸二酯鍵和氫鍵
D.圖示中酶1、酶2和酶3可以為不同種類的限制酶
12．如圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實驗過程中的部分操作示意圖，請據(jù)圖分析，下列相關(guān)敘述中，正確的是( )
A.該實驗的正確操作順序是③→①→②→④→⑤
B.用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近
C.⑤表示要鑒定步驟①中所得到的白色絲狀物主要成分為DNA，可使用二苯胺試劑來鑒定，沸水浴冷卻后，出現(xiàn)藍(lán)色的試管組別是對照組
D.步驟①的目的是初步分離DNA與蛋白質(zhì)，析出并獲得DNA；步驟④中在2ml/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度較大
13．啤酒生產(chǎn)的簡要流程如圖所示，制麥時用赤霉素溶液浸泡大麥種子，糖化主要是將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子。下列說法不正確的是( )
A.用赤霉素溶液浸泡大麥種子，使種子無需發(fā)芽就能產(chǎn)生淀粉酶
B.糖化前破碎有利于淀粉與a-淀粉酶充分接觸，使糖化過程縮短
C.在接種酵母菌前進(jìn)行冷卻處理，是為了避免高溫殺死酵母菌種
D.發(fā)酵過程中要適時往外排氣，發(fā)酵后期在低溫、通氣環(huán)境進(jìn)行
二、多選題
14．穿心蓮內(nèi)酯為穿心蓮中抗菌消炎作用的活性成分，臨床上用于治療急性菌痢、胃腸炎等。為探究不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯對甲、乙、丙三種痢疾桿菌的殺菌能力，某研究小組將等量的甲、乙、丙三種痢疾桿菌分別用無菌水稀釋成菌懸液，在平板固體培養(yǎng)基上制成含菌培養(yǎng)皿，在培養(yǎng)皿上放置經(jīng)不同濃度穿心蓮內(nèi)酯浸泡過的濾紙片，培養(yǎng)一段時間后，測定三種細(xì)菌的抑菌圈直徑并取平均值，結(jié)果如下表所示。下列敘述正確的是( )
A.本實驗需要設(shè)計在含菌培養(yǎng)皿上放置未用穿心蓮內(nèi)酯浸泡過的濾紙片作為對照
B.不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯對三種痢疾桿菌都起殺傷作用，殺菌效果乙>丙>甲
C.為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)試驗并對實驗數(shù)據(jù)求平均值
D.若長期用藥，可能會導(dǎo)致三種痢疾桿菌種群中耐藥性菌株的比例增加
15．檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑。如圖為研究人員以紅薯粉為原料經(jīng)黑曲霉發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的簡要流程圖。下列說法錯誤的是( )
A.黑曲霉與生產(chǎn)果醋和腐乳時所用主要微生物的代謝類型相同
B.將菌種接種至A培養(yǎng)基時，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼燒
C.將菌種轉(zhuǎn)接至B培養(yǎng)基的目的是增加黑曲霉菌種數(shù)量
D.若發(fā)酵罐C中的原料為大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成醬油
16．鐵皮石斛是我國名貴中藥，生物堿是其有效成分之一。研究人員通過培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿，過程及結(jié)果如下圖。相關(guān)敘述正確的是( )
A.過程①獲得的幼芽應(yīng)先用無水乙醇滅菌30min，再用次氯酸鈉溶液處理30s
B.過程③涉及的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動性
C.過程②固體培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素比例適中有利于擬原球莖的形成
D.結(jié)果表明，生物堿含量與PLBs重量成正相關(guān)，光照條件有利于PLBs的生長
17．tPA是一種臨床上用于治療心腦血栓類疾病的藥物，科研人員計劃用動物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)tPA，但tPA并不是乳腺蛋白，因此在動物乳腺中的表達(dá)水平較低。生長激素（GH）可促進(jìn)動物細(xì)胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳。研究人員通過構(gòu)建具有GH基因和tPA基因的雙轉(zhuǎn)基因小鼠（過程如圖），探究GH基因是否能促進(jìn)外源目的基因tPA表達(dá)水平的提高。下列敘述中錯誤的是( )
A.為了獲取大量受精卵作為受體細(xì)胞，應(yīng)在交配前對供體正常雌鼠注射雌激素
B.可讓供體正常雌鼠和tPA單轉(zhuǎn)基因雄鼠通過自然交配或人工授精的方式獲得受精卵
C.在I操作前，不僅要對早期胚胎做質(zhì)量檢查，還要取滋養(yǎng)層細(xì)胞做性別鑒定
D.代孕母鼠不會對供體胚胎產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，但會影響它的遺傳特性
18．解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)具有消除線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的H濃度差，減少ATP合成、增加產(chǎn)熱的功能。我國科學(xué)家應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)將豬的UCP1基因置換成小鼠的UCP1基因，并使鼠UCPI基因在豬的白色脂肪組織中特異性表達(dá)，獲得脂肪沉積少的“瘦肉豬”。下圖是“瘦肉豬”的主要培育過程，相關(guān)敘述正確的是( )
A.應(yīng)用CRISPRJCas9技術(shù)育種的主要原理是基因重組
B.過程b進(jìn)行有限稀釋培養(yǎng)的目的是獲得陽性單克隆細(xì)胞系
C.過程d的受體細(xì)胞最好是去核的豬卵母細(xì)胞
D.過程e要對代孕豬進(jìn)行同期發(fā)情處理，并選擇發(fā)育正常的原腸胚植入代孕豬輸卵管
三、讀圖填空題
19．根據(jù)相關(guān)知識，回答下列問題：
（1）以鮮蘋果汁為原料利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋的過程如圖1所示，請分析回答：
①圖1中甲過程利用的微生物是___________，其細(xì)胞結(jié)構(gòu)中___________（填“含有”或“不含”）線粒體。甲過程發(fā)酵溫度控制在18～30℃，經(jīng)過10～12d，樣液中是否含有酒精，可以用___________來檢驗，其原理是在___________條件下，該物質(zhì)和酒精反應(yīng)呈現(xiàn)___________色。
②若利用圖2所示裝置制作果醋，制作過程中充氣口應(yīng)___________，排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連，這樣做的目的是___________。
③利用蘋果酒制作蘋果醋的反應(yīng)簡式是___________。
（2）腐乳是我國民間的傳統(tǒng)發(fā)酵食品，它易于消化吸收，原因主要是其含有豐富的___________、小分子肽、___________和脂肪酸等小分子物質(zhì)
（3）市場上購買的真空包裝酸菜，在沒有漏氣的狀態(tài)下發(fā)生了“脹袋”現(xiàn)象，同學(xué)A懷疑是雜菌污染導(dǎo)致的，同學(xué)B懷疑是乳酸菌大量繁殖導(dǎo)致的，你支持誰的觀點并說明理由：___________。
20．發(fā)酵工程在醫(yī)藥上的應(yīng)用非常廣泛，其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)進(jìn)一步推動了發(fā)酵工程在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展。產(chǎn)黃青霉菌是一種廣泛存在于自然界中的霉菌，是生產(chǎn)青霉素的重要工業(yè)菌種。工業(yè)上生產(chǎn)青霉素的發(fā)酵工程流程如圖所示?；卮鹣嚓P(guān)問題：
（1）在制備該培養(yǎng)基時，除了添加必要的營養(yǎng)成分外，還需要將pH調(diào)至___________性。
（2）接種之前的過程①、②都屬于___________。整個發(fā)酵過程的中心環(huán)節(jié)是___________。在發(fā)酵過程中，需要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量以及___________等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。
（3）過程③需要嚴(yán)格的滅菌，否則由于____，可能會導(dǎo)致青霉素產(chǎn)量下降。過程④可采用____方法將菌體分離干燥。
（4）研究發(fā)現(xiàn)，某些青霉菌屬于維生素營養(yǎng)缺陷型菌株，失去合成某種維生素的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的維生素后才能生長。某研究小組篩選出某種維生素營養(yǎng)缺陷型菌株，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個小組，用5個濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時間。結(jié)果如下：
實驗結(jié)果顯示1組和2組濾紙片周圍產(chǎn)生生長圈（圖2），則該營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是___________。若該菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在培養(yǎng)基上形成菌落的位置是___________的交界處。
21．土地鹽漬化是一種全球化現(xiàn)象，嚴(yán)重制約著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。我國育種專家用普通小麥（2N=42）與耐鹽偃麥草（（2N=70）體細(xì)胞雜交獲得耐鹽新品種山融3號，培育過程如下圖所示，圖中序號代表過程或結(jié)構(gòu)。回答下列問題：
（1）細(xì)胞①表示___________。進(jìn)行原生質(zhì)體融合之前需要先去除細(xì)胞壁，原因是。PEG的作用是___________。某愈傷組織在誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上未形成芽，但分化出了根，原因可能是___________。
（2）用特異性引物對普通小麥和耐鹽偃麥草基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖表示用該引物對雙親及再生植株1-6進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1-6中確定為雜種植株的有___________，判斷依據(jù)是___________。
注：Ⅰ為普通小麥，Ⅱ為耐鹽偃麥草
（3）在植物體細(xì)胞雜交中，為保證原生質(zhì)體在制備過程中的完整性，經(jīng)常需要將原生質(zhì)體放入適宜濃度的甘露醇中以維持原生質(zhì)體形態(tài)。為探究普通小麥原生質(zhì)體制備中甘露醇溶液的適宜濃度，進(jìn)行了如下實驗。
實驗材料及用具：普通小麥單細(xì)胞懸液、濃度為2ml/L的甘露醇溶液、纖維素酶、蒸餾水、培養(yǎng)瓶、血細(xì)胞計數(shù)板、顯微鏡（具有測距功能）等。
實驗思路：___________，處理相同且適宜時間后，用血細(xì)胞計數(shù)板和顯微鏡對各個培養(yǎng)瓶中的原生質(zhì)體計數(shù)，測量原生質(zhì)體的體積并記錄。其中原生質(zhì)體數(shù)目最多，且原生質(zhì)體體積最接近植物細(xì)胞體積對應(yīng)的濃度即是最適宜的甘露醇溶液濃度。
22．我國研究人員在世界上率先經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長類動物——食蟹獼猴，這種食蟹獼猴可作為研究癌癥等人類疾病的動物模型，該實驗的突破之處是使用了去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，操作過程如下圖所示。請回答下列問題。
（1）克隆猴的培育成功利用的主要原理是體細(xì)胞細(xì)胞核具有___________。
（2）進(jìn)行過程①時，培養(yǎng)成纖維細(xì)胞必須提供嚴(yán)格的無菌、無毒條件，為了達(dá)到這樣的效果，培養(yǎng)過程中采取的措施有___________。
（3）圖中的②過程通過___________操作將卵母細(xì)胞的“核”去除，此時的卵母細(xì)胞所處的時期是___________，去除的“核”實質(zhì)上是___________。如果取胚胎細(xì)胞的核進(jìn)行移植，更容易獲得成功，原因是___________。
（4）過程⑤中，對代孕雌性食蟹獼猴需要進(jìn)行的處理是，使其處于能夠接受外來胚胎的狀態(tài)。若想進(jìn)一步提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)，對獲得的胚胎進(jìn)行分割時，應(yīng)注意將___________進(jìn)行均等分割。
（5）為了確定Kdm4d的mRNA的作用，研究人員做了兩組實驗，其中A組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞，B組用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入了Kdm4d的mRNA的融合細(xì)胞。實驗結(jié)果如圖所示，圖中X為融合細(xì)胞發(fā)育成的胚胎數(shù)，Y為囊胚數(shù)，Z為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)數(shù)。實驗結(jié)果表明，___________。
四、填空題
23．中國科學(xué)家成功突破了克隆猴這個世界生物學(xué)前沿的難題。體細(xì)胞克隆猴的成功，將推動中國率先發(fā)展出基于非人靈長類疾病動物模型的全新醫(yī)藥研發(fā)，加速針對自閉癥等腦疾病，以及免疫缺陷、腫瘤的新藥研發(fā)進(jìn)程，標(biāo)志著中國在非人靈長類疾病動物模型研究中處于國際領(lǐng)先地位。請回答下列問題：
（1）克隆猴的誕生，體現(xiàn)了動物細(xì)胞的___________具有全能性。相對于植物組織培養(yǎng)而言，動物尤其是高等動物的克隆比較困難的原因是___________?？寺∵^程中一般利用未受精的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因是___________。
（2）動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)是___________，克隆猴培養(yǎng)過程中需要用___________處理，以形成分散的細(xì)胞。為了提高動物細(xì)胞克隆成功率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基，添加___________等天然成分，以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長。培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是___________。
（3）下圖是運(yùn)用動物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體的示意圖，①~⑤代表相關(guān)過程，a～g代表相關(guān)細(xì)胞。
I.過程①是給小鼠注射S抗原蛋白，其目的是___________；過程②的促融方法可以有___________（寫出1種生物促融的方法）。
Ⅱ.圖中過程③④為兩次篩選過程，過程③是指把c細(xì)胞群稀釋，然后都放在選擇培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，只有___________能夠存活且增殖，因此細(xì)胞集落為單個存活細(xì)胞的克??；過程④是用___________方法，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞群。
參考答案
1．答案：A
解析：A、制作腐乳過程中主要利用毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶將脂肪分解為甘油和脂肪酸，A正確;B、制作泡菜過程中先將蔬菜裝至半壇，然后倒入煮沸后冷卻的鹽水，B錯誤;C、醋酸菌為需氧型細(xì)菌，進(jìn)行有氧呼吸，當(dāng)缺少糖源時醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸，C錯誤;D、制作果酒過程中應(yīng)該先用清水沖洗1-2次，然后再去除葡萄的枝梗，D錯誤。故選A。
2．答案：B
解析：A、由圖可知，圖中接種方法是平板劃線法，培養(yǎng)霉菌時要將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，A錯誤;B、圖示操作的正確步驟是:d將接種環(huán)滅菌一b取棉塞→f將試管口靠近酒精燈火焰-a取菌種→e塞棉塞→c接種→h劃線一g培養(yǎng)，B正確;C、步驟d為滅菌操作，需將接種工具灼燒至變紅，由圖h可知，本次操作一共進(jìn)行了5次劃線，每次劃線前均需對接種環(huán)進(jìn)行滅菌，最后一次接種后還需對接種環(huán)滅菌，以免感染操作者或污染環(huán)境，即共進(jìn)行了6次步驟d，C錯誤;D、該過程使用的是固體培養(yǎng)基，接種前需要對實驗操作的空間、操作者的衣著進(jìn)行清潔和滅菌，對操作者的手進(jìn)行消毒，D錯誤。故選B。
3．答案：A
解析：A、由圖可知共稀釋了106倍，A錯誤;B、圖示采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法，由于兩個或多個細(xì)胞連在一起時，在平板上觀察到一個菌落，因此用該方法計數(shù)結(jié)果往往比活菌的實際數(shù)目偏小，B正確;C、乙草胺可提供碳源、氮源，配制以乙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，可提高降解菌的濃度，C正確;D、由圖可知共稀釋了106倍，則5號試管的結(jié)果表明每ml土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)+3+0.1x106=1.7x109個，D正確。故選:A。
4．答案：B
解析：A、圖中①是將細(xì)菌接種在基本培養(yǎng)基上，目的是擴(kuò)大培養(yǎng)目的菌，②是將擴(kuò)繁后的菌種接種到選擇培養(yǎng)基上，篩選目的菌株，A正確;B、羅氏固體培養(yǎng)基中有抑制雜菌生長的物質(zhì)，屬于選擇培養(yǎng)基，B錯誤;C、由于抗生素對細(xì)菌定向選擇，長期使用單一抗生素會出現(xiàn)抗藥性，不同抗生素的選擇方向不同，因此多種抗生素同時或先后聯(lián)合用藥能有效延緩耐藥菌株的出現(xiàn)，C正確;D、鏈霉素能作用于結(jié)核桿菌的核糖體，誘導(dǎo)遺傳密碼的錯讀可導(dǎo)致翻譯停止，從而抑制蛋白質(zhì)的合成，以達(dá)到抑菌的目的，D正確。故選B。
5．答案：C
解析：A、大麥的主要成分為淀粉，制作醬油的主要原料是大豆，A錯誤;B、啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成，主發(fā)酵結(jié)束后在低溫、密閉環(huán)境下儲存一段時間屬于后發(fā)酵，B錯誤;C、單細(xì)胞蛋白是以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物菌體，C正確;D、科學(xué)家利用基因工程，將病原體的某個抗原基因轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)奈⑸锛?xì)胞，獲得的表達(dá)產(chǎn)物為抗原，可用于疫苗接種預(yù)防疾病，但不可用于免疫治療，D錯誤。故選C
6．答案：C
解析：A、激素Y是生長素，激素X是細(xì)胞分裂素，當(dāng)植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時，誘導(dǎo)未分化細(xì)胞群分化出芽，A錯誤;B、植物細(xì)胞壁主要由纖維素和果膠組成，酶具有專一性，故可用纖維素酶和果膠酶去細(xì)胞壁，但此過程應(yīng)在等滲溶液中進(jìn)行，如果在低滲溶液中進(jìn)行會導(dǎo)致原生質(zhì)體吸水膨脹甚至漲破，B錯誤;C、當(dāng)植物激素X與Y的濃度比為1時，未分化的細(xì)胞群經(jīng)分裂形成愈傷組織，也就是雜種細(xì)胞的脫分化的過程，C正確;D、根據(jù)題意可知，某種耐酸植物甲有四個染色體組，高產(chǎn)植物乙有兩個染色體組，因此丙植物體細(xì)胞中有6個染色體組，丙是可育的，但甲和乙之間仍存在生殖隔離，D錯誤。故選:C。
7．答案：B
解析：A、實驗中的外植體要進(jìn)行消毒，A錯誤;B、植物細(xì)胞的培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基，而植物組織培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基。外植體獲得果實的過程要經(jīng)植物組織培養(yǎng)過程，所以植物個體需要固體培養(yǎng)基，獲得細(xì)胞培養(yǎng)物需要液體培養(yǎng)基，B正確;C、消毒的蛭石或珍珠巖可以減少病菌和病毒的傳播，凈化培養(yǎng)環(huán)境，但不能提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)，C錯誤;D、植物細(xì)胞培養(yǎng)可以實現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，但不能提高單個細(xì)胞中目標(biāo)產(chǎn)物的含量，D錯誤。故選:B。
8．答案：A
解析：A、使用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合特有的方法，不可以用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞融合，A錯誤;B、HAT培養(yǎng)基會抑制單個的骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞的增殖，而B淋巴細(xì)胞分裂能力弱，只有雜交瘤細(xì)胞可以正常增殖，從而篩選出雜交瘤細(xì)胞，B正確;C、結(jié)合圖中信息可知，該雙特異性抗體可同時識別肝癌細(xì)胞膜上的GPC-3和T淋巴細(xì)胞膜上的CD3，從而將肝癌細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞緊密接近，即將T細(xì)胞定向帶到癌細(xì)胞所在的位置，有利于T淋巴細(xì)胞特異性地殺傷肝癌細(xì)胞，促使巨噬細(xì)胞吞噬肝癌細(xì)胞，C正確;D、細(xì)胞培養(yǎng)時，除必須保證環(huán)境是無菌、無毒外，還必須定期更換培養(yǎng)液，提供的氣體環(huán)境應(yīng)為95%的空氣和5%的CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，D正確。故選A。
9．答案：C
解析：A、胚胎工程操作中，常以觀察到雌雄原核融合形成一個核，作為受精完成的標(biāo)志，A錯誤；
B、DNA分析鑒定性別須從胚胎的滋養(yǎng)層部位取樣，這樣既保證了遺傳信息一致，又不影響內(nèi)細(xì)胞團(tuán)進(jìn)一步發(fā)育，B錯誤；
C、胚胎移植實質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，因此，該過程中需要對供受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，C正確；
D、胚胎移植中，受體對移入的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥，不需要進(jìn)行免疫學(xué)檢測，D錯誤。
故選C。
10．答案：D
解析：A、MⅡ時期的卵母細(xì)胞體積大，易操作，細(xì)胞質(zhì)中含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和營養(yǎng)條件，所以體細(xì)胞核移植技術(shù)要選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，A正確；
B、ES細(xì)胞的細(xì)胞核大，核仁明顯，具有發(fā)育的全能性，可以誘導(dǎo)分化成動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞，B正確；
C、在培養(yǎng)液中加入誘導(dǎo)分化因子，就可以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，用于患者的組織器官移植，C正確；
D、由于移植的神經(jīng)干細(xì)胞的遺傳物質(zhì)與患者相同，不會成為抗原，因而不會發(fā)生免疫排斥，可用于治療該退行性神經(jīng)疾病，D錯誤。
故選D。
11．答案：C
解析：A、由圖可知，產(chǎn)生的是黏性末端，所以可知限制酶在它識別序列的中軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開的，A正確;B、由圖可知，在圖1和圖2中將分別產(chǎn)生4個和2個粘性末端，B正確;C、限制酶切割的是特定核苷酸序列之間的磷酸二酯鍵，不會切割氫鍵，C錯誤;D、圖示中酶1、酶2和酶3可以為不同種類的限制酶，D正確。故選C。
12．答案：D
解析：A.DNA的粗提取和鑒定步驟是:加入蒸餾水，破碎細(xì)胞→過濾,獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質(zhì)→DNA的析出→鑒定，因此圖中表示正確的實驗操作順序是③→②→①→④→⑤,A錯誤;B、豬血紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核,提取不到DNA,用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量不相同,B錯誤;C、⑤表示要鑒定步驟①中所得到的白色絲狀物主要成分為DNA,可使用二苯胺試劑來鑒定，沸水浴冷卻后,出現(xiàn)藍(lán)色的試管組別是實驗組,C錯誤;D、步驟①的目的是析出并獲得DNA,步驟④中在2ml/L的NaCl溶液中,DNA的溶解度較大,D正確。故選D。
13．答案：D
解析：A、大麥種子萌發(fā)的過程中，赤霉素可誘導(dǎo)胚乳的糊粉層大量合成α-淀粉酶，故過程①制麥時可用赤霉素溶液浸泡大麥種子，使種子無需發(fā)芽就能產(chǎn)生a-淀粉酶，促進(jìn)淀粉的水解，A正確;B、糖化前破碎有利于淀粉與α一淀粉酶充分接觸，加快淀粉水解成麥芽糖并進(jìn)一步水解成小分子的過程，使糖化過程縮短，B正確;C、在接種酵母菌前進(jìn)行冷卻處理，是為了避免高溫殺死酵母菌種，C正確;D、酵母菌的有氧呼吸和無氧呼吸都會產(chǎn)生二氧化碳，故發(fā)酵過程中要適時往外排氣，發(fā)酵后期也應(yīng)在密閉條件下進(jìn)行，D錯誤。故選ABC。
14．答案：ACD
解析：A、為了排出其他因素的干擾，確保實驗的準(zhǔn)確性，本實驗還需設(shè)計在含菌培養(yǎng)皿上放置用無菌水浸泡過的濾紙片作為對照，A正確;B、抑菌圈直徑越大，其對痢疾桿菌的殺傷作用就越強(qiáng)，由表格數(shù)據(jù)分析可知，殺菌效果由強(qiáng)到弱為:甲>丙>乙，B錯誤;C、為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)進(jìn)行多次重復(fù)試驗并對實驗數(shù)據(jù)求平均值，減少偶然性，確保實驗的準(zhǔn)確性，C正確;D、若長期用藥，三種痢疾桿菌種群的耐藥基因頻率可能會增大，從而導(dǎo)致三種痢疾桿菌種群中耐藥性菌株的比例增加，D正確。故選:ACD。
15．答案：BD
解析：A、由培養(yǎng)時需要通氣振蕩可知，黑曲霉的異化作用類型為需氧型，因此其代謝類型為異養(yǎng)需氧型，制作果醋利用的是醋酸菌，制作腐乳利用的是毛霉，它們的代謝類型均為異養(yǎng)需氧型，A正確;B、將涂布器先放入酒精中消毒，將沾有酒精的涂布器在使用前放在酒精燈火焰上引燃而不是灼燒，B錯誤;C、將菌種轉(zhuǎn)接至B培養(yǎng)基是將菌種轉(zhuǎn)接至新的培養(yǎng)基，目的是為了進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，從而增加菌種的數(shù)量，C正確;D、以大豆為主要原料，利用產(chǎn)生蛋白酶的霉菌(如黑曲霉)，將原料中的蛋白質(zhì)水解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可以制成醬油產(chǎn)品，D錯誤。故選:BD。
16．答案：CD
解析：A、消毒的原則是既要殺死材料表面的微生物，又要減少消毒劑對細(xì)胞的傷害，故外植體消毒可先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精處理30s，無菌水清洗后再用次氯酸鈉溶液處理30min，A錯誤;B、過程③擬原球莖的長大，涉及的生物學(xué)原理是細(xì)胞增殖，擬原球莖經(jīng)有絲分裂而不斷生長，B錯誤;C、過程②為脫分化，固體培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素比例適中有利于擬原球莖(類似愈傷組織)的形成，C正確;D、據(jù)右圖可知，生物堿含量與PLBs重量成正相關(guān)，PLBs在光照下的重量明顯大于在黑暗中的重量，說明光照條件有利于PLBs的生長，D正確。故選CD。
17．答案：AD
解析：A、為了獲取大量受精卵作為受體細(xì)胞，應(yīng)在交配前對供體正常雌鼠注射促性腺激素做超數(shù)排卵處理，A錯誤;B、獲得受精卵可以自然交配，也可以人工授精，B正確;C、因為要構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器，早期胚胎必須是雌性的，I代表胚胎移植，因此在胚胎移植前，不僅要對早期胚胎做質(zhì)量檢查，還要取滋養(yǎng)層細(xì)胞做性別鑒定，C正確;D、代孕母鼠只為早期胚胎提供發(fā)育所需環(huán)境及營養(yǎng)，不會對供體胚胎產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，也不會影響它的遺傳特性，D錯誤。故選:AD.
18．答案：ABC
解析：A：應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)育種的主要原理是基因編輯技術(shù)。A錯誤。B:b篩選過程，這種方法是一種常用的克隆方法，通過適當(dāng)?shù)南♂屵_(dá)到分離單胞進(jìn)行培養(yǎng)的目的，即可獲得陽性單克隆細(xì)胞系。B正確。C:細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞最好是去核的卵母細(xì)胞，原因是：體積大，容易操作，卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。C正確。D：過程e操作前需對多只代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生殖器官的生理變化是相同的。與此同時，選擇發(fā)育正常的原腸胚植入代孕豬輸卵管。D正確。
19．答案：（1）酵母菌；含有；重鉻酸鉀；酸性；灰綠；打開；避免空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置（或防止空氣中的微生物污染）；C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量
（2）氨基酸；甘油
（3）支持A的觀點，乳酸菌代謝過程中不產(chǎn)生氣體。
20．答案：（1）酸性
（2）①.擴(kuò)大培養(yǎng)②.發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵③.產(chǎn)物濃度
（3）①.雜菌污染②.過濾、沉淀
（4）①.維生素B1②.3和5的交界處
解析：（1）雖然各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性。
（2）工業(yè)發(fā)酵罐的體積一般為幾十到幾百立方米，接入的菌種總體積需要幾立方米到幾十立方米，所以在發(fā)酵之前還需要對菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度，pH和溶解氧等發(fā)酵條件。
（3）發(fā)酵工程中所用的菌種大多是單一菌種，一旦有雜菌污染；可能會致產(chǎn)量大大下降。因此，在青霉素生產(chǎn)過程中如果污染了雜菌，某些雜菌會分泌青霉素酶將青霉素分解掉。因此，培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都須經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌。如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥即可得到產(chǎn)品，如果產(chǎn)品是代謝物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品。
（4）實驗結(jié)果顯示1組和2組濾紙片周圍產(chǎn)生生長圈，比較表格中各種維生素組合，1組和2組含有而其他組不含有的維生素是維生素B1，所以該營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是維生素B1。只有3組含有葉酸，只有5組含有生物素，所以若菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在培養(yǎng)基上形成菌落的位置是3與5的交界處。
21．答案：（1）雜種細(xì)胞；細(xì)胞壁會阻礙細(xì)胞間的雜交；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合生長素與細(xì)胞分裂素用量的比值高
（2）5和6；只有5和6含有這兩種植物的所有電泳條帶
（3）用蒸餾水將濃度為2ml/L的甘露醇溶液稀釋為等濃度梯度的溶液，用相應(yīng)數(shù)量的培養(yǎng)瓶編號，加入相同且適量的植物單細(xì)胞懸液，再加入相同的細(xì)胞壁水解酶，然后將等濃度梯度的甘露醇溶液分別加入各個培養(yǎng)瓶中
22．答案：（1）全能性
（2）定期更換培養(yǎng)液
（3）顯微；減數(shù)第二次分裂中期；去除紡錘體-染色體復(fù)合物；胚胎細(xì)胞的核全能性高
（4）同期發(fā)情處理；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（5）Kdm4d的mRNA能提高融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率、囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率
23．答案：（1）細(xì)胞核；動物細(xì)胞難以脫分化，體細(xì)胞核內(nèi)雖然有全套基因，但大部分基因在分化后就不再表達(dá)，很難被激活；卵母細(xì)胞體積大、易操作、營養(yǎng)豐富，未受精的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞核全能性的物質(zhì)（或未受精的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)易激發(fā)體細(xì)胞核全能性的表達(dá)）
（2）動物細(xì)胞培養(yǎng)；胰蛋白酶或膠原蛋白酶；動物血清；維持培養(yǎng)液的pH
（3）刺激小鼠產(chǎn)生能分泌抗S蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞；滅活的病毒誘導(dǎo)（或滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)）；雜交瘤細(xì)胞；抗體檢測（或抗原—抗體檢測）
穿心蓮內(nèi)酯浸泡液濃度
1%
5%
10%
15%
20%
甲菌種抑菌圈直徑
2.5mm
3mm
3.5mm
4mm
5mm
乙菌種抑菌圈直徑
1.6mm
1.7mm
1.9mm
2.1mm
2.5mm
丙菌種抑菌圈直徑
2.2mm
2.7mm
3.1mm
3.5mm
4mm
組別
維生素組合
1
維生素A
維生素B1
維生素B2
維生素B6
維生素B12
2
維生素C
維生素B1
維生素D2
維生素E
煙酰胺
3
葉酸
維生素B2
維生素D2
膽堿
泛酸鈣
4
對氨基苯甲酸
維生素B6
維生素E
膽堿
肌醇
5
生物素
維生素B12
煙酰胺
泛酸鈣
肌醇

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