39，陜西省咸陽市實驗中學2022-2023學年高二下學期第二次月考生物試題

這是一份39，陜西省咸陽市實驗中學2022-2023學年高二下學期第二次月考生物試題，共25頁。試卷主要包含了2～7等內(nèi)容，歡迎下載使用。
注意事項：
1．本試題共8頁，滿分100分，答題時間90分鐘。
2．答卷前，考生務必將自己的姓名、班級和準考證號填寫在答題卡上。
3．回答選擇題時，選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑。如需改動，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標號?；卮鸱沁x擇題時，將答案寫在答題卡上。寫在本試卷上無效。
4．考試結束后，監(jiān)考員將答題卡按順序收回，裝袋整理；試題不回收。
第I卷（選擇題共50分）
一、選擇題（本大題共25小題，每小題2分，計50分，每小題只有一個選項是符合題意的）
1. 基因工程技術也稱重組DNA技術，其實施必須具備的4個條件是（ ）
A. 工具酶、目的基因、載體、受體細胞
B. 重組DNA、RNA聚合酶、解旋酶、連接酶
C. 模板DNA、mRNA、質粒、受體細胞
D. 目的基因、限制酶、載體、受體細胞
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程需要的工具有：限制酶、DNA連接酶、運載體?；蚬こ痰膶嵸|是將一種生物的基因轉移到另一種生物的細胞中，因此需要目的基因和受體細胞。
【詳解】A、工具酶（包括限制酶、DNA連接酶）、目的基因、載體（運載體）、受體細胞是基因工程中的必需具備的條件，A正確；
B、重組DNA是由目的基因和質粒重組形成的，RNA聚合酶是轉錄需要的酶，細胞中具有該種酶，因此不是基因工程必需的條件，B錯誤；
C、mRNA是基因轉錄的產(chǎn)物，基因工程中不需要提供該物質，質粒是運載體中的一種，除了質粒還有動植物病毒和噬菌體等，因此質粒不是基因工程中必須的，C錯誤；
D、目的基因、限制酶、載體、受體細胞是基因工程必需具備的條件，此外還需要DNA連接酶，D錯誤。
故選A。
2. 下列與DNA中磷酸二酯鍵形成或斷裂有關的有（ ）
①解旋酶②限制酶③DNA連接酶④DNA聚合酶⑤DNA水解酶⑥RNA聚合酶
A. ②③④⑥B. ②③④⑤
C ①②③⑤D. ①④⑤⑥
【答案】B
【解析】
【分析】限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，而DNA連接酶能連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵，DNA聚合酶能連接單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵。
【詳解】①解旋酶能使DNA雙鏈解開，斷裂的鍵是氫鍵，①錯誤
②限制性核酸內(nèi)切酶能使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，②正確；
③DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，③正確；
④DNA聚合酶能將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵，④正確；
⑤DNA水解酶將DNA水解成脫氧核苷酸，斷裂的鍵是磷酸二酯鍵，⑤正確；
⑥RNA聚合酶能催化轉錄過程，形成磷酸二酯鍵，合成的是mRNA而不是DNA，⑥錯誤。
綜上②③④⑤正確。
故選B。
3. 下列有關基因工程載體的說法，正確的是（ ）
A. 質粒上堿基之間的數(shù)量存在A+G=U+C
B. 載體與目的基因結合的過程發(fā)生在細胞內(nèi)
C. 天然質粒能夠進行自我復制就可以作基因工程載體
D. λ噬菌體的衍生物和動植物病毒也可作為基因工程的載體
【答案】D
【解析】
【分析】運載體：（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入；③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒
【詳解】A、質粒是環(huán)狀DNA分子，不含堿基U，A錯誤；
B、基因工程中，載體和目的基因是在細胞外結合的，之后再導入受體細胞，B錯誤；
C、質粒之所以能作為基因工程的運載體，是因為其能夠自我復制、能攜帶目的基因，而不是只具有自我復制功能就能夠作為基因工程的運載體，C錯誤；
D、基因工程常用的載體有質粒、噬菌體和動植物病毒等，D正確。
故選D。
4. PCR引物的3'端為結合模板DNA的關鍵，5'端無嚴格限制，可用于添加限制酶切點等序列，dNTP是DNA合成的原料，還可供能。下列相關說法錯誤的是（ ）
A. 圖示環(huán)節(jié)所需的溫度比上一個環(huán)節(jié)的低
B. 引物的設計要有一段已知目的基因的核苷酸序列
C. 耐高溫Taq酶只能從引物的3'端開始延伸DNA鏈
D. 1個循環(huán)后，子代DNA雙鏈的脫氧核苷酸數(shù)量相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在體外復制特定的DNA的核酸合成技術。
2、原理：DNA復制。
3、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Tag 酶）。
【詳解】A、圖示環(huán)節(jié)為引物與模板堿基互補配對，表示的是復性環(huán)節(jié)，復性的上一環(huán)節(jié)為變性，復性的溫度比變性的溫度低，A正確；
B、引物的設計要有一段已知目的基因的核苷酸序列，保證其與已知模板能堿基配對，在后續(xù)擴增的過程中才能進行子鏈的延伸，B正確；
C、子鏈是從5'-3'端延伸的，耐高溫Tag 酶只能從引物的3'端開始延伸DNA鏈，C正確；
D、由于兩個引物均不在該片段的端點，因此一個循環(huán)后，子代DNA雙鏈的脫氧核苷酸數(shù)量不相同，D錯誤。
故選D。
5. 在基因工程技術中，目的基因的表達程度受到它所連接的啟動子的影響?？蒲腥藛T利用報告基因表達產(chǎn)生的氯霉素乙酰轉移酶（CAT）活性作為觀測指標，對一種新的基因啟動子特征進行了分析，不同實驗組別的差異是啟動子中不同片段的組合方式。根據(jù)實驗結果進行的分析中，不合理的是（ ）
A. 啟動子序列的差異會導致其與RNA聚合酶結合強度發(fā)生變化
B. 該啟動子中片段2的有無對該啟動子的功能沒有顯著影響
C. 該啟動子中片段3的存在會導致所連接基因表達程度上升
D. 可推斷出利用啟動子a進行實驗的CAT活性低于啟動子I
【答案】C
【解析】
【分析】啟動子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別和結合的位點。
【詳解】A、啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點，啟動子序列的差異會導致其與RNA聚合酶結合強度發(fā)生變化，從而影響基因的表達，A正確；
B、對比實驗組別I和Ⅱ可知，兩組的CAT活性相同，說明該啟動子中片段2的有無對該啟動子的功能沒有顯著影響，B正確；
C、對比實驗組別Ⅱ和Ⅳ可知，Ⅳ組的CAT活性高于Ⅱ組，說明該啟動子中片段3的存在會導致所連接基因表達程度下降，C錯誤；
D、對比實驗組別Ⅱ和Ⅲ可知，Ⅱ組的CAT活性高于Ⅲ組，說明該啟動子中片段4的存在會導致所連接基因表達程度上升，因此可推斷出利用啟動子a進行實驗的CAT活性低于啟動子I，D正確。
故選C。
6. 棉蚜是棉花的主要害蟲之一。雪花蓮凝集素（GNA）與尾穗莧凝集素（ACA）具有良好抗蚜蟲效果。研究人員將GNA基因與ACA基因連接成融合基因GA，并構建雙抗蟲基因的重組表達載體轉入棉花，過程如下圖。下列敘述錯誤的是（ ）
A. 構建基因表達載體，應選用BsaBI、KpnI和XhI酶切
B. BsaBI、KpnI雙酶切可確保融合基因與載體的正確連接
C. 用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因轉入棉花愈傷組織需無菌操作
D. 可通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂蚜蟲進行個體生物學水平的鑒定
【答案】B
【解析】
【分析】分析題圖，用KpnI與BsaBI酶切可獲得GNA基因，用BsaBI與XhI酶切可獲得ACA基因；GNA基因與ACA基因都具有BsaBI酶切產(chǎn)生的相同末端，二者可用同一種DNA連接酶連接成融合基因GA；載體與融合基因GA都具有XhI酶切產(chǎn)生的相同末端及KpnI酶切產(chǎn)生的相同末端，可用相應的DNA連接酶連接融合基因GA與載體以構建植物表達載體。
【詳解】A、由分析可知，構建植物表達載體過程中要選用BsaBI、KpnI和XhI進行酶切，A正確；
B、KpnI、BsaBI雙酶切才可使確保融合基因與載體產(chǎn)生相同的末端以確保二者的正確連接，B錯誤；
C、用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因轉入棉花愈傷組織需無菌操作以防止雜菌污染干擾實驗，C正確；
D、要證明抗蚜蟲棉花培育成功，可通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂蚜蟲進行個體生物學水平的鑒定，D正確。
故選B。
7. DNA探針是用放射性同位素或熒光分子標記的含有目的基因的DNA片段，常用于目的基因的檢測和鑒定。下列有關DNA探針的敘述，錯誤的是（ ）
A. DNA探針中的DNA片段由兩條鏈組成其雙螺旋結構
B. DNA探針可用于檢測目的基因是否導入并發(fā)生轉錄
C. DNA探針也可以用于檢測目的基因是否發(fā)生突變
D. DNA探針檢測目的基因的原理是堿基互補配對
【答案】A
【解析】
【分析】目的基因的檢測與鑒定：
（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。
（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】A、獲取目的基因的單鏈片段并用含放射性的物質標記后制成探針，A錯誤；
B、可用含有目的基因的DNA探針檢測基因是否轉入受體細胞，也可用DNA探針檢測目的基因是否轉錄，B正確；
C、根據(jù)DNA探針和目的基因形成的雜合雙鏈區(qū)的情況檢測目的基因是否發(fā)生突變，C正確；
D、DNA探針檢測目的基因是根據(jù)堿基互補配對原則來實現(xiàn)的，D正確。
故選A。
【點睛】
8. T2噬菌體展示技術是將編碼外源蛋白DNA序列插入到T2噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達而表達。同時，外源蛋白隨T2噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面的生物技術。下列相關敘述正確的是（ ）
A 要用顯微注射法將重組DNA分子導入T2噬菌體
B. 成功改造的T2噬菌體的子代病毒也能展示外源蛋白
C. 該技術可展示對噬菌體或宿主細胞有毒的蛋白質
D. 若用35S標記噬菌體外殼，則可在子代噬菌體表面融合蛋白上檢測到35S
【答案】B
【解析】
【分析】題意分析，T2噬菌體展示技術離不開基因工程的支持?；蚬こ痰牟僮鞑襟E是：目的基因的篩選與獲取、基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。
【詳解】A、顯微注射法是將重組DNA導入到動物細胞中的技術，A錯誤；
B、T2噬菌體的改造過程是將編碼外源蛋白的DNA序列插入到T2噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置，因而改造后的T2噬菌體，其子代病毒也有外源蛋白基因，能表達出外源蛋白，因此能展示外源蛋白，B正確；
C、該技術不能展示對噬菌體或宿主細胞有毒的蛋白質，因為毒蛋白會對噬菌體的增殖過程產(chǎn)生影響，從而導致蛋白質的展示過程失敗，C錯誤；
D、若用35S標記噬菌體外殼，由于注入時注入的是噬菌體的DNA，蛋白質外殼留在大腸桿菌外面，則子代噬菌體表面融合蛋白上不能檢測到35S，D錯誤。
故選B。
9. T4溶菌酶（AO）在溫度較高時易失去活性。研究人員通過蛋白質工程對T4溶菌酶第3位上的異亮氨酸改成半胱氨酸，該處半胱氨酸可與第97位半胱氨酸之間形成一個二硫鍵，獲得了熱穩(wěn)定性高的T4溶菌酶（A1）。下列說法正確的是（ ）
A. 蛋白質工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對象的差異
B. 蛋白質工程與中心法則的流程方向一致，即DNA→mRNA→蛋白質
C. 檢測A1活性時可先將A1與底物混合，再置于高溫環(huán)境中
D. AO和A1空間結構的差異是二者熱穩(wěn)定性不同的直接原因
【答案】D
【解析】
【分析】1、蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求；（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質）2、基本途徑：從預期的蛋白質功能出發(fā)，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質工程特有的途徑。
【詳解】A、蛋白質工程和基因工程都要對基因進行操作，其操作對象相同，A錯誤；
B、蛋白質工程與中心法則的流程方向相反，B錯誤；
C、檢測A1活性時應先將A1與底物分別置于高溫環(huán)境，保溫一段時間再混合，C錯誤；
D、分析題意可知，和AO相比，A1不僅僅是氨基酸的序列不同，同時還增加了一個二硫鍵，導致空間結構也有差異，是二者熱穩(wěn)定性不同的直接原因，D正確。
故選D。
10. 植物的組織培養(yǎng)需要嚴格的無菌操作，下列說法正確的是（ ）
A. 培養(yǎng)基在使用之前要放在烤箱中高溫滅菌
B. 解剖刀在火焰上灼燒后需冷卻才能用于切割外植體
C. 外植體用化學試劑消毒后需經(jīng)蒸餾水沖洗才可用于接種
D. 將外植體插入時應注意方向，不應倒插，是為了防止雜菌污染
【答案】B
【解析】
【分析】植物組織培養(yǎng)技術利用了植物細胞的全能性，培養(yǎng)過程中除給外植體提供必要的營養(yǎng)物質、植物激素外，應注意避免雜菌感染。
【詳解】A、培養(yǎng)基在使用之前應進行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；
B、解剖刀在火焰上灼燒后需冷卻才能用于切割外植體，避免高溫導致細胞死亡，B正確；
C、外植體用化學試劑消毒后需經(jīng)無菌水清洗2-3次后才可用于接種，C錯誤；
D、將菊花莖段插入時，要注意形態(tài)學上端朝上，而不應倒插，因為生長素的運輸是極性運輸，而不是為了防止污染，D錯誤。
故選B。
11. 下圖為某植物原生質體的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（ ）
A. 過程①通常用鹽酸解離細胞壁
B. 過程②可使原生質體再生出細胞壁
C. 過程③培養(yǎng)基中細胞分裂素濃度相對較低
D. 過程④表示為提高適應外部環(huán)境能力的煉苗過程
【答案】B
【解析】
【分析】1、離體的植物組織或細胞，在培養(yǎng)一段時間后，會通過細胞分裂形成愈傷組織。愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細胞的脫分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植株體。
2、植物組織培養(yǎng)中生長素和細胞分裂素使用比例對植物細胞發(fā)育的影響：生長素用量比細胞分裂素用量，比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值適中時，促進愈傷組織的形成。
【詳解】A、①為去壁過程，根據(jù)酶的專一性原理，需用纖維素酶和果膠酶溶液處理，A錯誤；
B、懸浮的原生質體經(jīng)過②可再生出細胞壁，B正確；
C、過程③表示誘導生芽的過程，需要提高細胞分裂素的比例以促進芽的分化，C錯誤；
D、過程④為植物個體發(fā)育的過程，將試管苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生長，為煉苗過程，D錯誤。
故選B。
12. 下圖是探究誘導植物根愈傷組織分化因素的實驗示意圖，據(jù)圖判斷下列說法錯誤的是( )
A. 實驗①中生長素可以滲入根的愈傷組織
B. 本實驗體現(xiàn)了對照原則和單一變量原則
C. 根愈傷組織分化是由實驗①中根產(chǎn)生的“某物質”直接誘導
D. 實驗②④分別排除了玻璃紙和瓊脂塊對實驗的干擾
【答案】C
【解析】
【詳解】實驗①中用玻璃紙阻擋幼芽，目的是不讓幼芽與根愈傷組織直接接觸，但幼芽產(chǎn)生的生長素可透過玻璃紙滲入根愈傷組織，A正確；本實驗體現(xiàn)了對照原則和單一變量原則，B正確；根愈傷組織分化是由實驗①中幼芽產(chǎn)生的“某物質”直接誘導，C錯誤；實驗②排除了玻璃紙對實驗的干擾，實驗④排除了瓊脂塊對實驗的干擾，D正確。
【點睛】植物組織培養(yǎng)的注意事項：
（1）接種時應注意的事項：①接種室要消毒；②無菌操作；③接種時要防止交叉污染；④接種完立刻蓋好瓶口；
（2）外植體接種前，需要將接種室、接種箱滅菌和對外植體消毒的操作：
①接種前一天，將接種室的四個角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸；
②接種前1小時，在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來蘇水；桌椅也用來蘇水擦拭；接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸；
③將滅菌室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌；
④接種前，操作者用肥皂清洗雙手，擦干，再用酒精棉球擦拭雙手；
⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。
13. 下列關于農(nóng)作物脫毒苗制備和應用的敘述，錯誤的是（ ）
A. 長期進行有性繁殖的作物易感染和積累病毒
B. 制備作物脫毒苗的原理是植物細胞具有全能性
C. 取頂端分生組織進行組織培養(yǎng)可制備脫毒苗
D. 脫毒苗的使用可顯著提高作物的產(chǎn)量和品質
【答案】A
【解析】
【分析】作物脫毒馬鈴薯、草莓和香蕉等通常是用無性繁殖的方式進行繁殖的，它們感染的病毒很容易傳給后代。病毒在作物體內(nèi)逐年積累，就會導致作物產(chǎn)量降低，品質變差。早在20世紀50年代，科學家就發(fā)現(xiàn)植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，甚至無病毒。因此，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。人們用組織培養(yǎng)技術培育出的脫毒馬鈴薯，要比未脫毒的馬鈴薯增產(chǎn)50%以上；脫毒草莓的產(chǎn)量和品質也明顯優(yōu)于沒有脫毒的草莓。
【詳解】A、長期進行無性繁殖的作物易感染和積累病毒，A錯誤；
B、制備作物脫毒苗采用植物組織培養(yǎng)，其原理是植物細胞具有全能性，B正確；
C、頂端分生組織幾乎不含病毒，可取頂端分生組織進行組織培養(yǎng)制備脫毒苗，C正確；
D、由分析可知，脫毒苗的使用可顯著提高作物的產(chǎn)量和品質，D正確。
故選A。
14. 茅蒼術具有消炎、燥濕健脾、明目等功效。目前野生茅蒼術資源稀缺，應用生物技術可以有效繁殖和保存茅蒼術資源，并有望將其次生代謝產(chǎn)物揮發(fā)油產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。下列敘述正確的是（ ）
A. 揮發(fā)油是茅蒼術生命活動必需的化合物
B. 揮發(fā)油產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)過程中使用的是固體培養(yǎng)基
C. 可將茅蒼術細胞置于低滲溶液中漲破以提取揮發(fā)油
D. 茅蒼術不同細胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的新個體基因型不一定相同
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進一步發(fā)育植株（新植體）；
2、植物組織培養(yǎng)技術具有廣泛的應用：植物繁殖的新途徑（快繁技術、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】A、結合題意可知，揮發(fā)油是茅蒼術的次生代謝產(chǎn)物，不是其生命活動所必需的，A錯誤；
B、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)是從人工培養(yǎng)的愈傷組織細胞中提取某種成分，該過程使用的是液體培養(yǎng)基，B錯誤；
C、茅蒼術細胞是植物細胞，外面是細胞壁，將其置于低滲溶液中不會漲破，所以難以提取揮發(fā)油，C錯誤；
D、茅蒼術不同細胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的新個體基因型不一定同，如由花粉細胞和體細胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的新個體的基因型就不一定相同，D正確。
故選D。
15. 單倍體育種的優(yōu)點是可明顯縮短育種年限，下列有關單倍體育種的說法正確的是（ ）
A. 經(jīng)常先篩選F1花粉類型，再進行花藥離體培養(yǎng)
B. 兩個單倍體經(jīng)植物體細胞雜交，后代一定是純合子
C. 用秋水仙素處理單倍體幼苗一定可獲得純合植株
D. 單倍體育種的原理有染色體變異、植物細胞的全能性
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。脫分化和再分化過程中都需要使用植物激素；
2、植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性；
3、單倍體育種的原理是染色體變異；方法是用花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再人工誘導染色體數(shù)目加倍；優(yōu)點是純合體自交后代不發(fā)生性狀分離，因而能明顯縮短育種年限。
【詳解】A、單倍體育種常用方法是用花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再人工誘導染色體數(shù)目加倍，最后篩選所需植株，A錯誤；
B、兩個單倍體的基因組成可能不同，因此，兩者經(jīng)植物體細胞雜交，獲得的后代可能是雜合子，B錯誤；
C、用秋水仙素處理單倍體幼苗不一定可獲得純合植株，如四倍體番茄的基因型為AAaa，則進行單倍體育種獲得的植株不一定為純合子，C錯誤；
D、單倍體育種包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素誘導染色體加倍兩個過程，其中花藥離體培養(yǎng)的原理是植物細胞的全能性，秋水仙素誘導染色體加倍的原理是染色體變異，D正確。
故選D。
16. 在進行植物體細胞融合前，必須先獲得有活力的原生質體。測定原生質體活力的常用方法之一是熒光素雙醋酸酯（FDA）染色法，其基本原理是FDA本身無熒光，可自由通過細胞膜，經(jīng)細胞內(nèi)酯酶分解產(chǎn)生積累在細胞內(nèi)并能產(chǎn)生綠色熒光的熒光素。相關敘述錯誤的是（ ）
A. 酶解法處理植物細胞，可以獲得原生質體
B. FDA染色法測定原生質體活力需HCl處理植物細胞
C. 配制FDA溶液時需控制適宜的濃度
D. 綠色熒光的強度與原生質體的活力呈正相關
【答案】B
【解析】
【分析】
根據(jù)題意，“FDA本身無熒光，可自由通過細胞膜”，說明FDA進入細胞的方式是自由擴散；“細胞內(nèi)酯酶分解產(chǎn)生積累在細胞內(nèi)并能產(chǎn)生綠色熒光的熒光素”，說明熒光素在細胞內(nèi)，不能出細胞，體現(xiàn)細胞膜的選擇透過性。
【詳解】A、酶解法處理植物細胞，去除細胞壁，可以獲得原生質體，A正確；
B、HCl處理植物細胞會使得細胞失去活性，B錯誤；
C、實驗中配制的FDA溶液是一種高滲溶液，但濃度不能太高（防止細胞失水過多），進而通過自由擴散進入細胞，C正確；
D、細胞內(nèi)酯酶分解產(chǎn)生積累在細胞內(nèi)并能產(chǎn)生綠色熒光的熒光素，綠色熒光的強度越強，則酶活性越高，則綠色熒光的強度與原生質體的活力呈正相關，D正確。
故選B。
【點睛】
17. 下圖列舉了幾種植物的育種方式，下列相關敘述正確的是
A. 甲過程形成的c細胞內(nèi)的染色體數(shù)一定是a細胞內(nèi)染色體數(shù)的兩倍
B. 乙方式射線處理后可以獲得大量的具有有利性狀的材料
C. 與雜交育種相比，丙方式能克服遠緣雜交不親和的障礙
D. 通過丁方式，細胞c發(fā)育成新植株涉及到同源染色體的聯(lián)會與分離
【答案】C
【解析】
【分析】
【詳解】此種育種方式是植物體細胞雜交，即將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞養(yǎng)育成新的植物體。不同種的細胞內(nèi)染色體數(shù)目不一定相同，A錯誤；由于基因突變的多害少利性，乙方式中射線處理后要篩選掉大量不利變異，B錯誤；細胞工程育種、與傳統(tǒng)雜交育種相比，其優(yōu)點是能克服不同物種間遠緣雜交的不親和障礙，C正確；丁是植物組織培養(yǎng)的過程，進行有絲分裂，沒有同源染色體的聯(lián)會與分離，D錯誤。
【點睛】本題考查細胞工程育種、誘變育種、植物組織培養(yǎng)方面的知識。意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結構。
18. 基因型為Aa植株的花粉和基因型為Bb植株的花粉，除去細胞壁后，進行原生質體誘導融合，可以得到多少種基因型不同的融合細胞（只考慮兩兩細胞融合） （ ）
A. 6種B. 8種C. 10種D. 12種
【答案】C
【解析】
【分析】
細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個細胞結合形成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜種細胞。基因型為Aa的植株能產(chǎn)生a和A兩種花粉，基因型為Bb的植株也能產(chǎn)生B和b兩種花粉。
【詳解】基因型為Aa的植株能產(chǎn)生兩種類型的花粉，即含有A基因的花粉和含有a基因的花粉；基因型為Bb的植株也能產(chǎn)生兩種類型的花粉，即含有B基因的花粉和含有b基因的花粉。將這些花粉除去細胞壁后得到原生質體，將這些原生質體進行融合，若僅考慮兩兩融合，可以得到10種基因型的融合細胞，即AA、BB、aa、bb、Aa、AB、Ab、aB、ab、Bb，C正確，ABD錯誤。
故選C。
【點睛】
19. 如圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞增殖情況的變化曲線，圖中B、E兩點表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列判斷錯誤的是（ ）
A. AB段和DE段發(fā)生了接觸抑制現(xiàn)象
B. BD段的細胞具有無限增殖的特點
C. 可選擇B點之前的細胞進行細胞核移植
D. 制備單克隆抗體應選擇E點后的細胞與漿細胞融合
【答案】B
【解析】
【分析】動物細胞培養(yǎng)流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
【詳解】A、AB段和DE段增殖速度減慢，則發(fā)生了接觸抑制現(xiàn)象，A正確；
B、E點后的細胞能無限繁殖，出現(xiàn)無限增殖的特點，B錯誤；
C、B點之前的細胞能保持正常的二倍體核型，則可選擇進行細胞核移植，C正確；
D、制備單克隆抗體應選擇E點后的細胞，因為能無限繁殖，D正確。
故選B。
【點睛】本題考查動物細胞的培養(yǎng)與單克隆抗體的制備，識記動物細胞培養(yǎng)的過程、特點是解題關鍵。
20. 6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G-6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，進行原代培養(yǎng)，然后用不同的單個細胞分別進行單克隆培養(yǎng)。分別從原代培養(yǎng)和各單克隆培養(yǎng)取樣，對G-6PD蛋白進行電泳檢測，結果如下圖所示。以下敘述不正確的是
A. 原代培養(yǎng)的細胞中都含有XF基因和XS基因
B. 原代培養(yǎng)細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞
C. 單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同
D. 實驗結果可能是女性細胞中一條X染色體隨機失活導致的
【答案】C
【解析】
【分析】由題干信息“將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，進行原代培養(yǎng)，然后用不同的單個細胞分別進行單克隆培養(yǎng)”以及結合電泳檢測結果可知，基因型為XFXS的細胞有的能夠合成F型蛋白，有的能夠合成S型蛋白，說明該雜合子細胞中的兩個基因都有表達的機會，可能是該女性細胞中一條X染色體隨機失活導致的。
【詳解】將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，進行原代培養(yǎng)，由于細胞分裂過程中遺傳物質不變，所以原代培養(yǎng)的細胞中都含有XF基因和XS基因，A正確；對原代培養(yǎng)的細胞進行電泳檢測，結果出現(xiàn)F型蛋白和S型蛋白，而單克隆培養(yǎng)的細胞只能出現(xiàn)一種條帶，說明原代培養(yǎng)的細胞為不同類型，即原代培養(yǎng)細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞，B正確；動物細胞培養(yǎng)過程中細胞分裂方式為有絲分裂，遺傳物質不變，故細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因相同，C錯誤；原代培養(yǎng)的細胞后代用胰蛋白酶處理形成的單個細胞進行克隆培養(yǎng)，在克隆培養(yǎng)的后代中，有的細胞群只合成F型蛋白，有的細胞群只合成S型蛋白，說明XFXS的雌性體細胞的兩個X染色體會有一個隨機失活，且這個細胞的后代相應的X染色體均會發(fā)生同樣的變化，D正確。
故選C。
21. 下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）
A. 動物細胞培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基
B. 培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具要進行消毒處理
C. 定期更換培養(yǎng)液可以防止代謝產(chǎn)物的積累對細胞造成的危害
D. 細胞培養(yǎng)液中通常含有維生素、激素、糖等多種能源物質
【答案】C
【解析】
【分析】動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在適當?shù)呐囵B(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術。動物細胞培養(yǎng)需滿足基本的營養(yǎng)條件，培養(yǎng)液中需有氨基酸、無機鹽、糖類和維生素等，同時需要適宜的溫度、pH和滲透壓，還需在無菌無毒的環(huán)境下去培養(yǎng)。無菌：對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行滅菌處理，在無菌的環(huán)境下進行操作；無毒：定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物。
【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基，能大量增殖，A錯誤；
B、培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具要滅菌處理，消毒不能起到徹底殺菌的作用，B錯誤;
C、動物細胞培養(yǎng)過程中，細胞會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，包括有害物質，故定期更換培養(yǎng)液可以防止代謝產(chǎn)物的積累對細胞造成危害，C正確；
D、維生素既不是細胞的結構物質，也不能提供能量，只是對細胞的生長和代謝起到調(diào)節(jié)作用；激素是信息分子，對細胞的生長只具有調(diào)節(jié)作用，兩者都不是能源物質，D錯誤。
故選C。
22. 將小鼠細胞與人細胞融合后獲得“人—鼠融合細胞”，發(fā)現(xiàn)人的染色體會隨機丟失，最終只保留一條或幾條染色體。下列敘述正確的是（ ）
A. 可利用PCR技術檢測人的基因表達產(chǎn)物
B. 小鼠細胞與人細胞融合表明細胞膜具有信息識別的功能
C. “人—鼠融合細胞”的獲得突破了人和小鼠之間的生殖隔離
D. 可通過檢測“人—鼠融合細胞”基因表達產(chǎn)物，初步定位人基因位于幾號染色體
【答案】D
【解析】
【分析】生殖隔離是指兩種生物不能產(chǎn)生后代，或產(chǎn)生的后代不可育，具有生殖隔離的生物屬于兩個物種。
【詳解】A、基因表達的產(chǎn)物多是蛋白質，不能用PCR檢測，A錯誤；
B、小鼠細胞與人細胞在誘導下融合，表明細胞膜具有流動性，B錯誤；
C、如果“人—鼠融合細胞”的獲得突破生殖隔離需要產(chǎn)生可育的后代，C錯誤；
D、融合實驗中，人染色體會隨機丟失，最終只保留一條或幾條染色體，可通過檢測“人－鼠融合細胞”基因表達產(chǎn)物，初步定位人基因位于幾號染色體，D正確。
故選D。
23. 長時間浸泡的木耳可能滋生椰毒假單胞桿菌，其代謝產(chǎn)生的米酵菌酸是一種可以引起人食物中毒的毒素。米酵菌酸分子量較小不能單獨引起免疫反應，為了高效檢測米酵菌酸，科研人員在制備米酵菌酸單克隆抗體時，要將米酵菌酸經(jīng)過處理后再將其多次注入小鼠體內(nèi)，經(jīng)檢測合格后，才從小鼠脾臟中提取相應細胞與骨髓瘤細胞進行融合，相關敘述正確的是（ ）
A. 將米酵菌酸單克隆抗體注射人體內(nèi)可以用來預防人食物中毒
B. 米酵菌酸分子經(jīng)過特殊處理的目的是制備供免疫細胞識別的抗原
C. 經(jīng)特殊處理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是為了促進記憶T細胞的產(chǎn)生
D. 處理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次數(shù)是由血液中米酵菌酸分子的濃度決定的
【答案】B
【解析】
【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、將米酵菌酸單克隆抗體注射人體內(nèi)可以用來治療人食物中毒，A錯誤；
B、根據(jù)題干信息，米酵菌酸分子量較小不能單獨引起免疫反應，在制備米酵菌酸單克隆抗體時，要將米酵菌酸經(jīng)過處理后再將其多次注射小鼠，經(jīng)檢測合格后，才從小鼠脾臟中提取相應細胞與骨髓瘤細胞進行融合，因此米酵菌酸分子經(jīng)過特殊處理的目的是制備供免疫細胞識別的抗原，進而產(chǎn)生能產(chǎn)生抗體的漿細胞，B正確；
C、經(jīng)特殊處理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是為了促進產(chǎn)生更多的漿細胞，C錯誤；
D、處理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次數(shù)由機體內(nèi)漿細胞的數(shù)量決定，D錯誤。
故選B。
24. 下列有關動物細胞融合和植物原生質體融合的共同點的說法，正確的是（ ）
A. 融合后的細胞都可以發(fā)育成一個新的個體
B. 融合成功的標志都是融合細胞形成新的細胞壁
C. 都能打破有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能
D. 都能用PEG融合法或滅活病毒誘導法促進細胞的融合
【答案】C
【解析】
【分析】動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，誘導融合的方法、所用的技術手段、所依據(jù)的原理均不完全相同，且動物細胞融合只能形成雜種細胞，而植物細胞融合能形成雜種個體。
【詳解】A、動物細胞融合只能形成雜種細胞，A錯誤；
B、植物細胞融合成功的標志是融合細胞形成新的細胞壁，動物細胞不是，B錯誤；
C、動物細胞融合和植物原生質體融合都能打破有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能，C正確；
D、滅活的病毒只能誘導動物細胞融合，不能促進植物原生質體融合，D錯誤。
故選C。
25. 實驗發(fā)現(xiàn)小鼠的體細胞中轉入一些基因就可以誘導出與胚胎干細胞功能類似的誘導多能干細胞（iPS細胞）?？茖W家將獲得的iPS細胞誘導分化成T細胞，以期用于傳染病的治療。下列敘述正確的是（ ）
A. 誘導iPS細胞的過程使細胞發(fā)生形態(tài)、結構和功能的改變
B. iPS細胞誘導生成T細胞的過程，體現(xiàn)了細胞的全能性
C. 制備iPS細胞原理與植物細胞脫分化與再分化類似
D. 體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性降低
【答案】A
【解析】
【分析】胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細胞團）。特點：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造。
【詳解】A、iPS細胞是由體細胞誘導分化而成的，該過程中有細胞形態(tài)、結構的改變，A正確；
B、iPS細胞誘導生成T細胞的過程，體現(xiàn)了細胞分化的過程，沒有體現(xiàn)全能性，B錯誤；
C、小鼠的體細胞中轉入四種基因就可以誘導產(chǎn)生一種與胚胎干細胞功能類似的誘導多能干（iPS）細胞，類似于植物組織培養(yǎng)中的脫分化的過程，C錯誤；
D、體細胞經(jīng)誘導產(chǎn)生iPS細胞后，細胞的全能性升高，D錯誤。
故選A。
第Ⅱ卷（非選擇題共50分）
二、非選擇題（本大題共4小題，計50分）
26. 研究人員將抗鹽基因轉入普通煙草培育出抗鹽煙草，該過程所用的質粒與含抗鹽基因的DNA上相關限制酶的酶切位點分別如下圖1、圖2所示。下圖3表示該過程中利用含目的基因的農(nóng)桿菌進行轉化的示意圖。請回答下列問題：
（1）圖1質粒中沒有標注出來的基本結構是___。
（2）用圖中質粒和目的基因構建基因表達載體時，應選用限制酶___同時切割質粒和含目的基因的DNA片段。
（3）將上述切開的質粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導入受體細胞，受體細胞的類型可能包含___（不考慮基因突變）。
①抗X、抗Y②抗X、不抗Y③不抗X、抗Y④不抗X、不抗Y
（4）農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，其原因是當植物體受損傷時，傷口處的細胞會___；煙草細胞與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)的目的是利用農(nóng)桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可以___的特性。
（5）在目的基因的檢測與鑒定中，檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是___。
【答案】（1）復制原點
（2）BamHI和Sau3AI
（3）①②④ （4） ①. 分泌大量的酚類化合物 ②. 轉移到受體細胞，并整合到受體細胞染色體DNA上
（5）檢測目的基因是否轉錄出了mRNA
【解析】
【分析】基因工程技術的基本步驟：1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA-分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質-抗原-抗體雜交技術。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【小問1詳解】
基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，包括目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因等。根據(jù)圖1所示，質粒缺少復制原點基本結構。
【小問2詳解】
目的基因應位于啟動子和終止子之間，根據(jù)圖中箭頭可知，目的基因應該在右側的限制酶切割位點插入，為了防止目的基因和運載體的任意連接，不采用同種限制酶，破壞Y抗生素抗性基因更加有利于目的基因的檢測與鑒定，不用圖中的HindⅢ，BamHI、BclⅠ的識別序列包含Sau3AI的識別序列，因此應選用限制酶BamHI切割質粒，選用Sau3AⅠ（或BamHⅠ、Sau3AⅠ）切割含目的基因的DNA片段。
【小問3詳解】
將上述切開的質粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導入受體細胞的可能有重組質粒或質粒，重組質粒含有X抗生素抗性基因，所以受體細胞可能抗X而對Y敏感，②正確；也可能抗X和抗Y，①正確；如果不含有質粒，受體細胞兩種抗性都沒有，④正確，故選①②④。
【小問4詳解】
農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，其原因是當植物體受損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的酚類化合物；農(nóng)桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可以轉移到受體細胞，整合到宿主細胞染色體DNA上，因此可以將煙草細胞與農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)。
【小問5詳解】
在目的基因的檢測與鑒定中，檢測目的基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是檢測其是否成功轉錄出mRNA。
27. 球姜酮是一種新型抗腫瘤藥物。某研究小組以鼠肝癌細胞和正常肝細胞為材料進行了相關實驗?；卮鹣铝袉栴}：
（1）與正常肝細胞相比，肝癌細胞的特點是___（答出2點）。
（2）進行實驗前，常用胰蛋白酶處理肝組織塊以獲得分散的單個細胞，這說明細胞間的物質主要是___。該處理不能選用胃蛋白酶，請從動物細胞培養(yǎng)的條件角度進行解釋：___。
（3）在動物細胞培養(yǎng)時，細胞培養(yǎng)所需氣體主要有___和CO2，其中前者的作用是___。
（4）已知肝細胞中X基因的過量表達與肝癌的發(fā)生密切相關。若要檢測球姜酮的抑癌效果，應該如何設計實驗?請寫出實驗的主要思路___。
【答案】27. 在適宜的條件下，肝癌細胞能夠無限增殖；肝癌細胞的形態(tài)結構發(fā)生顯著變化；肝癌細胞的表面發(fā)生了變化
28. ①. 蛋白質 ②. 多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4，而胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性（意近即可）
29. ①. O2 ②. 細胞代謝所必需
30. 將鼠肝癌細胞分為甲、乙兩組，甲組細胞培養(yǎng)液中加入一定量球姜酮，乙組細胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水，經(jīng)適宜條件培養(yǎng)后，（從甲、乙兩組收集等量細胞，）通過分別檢測X基因在甲、乙兩組細胞中表達的蛋白質水平的差異
【解析】
【分析】1、癌細胞的主要特征：失去接觸抑制，能無限增殖；細胞形態(tài)結構發(fā)生顯著改變；細胞表面發(fā)生變化，細胞膜上的糖蛋白等物質減少，導致細胞間的黏著性降低;
2、動物細胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質；（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。
【小問1詳解】
一般而言，癌細胞的特點有：在適宜的條件下，肝癌細胞能夠無限增殖；肝癌細胞的形態(tài)結構發(fā)生顯著變化；肝癌細胞的表面發(fā)生了變化，糖蛋白減少，易于擴散和轉移等。
【小問2詳解】
酶具有專一性，進行實驗前，常用胰蛋白酶處理肝組織塊以獲得分散的單個細胞，這說明細胞間的物質主要是蛋白質；酶作用的發(fā)揮需要適宜的條件，胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，而多數(shù)細胞生存的適宜pH為7．2～7．4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，故動物細胞培養(yǎng)過程中不能選用胃蛋白酶。
【小問3詳解】
動物細胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，主要是氧氣和CO2，其中氧氣是細胞代謝所必需的，CO2可以維持一定的pH。
【小問4詳解】
結合題意分析，本實驗的目的“檢測球姜酮的抑癌效果”，則實驗的自變量為球姜酮的有無，因變量為X基因的表達情況，實驗設計應遵循對照與單一變量原則，故可設計實驗如下：將鼠肝癌細胞分為甲、乙兩組（無關變量一致）；甲組細胞培養(yǎng)液中加入一定量球姜酮，乙組細胞培養(yǎng)液中加入無菌生理鹽水（單一變量）；經(jīng)適宜條件培養(yǎng)后，（從甲、乙兩組收集等量細胞，）通過分別檢測X基因在甲、乙兩組細胞中表達的蛋白質水平的差異（檢測因變量）。
28. 2017年11月～12月，我國科學家在世界上率先利用去甲基化酶（KD4D）的mRNA，經(jīng)過體細胞克隆技術克隆出了獼猴“中中”和“華華”，該成果標志著中國率先開啟了以體細胞克隆猴為動物模型的時代。下圖是體細胞克隆猴的技術流程，請據(jù)圖回答問題：
（1）獲得克隆猴的體細胞核移植技術難度明顯高于胚胎細胞核移植，原因是___，恢復其全能性較難。
（2）圖中步驟①是克隆猴的技術難點之一，需要將卵母細胞培養(yǎng)到___后進行去核操作，而后將供體細胞注入，用物理或化學方法激活___，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。一般利用未受精的去核卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是___（答出2點）。
（3）體細胞克隆猴的另外一個技術難點是猴的體細胞克隆胚胎發(fā)育差。科學家發(fā)現(xiàn)，胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關。由此推測，圖中KDM4DmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是___。
（4）圖中克隆猴的核遺傳物質來自___。體細胞克隆可以得到大量遺傳背景相似或相同的實驗動物，這樣的實驗動物用于醫(yī)學研究的好處是___。
【答案】（1）體細胞分化程度高
（2） ①. MⅡ中期（或減數(shù)第二次分裂中期） ②. 重構細胞 ③. 卵母細胞中含有的細胞質成分更能促進細胞核全能性的表達；卵母細胞體積大，易操作
（3）催化組蛋白的去甲基化
（4） ①. 獼猴胚胎成纖維細胞 ②. 有利于解決動物遺傳背景差異大造成的實驗可重復性差的問題；可使實驗組和對照組的比較更具有說服力等（合理即可）
【解析】
【分析】胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術，這是胚胎工程的最后一道工序，胚胎分割時，應選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。
【小問1詳解】
克隆猴的體細胞核移植技術難度明顯高于胚胎細胞核移植，原因是體細胞分化程度高，恢復其全能性較難；
【小問2詳解】
圖中步驟①體細胞核移植是克隆猴的技術難點之一，其具體操作為，首先需要將卵母細胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ中期）使其發(fā)育成熟后進行去核操作；而后用物理（電刺激）或化學方法激活重構胚，使其完成分裂和發(fā)育；一般利用未受精的去核卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是卵母細胞中含有的細胞質成分更能促進細胞核全能性的表達；卵母細胞體積大，易操作；
【小問3詳解】
由于胚胎發(fā)育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關，為了使胚胎順利發(fā)育，需要對組蛋白進行去甲基化操作，因此可推知圖中KDM4dmRNA翻譯產(chǎn)生的酶的作用是催化組蛋白去甲基化的；
【小問4詳解】
克隆猴的核遺傳物質來自核供體，即獼猴胚胎成纖維細胞；體細胞克隆可以得到大量遺傳背景相似或相同的實驗動物，這樣的實驗動物用于醫(yī)學研究的好處是有利于解決動物遺傳背景差異大造成的實驗可重復性差的問題；可使實驗組和對照組的比較更具有說服力等。
29. 為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術的基礎上，構建抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）。請回答下列問題：
（1）本研究中制備單克隆抗體時，應選用___作為抗原注射小鼠。
（2）單克隆抗體制備過程中第一次篩選獲得的雜交瘤細胞具有的特點是___。
（3）已知正常細胞內(nèi)DNA合成包括全合成及補救合成兩條途徑，物質A能阻斷DNA的全合成途徑；全合成途徑被阻斷后，正常細胞可以利用環(huán)境中獲取的物質H和物質T經(jīng)激酶或轉化酶的催化合成DNA，即啟動補救合成途徑。骨髓瘤細胞缺少補救合成途徑所需的激酶或轉化酶，故只有全合成途徑。具體篩選原理如下圖（不能增殖的細胞在體外培養(yǎng)時很快死亡，篩選時不用特別考慮）：
為篩選得到雜交瘤細胞，選擇培養(yǎng)基必須含有上圖中的___物質，試分析其篩選原理：___。
（4）由單克隆抗體研制成的抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通常由___（填數(shù)字）部分組成，其中一部分被稱為“瞄準裝置”，它作用的原理是___。
（5）單克隆抗體除可以運載藥物外，還有___（答出1點）等作用。
【答案】（1）人的乳腺癌細胞
（2）既可以無限增殖，又可以產(chǎn)生抗體
（3） ①. A、H、T ②. 雜交瘤細胞的全合成途徑被物質A阻斷后，因同時含有B細胞和骨髓瘤細胞的遺傳物質，故可以利用環(huán)境中的物質H和物質T進行補救合成途徑而無限增殖；瘤細胞及自身融合細胞中的DNA全合成途徑被物質A阻斷后無法增殖；B細胞及自身融合細胞由于在體外培養(yǎng)時不能增殖，會很快死亡（意近即可）
（4） ①. 3 ②. 抗原—抗體特異性結合
（5）作為診斷試劑、治療疾病
【解析】
【分析】1、根據(jù)題意“為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術的基礎上，構建抗體－藥物偶聯(lián)物（ADC）”可知，本研究中制備單克隆抗體時，應選用人的乳腺癌細胞作為抗原注射到小鼠體內(nèi)。
2、由單克隆抗體研制成的抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通常由抗體、接頭和藥物3部分組成，由于抗原—抗體的結合具有特異性，將單克隆抗體稱為是“瞄準裝置”。
【小問1詳解】
根據(jù)題意“為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術的基礎上，構建抗體－藥物偶聯(lián)物（ADC）”可知，本研究中制備單克隆抗體時，應選用人的乳腺癌細胞作為抗原注射小鼠。
【小問2詳解】
單克隆抗體制備過程中要經(jīng)過兩次篩選，第一次篩選時使用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長，經(jīng)第一次篩選后獲得的雜交瘤細胞具有特點是既可以無限增殖，又可以產(chǎn)生抗體。
【小問3詳解】
據(jù)題意并結合題圖可知，核苷酸合成有兩個途徑，物質A可以阻斷其中的全合成途徑，加入H、A、T三種物質，正常細胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶，能進行補救合成途徑；制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉化酶，骨髓瘤細胞缺少補救合成途徑所需的激酶或轉化酶，故只有全合成途徑。故為篩選得到雜交瘤細胞，選擇培養(yǎng)基必須含有上圖中的A、H、T物質，試分析其篩選原理：雜交瘤細胞的全合成途徑被物質A阻斷后，因同時含有B細胞和骨髓瘤細胞的遺傳物質，故可以利用環(huán)境中的物質H和物質T進行補救合成途徑而無限增殖；而瘤細胞、 瘤—瘤細胞中的DNA全合成途徑被物質A阻斷后無法增殖。
【小問4詳解】
由單克隆抗體研制成的抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通常由抗體、接頭和藥物3部分組成，其中被稱為“瞄準裝置”的是單克隆抗體，其作用的原理是抗原—抗體特異性結合。
【小問5詳解】
單克隆抗體除可以運載藥物外，還有作為診斷試劑、治療疾病等作用。限制酶種類
BamHI
BclI
Sau3AI
HindⅢ
識別序列及切割位點
G↓GATCC
T↓GATCA
LGATC
A↓AGCTT