?天津市寶坻區(qū)一中2022-2023學年高二下學期第一次階段性練習生物試題
學校:___________姓名：___________班級：___________考號：___________

一、單選題
1．楊梅果實風味獨特，酸甜適中，具有很高的營養(yǎng)價值和保健價值。下列是制作楊梅酒和楊梅醋的流程，制取發(fā)酵液；向楊梅汁中加入白砂糖，將糖的質量分數(shù)調至8%，滅菌冷卻→酒精發(fā)酵；接種酵母菌，恒溫發(fā)酵→果醋發(fā)酵，加入酒精，接種醋酸菌→取樣檢測；對發(fā)酵產物進行檢測。下列敘述正確的是（　?。?br /> A．楊梅酒和楊梅醋的制作過程是在嚴格無菌條件下進行的
B．用帶蓋瓶子制作楊梅酒時，擰松瓶蓋間隔時間不一定相同
C．楊梅醋發(fā)酵液中，液面處的醋酸菌密度小于瓶底處的密度
D．在楊梅醋的發(fā)酵過程中所需溫度低于楊梅酒的發(fā)酵溫度
【答案】B
【分析】果酒制作的原理：在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。方程式：C?H??O?→2C?H?OH+2CO?
果醋制作的原理：當氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br /> 【詳解】A、制作楊梅酒時，利用楊梅上附著的酵母菌進行發(fā)酵，制作楊梅醋時，可直接將醋酸菌接種在楊梅酒的發(fā)酵液中，二者不需要在嚴格無菌條件下進行，A錯誤；
B、酵母菌進行酒精發(fā)酵時會產生二氧化碳，因此用帶蓋瓶子制作楊梅酒時，需要擰松瓶蓋放氣，但由于不同發(fā)酵瓶中酵母菌的數(shù)量不一定相同，因此放氣間隔時間不一定相同，B正確；
C、醋酸菌屬于好氧菌，在楊梅醋發(fā)酵液中，液面處的醋酸菌更易接觸到充足氧氣，因此其密度大于瓶底處的密度，C錯誤；
D、楊梅酒發(fā)酵溫度低于楊梅醋，D錯誤。
故選B。
2．傳統(tǒng)發(fā)酵技術在我國應用廣泛，某學生認為果酒制作的流程中存在一些問題，并提出了自己的改進方法。下列描述正確的有（????）
①發(fā)酵容器要清洗干凈并用70%的酒精消毒②葡萄要先除去枝梗再充分洗凈③人為添加酵母菌種可以縮短發(fā)酵時間，實驗更易成功④建議改用“泡菜壇”裝置進行果酒的發(fā)酵⑤放氣過程中可能會進入空氣，造成污染⑥正午暴曬沖洗的葡萄，充分干燥后再釀制
A．①②③④ B．①②④⑥ C．①③④⑤ D．②③⑤⑥
【答案】C
【分析】果酒制作的原理是在無氧條件下，酵母菌利用葡萄糖進行無氧呼吸產生酒精和二氧化碳。
【詳解】①為了避免雜菌污染，發(fā)酵容器要清洗干凈并用70%的酒精消毒，①正確；
②葡萄清洗時，不能先除去枝梗，會導致雜菌污染、營養(yǎng)流失，而是應該先沖洗后去除枝梗，②錯誤；
③人為添加酵母菌菌種，酵母菌數(shù)量增多，可以縮短發(fā)酵時間，③正確；
④泡菜壇水槽注滿水可以制造一個無氧環(huán)境，有利于酵母菌進行無氧呼吸，故可改用“泡菜壇”裝置進行果酒的發(fā)酵，④正確；
⑤放氣時有可能會進入空氣，空氣中的雜菌可能進入發(fā)酵瓶造成污染，⑤正確；
⑥沖洗后的葡萄不可在正午時進行暴曬，紫外線具有消毒殺菌的作用，會殺死葡萄皮上的酵母菌，影響發(fā)酵效果，⑥錯誤。

綜上所述，①③④⑤正確。
故選C。
3．約9000年前，我們的祖先就會利用微生物將谷物、水果等發(fā)酵為含酒精的飲料，后來又通過固體發(fā)酵法制得其他食品，如醬油、醋、豆豉、腐乳等，從而形成了中華民族特有的飲食文化。下列與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相關的描述，正確的是（????）
A．傳統(tǒng)發(fā)酵技術是利用不同原核生物產生不同代謝物的原理，生產人們需要的產物
B．發(fā)酵是在適宜的條件下，將原料通過微生物的無氧呼吸轉化為人類所需產物的過程
C．谷物、水果等原料可為微生物的生長提供各種營養(yǎng)物質，發(fā)酵前無需進行滅菌處理
D．與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相比，發(fā)酵工程要接種通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種
【答案】C
【分析】發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經過特定的代謝途徑轉化為人類所需要的產物的過程。
【詳解】A、傳統(tǒng)發(fā)酵技術利用的微生物有原核生物（如乳酸菌），也有真核生物（如酵母菌），A錯誤；
B、發(fā)酵是在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉化為人類所需產物的過程，并非都是通過微生物的無氧呼吸，B錯誤；
C、谷物、水果等原料可為微生物的生長提供各種營養(yǎng)物質，傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般利用的是原料中天然存在的微生物，因此發(fā)酵前無需進行滅菌處理，C正確；
D、發(fā)酵工程接種的優(yōu)良菌種可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，D錯誤。
故選C。
4．幽門螺旋桿菌（Hp）能引起消化道疾病的發(fā)生，能分泌脲酶，醫(yī)務工作者在胃病患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下；配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板→X→培養(yǎng)→觀察。下列敘述錯誤的是（　?。?br /> A．常見的滅菌方法有濕熱滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌
B．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可初步篩選出幽門螺旋桿菌
C．培養(yǎng)基滅菌冷卻到50°C左右倒平板，平板冷凝后應將其倒置
D．題中X表示接種，尿酶分解尿素后會使培養(yǎng)基pH降低
【答案】D
【分析】 無菌技術：獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。無菌技術圍繞如何防止雜菌污染展開，包括消毒和滅菌。
【詳解】A、常見的滅菌方法有濕熱滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌，A正確；
B、在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上只有能分泌脲酶的微生物可以生長，可初步篩選出幽門螺旋桿菌，B正確；
C、平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，C正確；
D、題中X表示接種，幽門螺旋桿菌能分泌脲酶，脲酶分解尿素產生氨，使培養(yǎng)基pH升高，D錯誤。
故選D。
5．鮮牛奶容易被金黃色葡萄球菌污染，該菌高度酎鹽，可引起人類肺炎等疾病。在血平板（培養(yǎng)基添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色，下圖為檢測鮮牛奶被金黃色葡萄球菌污染的操作流程，下列敘述錯誤的是（　?。?br />
A．飲用前的鮮牛奶或使用后的液體培養(yǎng)基均可用高溫瞬時消毒法進行處理
B．肉湯培養(yǎng)基加入一定量NaCl的目的是維持微生物細胞的滲透壓
C．振蕩培養(yǎng)可以使微生物與營養(yǎng)物質充分接觸，更有利于微生物的生長
D．血平板上的接種方法是平板劃線法，血平板上出現(xiàn)周圍透明的溶血圈
【答案】A
【分析】培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構成
（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質；
（2）營養(yǎng)構成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。
【詳解】A、鮮牛奶用巴氏消毒法，使用后的液體培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌后再丟棄，防止對環(huán)境造成污染，A錯誤；
B、NaCl屬于無機鹽，無機鹽在培養(yǎng)基中具有調節(jié)和維持微生物細胞的滲透壓的作用，B正確；
C、振蕩培養(yǎng)的目的是使微生物與營養(yǎng)物質充分接觸，增加O2濃度，更有利于微生物生長，C正確；
D、根據(jù)圖示可知，利用接種環(huán)接種，接種方法是平板劃線法，金黃色葡萄球菌可破壞菌落周圍的紅細胞，產生透明的溶血圈，D正確。
故選A。
6．炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患的傳染病，對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診，具體過程是先通過采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落，再進行細菌鑒定，實驗流程如圖所示。已知在該實驗中噬菌體能夠使炭疽桿菌死亡，增加實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度。下列分析錯誤的是（????）

A．實驗中所用的液體培養(yǎng)基的碳源為有機碳源
B．在35°C條件下培養(yǎng)24h，液體培養(yǎng)基因雜菌污染而變渾濁
C．實驗過程中，對照組試管中應加入等量生理鹽水
D．若疑似患者已被炭疽桿菌感染，則實驗組培養(yǎng)基的渾濁度比對照組的高
【答案】B
【分析】炭疽桿菌是原核生物，可作為噬菌體的宿主；炭疽桿菌是異養(yǎng)型生物，培養(yǎng)時需要有機物作為碳源。
【詳解】A、炭疽桿菌是異養(yǎng)型的生物，需要以有機物作為碳源，液體培養(yǎng)基的碳源為有機碳源，A正確；
B、在35°C條件下培養(yǎng)24h，主要因為炭疽桿菌大量繁殖導致液體培養(yǎng)基變渾濁，B錯誤；
C、實驗組加入的是生理鹽水配制的澄清噬菌體液，為了排除生理鹽水的影響，對照組試管中應加入等量生理鹽水，C正確；
D、噬菌體的宿主具有專一性，患者被炭疽桿菌感染，實驗組加入噬菌體就會侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌就會裂解，已知在該實驗中噬菌體能夠使炭疽桿菌死亡，增加實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度，故實驗組培養(yǎng)基渾濁度高于對照組，D正確。
故選B。
7．酵母菌細胞壁的主要成分是幾丁質。釀酒酵母產酒精能力強，但沒有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱。為了實現(xiàn)以谷物為原料高效生產酒精的目的，科研人員進行了下圖所示改良酵母菌種實驗。下列敘述正確的是（????）

A．以谷物為原料用釀酒酵母釀酒時，不需對原料進行糖化處理
B．在釀酒酵母純培養(yǎng)時，可以加入適量的青霉素
C．用PEG誘導之前需用纖維素酶去除兩種酵母的細胞壁
D．以淀粉轉化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標
【答案】B
【分析】果酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精和二氧化碳，酵母菌是兼性厭氧微生物，在缺氧條件下進行無氧呼吸，在氧氣充足的條件下進行有氧呼吸；酵母菌具有核膜包被的細胞核，屬于真核生物。
【詳解】A、釀酒酵母沒有合成淀粉酶的能力，因此以谷物為原料用釀酒酵母釀酒時，需對原料進行糖化處理，即將淀粉轉變?yōu)槠咸烟牵珹錯誤；
B、青霉素抑制細菌生長，酵母菌屬于真菌，加入適量的青霉素作為選擇培養(yǎng)基可以抑制細菌繁殖，更容易獲得釀酒酵母純培養(yǎng)物，B正確；
C、酵母菌的細胞壁主要成分是幾丁質，需要用幾丁質酶處理，C錯誤；
D、為了實現(xiàn)以谷物為原料高效生產酒精的目的，目的菌最終的鑒定指標應該是產生酒精的能力，D錯誤。
故選B。
8．下列關于動物細胞培養(yǎng)及植物組織培養(yǎng)的說法，錯誤的是（????）
A．選材時，一般都選分裂、分化能力強的組織
B．均在離體、無菌、無毒條件下進行
C．都能體現(xiàn)細胞的全能性，其原理相同
D．培養(yǎng)基成分的差異主要是動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中含血清等天然成分，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中含細胞分裂素、生長素等植物激素
【答案】C
【分析】1、植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織，器官或細胞經過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發(fā)育形成植株。
2、動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)及植物組織培養(yǎng)選材時，一般選擇幼齡的器官或組織、或者幼嫩的組織，細胞分裂能力強(且分化程度低)，A正確；
B、為防止雜菌污染，導致培養(yǎng)失敗，動物細胞培養(yǎng)及植物組織培養(yǎng)均需在離體、無菌、無毒條件下進行，B正確；
C、植物組織培養(yǎng)的結果是完整植株，體現(xiàn)了細胞的全能性；動物細胞培養(yǎng)的結果是細胞株、細胞系，原理是細胞增殖，不能體現(xiàn)細胞的全能性，C錯誤；
D、培養(yǎng)基成分的差異是動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中含血清等天然成分，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中含細胞分裂素、生長素兩種植物激素，D正確。
故選C。
9．植物細胞工程在農業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應用，相關敘述正確的是（　?。?br /> A．細胞產物的工廠化生產主要是利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，提高單個細胞中次生代謝物的含量
B．植物頂端分生組織附近的病毒很少，甚至無病毒，因此人們?yōu)榱双@得抗病毒苗常常利用莖尖進行植物組織培養(yǎng)
C．利用花藥離體培養(yǎng)獲得玉米幼苗，直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個體，這樣能夠極大的縮短育種年限
D．快速繁殖花卉的過程中，誘導愈傷組織期間一般不需要光照，此時細胞代謝類型為異養(yǎng)需氧型
【答案】D
【分析】由于植物細胞的次生代謝物含量很低，從植物組織提取會大量破壞植物資源，有些產物又不能或難以通過化學合成途徑得到，因此人們期望利用植物細胞培養(yǎng)來獲得目標產物，這個過程就是細胞產物的工廠化生產；植物細胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖的技術。
【詳解】A、細胞產物的工廠化生產主要是利用植物細胞培養(yǎng)技術，通過促進細胞增殖，以從細胞中獲得次生代謝物，A錯誤；
B、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無病毒，因此，切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，B錯誤；
C、利用花藥離體培養(yǎng)可獲得玉米幼苗的單倍體，再經過誘導染色體數(shù)目加倍后，直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個體，這樣能夠極大的縮短育種年限，C錯誤；
D、快速繁殖花卉的過程中，誘導愈傷組織期間一般不需要光照，由于植物細胞不能進行光合作用合成有機物，故此時細胞代謝類型為異養(yǎng)需氧型，D正確。
故選D。
10．科學家采用體細胞雜交技術得到了“番茄一馬鈴薯”雜種植株。下列與植物體細胞雜交技術相關的敘述，錯誤的是（????）
A．可以利用離心、電融合等物理方法誘導植物原生質體融合
B．可以利用高Ca2+一高pH融合法等化學方法誘導植物原生質體融合
C．利用兩種不同植物體細胞雜交時，得到的細胞類型最多有3種
D．利用植物體細胞雜交技術，可以實現(xiàn)遠緣雜交育種
【答案】C
【分析】植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。
【詳解】AB、促進植物原生質體融合的方法有電融合法、離心法、高Ca2+-高pH融合法、PEG誘導融合法等，AB正確；

C、若只考慮細胞的兩兩融合，理論上融合的細胞有3種類型，還存在沒有融合的細胞，C錯誤；
D、植物體細胞雜交技術最大的優(yōu)點就是克服生物遠緣雜交不親和的障礙，D正確。
故選C。
11．植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術或方法與原理不完全相符的是（????）
A．植物組織培養(yǎng)獲得幼苗和單克隆抗體技術制備抗體-細胞的全能性
B．酶解法處理植物細胞壁獲得原生質體-酶的專一性
C．原生質體融合和動物細胞融合獲得雜交細胞-細胞膜的流動性
D．紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)獲得相應產品-細胞增殖
【答案】A
【分析】植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性，植物體細胞雜交的原理是細胞膜的流動性和全能性，動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖，動物細胞融合的原理是細胞膜的流動性。
【詳解】A、植物組織培養(yǎng)的原理是細胞的全能性，單克隆抗體的制備的原理是細胞膜的流動性和細胞的增殖，A錯誤；
B、植物細胞壁的成分是纖維素和果膠，用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁制備原生質體，利用了酶的專一性，B正確；
C、用物理法或者化學法使得原生質體融合和動物細胞融合，利用了細胞膜具有一定的流動性的特點，C正確；
D、紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)目的是獲得更多細胞或細胞產物，其原理只涉及細胞增殖，D正確。
故選A。
12．和牛肉多汁細嫩，肉用價值極高，在日本被視為“國寶”。我國科研人員利用細胞工程等技術成功培育出優(yōu)良和牛品種，下列說法錯誤的是（????）
A．用促性腺激素處理母牛，可以獲得更多的卵子
B．精子接觸卵細胞膜時，會引發(fā)卵細胞膜反應
C．對移植前的胚胎進行性別鑒定，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞
D．胚胎移植只能在同種生物的不同個體間進行
【答案】B
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括:
①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）;
②配種或人工授精;
③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段)﹔
④對胚胎進行移植;
⑤移植后的檢查。
【詳解】A、促性腺激素可以使雌牛超數(shù)排卵，獲得更多的卵子，A正確;
B、精子的頭部在進入卵細胞后發(fā)生卵細胞膜反應，B錯誤;
C、囊胚期細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，因此對移植前的胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行鑒定，C正確；
D、胚胎移植只能在同種生物不同個體之間進行，胚胎移植實質是早期胚胎在相同生理條件下的空間位置的轉移，D正確。
故選B。
13．正常小鼠是二倍體。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結構。ES細胞能夠誘導分化形成所有的細胞類型，但很難分化形成胎盤。四倍體胚胎與ES細胞的嵌合體則會使二者的發(fā)育潛能相互補償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織。下列敘述正確的是（　　）
A．嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細胞的基因型不同
B．嵌合體中的ES具有自我更新能力并只能分化為胎盤等胚外組織
C．嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時需移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內才可發(fā)育
D．將正常小鼠2細胞期胚胎用滅活病毒誘導法使2細胞融合，可得到四倍體胚胎
【答案】D
【分析】胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。胚胎工程的許多技術，實際是在體外條件下，對動物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進行的模擬操作。嵌合體-遺傳學上用以指不同遺傳性狀嵌合或混雜表現(xiàn)的個體。
【詳解】A、四倍體胚胎與ES細胞的嵌合體則會使二者的發(fā)育潛能相互補償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織，所以嵌合體發(fā)育形成的ES小鼠基因型與供體ES細胞的基因型相同，A錯誤；
B、嵌合體中的ES具有自我更新能力，很難分化形成胎盤，可分化為處胎盤以外的所有細胞類型，B錯誤；
C、嵌合體胚胎發(fā)育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內才可以進一步發(fā)育，C錯誤；
D、正常小鼠是二倍體，所以兩個2細胞期胚胎用滅活病毒等誘導法使細胞融合，可得到一個含四個染色體組的細胞，再經胚胎的早期培養(yǎng)可得到四倍體胚胎，D正確。
故選D。
14．細胞融合技術在生物育種和免疫學中有著廣泛應用，下圖為細胞融合的簡略過程，據(jù)下圖分析，下列說法錯誤的是（　　）

A．甲中a和b在體外受精前，需在體外進行卵子的成熟培養(yǎng)和精子獲能處理
B．形成乙所依賴的生物學原理為細胞膜的流動性和植物細胞的全能性
C．對于已融合形成的細胞d，還需利用選擇培養(yǎng)基篩選出產生特定抗體的雜交瘤細胞才可大規(guī)模生產單克隆抗體丙
D．若a和b分別為基因型AaBB、aaBb個體所產生的花粉細胞，則c（只考慮兩兩融合）有6種基因型
【答案】C
【分析】集到的卵母細胞和精子，要分別對它們進行成熟培養(yǎng)和獲能處理，然后才能用于體外受精。
乙表示植物體細胞雜交植株，要得到乙，先要進行植物細胞的融合(利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，得到原生質體，用電擊等方法誘導原生質體融合），該過程依賴的生物學原理為細胞膜的流動性，獲得雜交細胞后，再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜交細胞培養(yǎng)成雜交植株，該過程所依賴的生物學原理是植物細胞的全能性。
【詳解】A、采集到的卵母細胞和精子，要分別對它們進行成熟培養(yǎng)和獲能處理，然后才能用于體外受精，A正確；
B、乙表示植物體細胞雜交植株，要得到乙，先要進行植物細胞的融合(利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，得到原生質體，用電擊等方法誘導原生質體融合），該過程依賴的生物學原理為細胞膜的流動性，獲得雜交細胞后，再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜交細胞培養(yǎng)成雜交植株，該過程所依賴的生物學原理是植物細胞的全能性，B正確；
C、對于已融合形成的細胞d，利用選擇培養(yǎng)基篩選出的只是雜交瘤細胞，而要獲得產生特定抗體的雜交瘤細胞還需要進行專一性抗體檢測之后才可大規(guī)模生產單克隆抗體丙，C錯誤；
D、若a和b分別為基因型AaBB、aaBb個體所產生的花粉細胞，AaBB能產生AB、aB這兩種花粉，aaBb能產生aB、ab這兩種花粉，去壁兩兩融合可得到：AABB、aaBB、AaBB、AaBb、aaBb、aabb這6種基因型，D正確。
故選C。
15．下列有關哺乳動物早期胚胎發(fā)育的敘述錯誤的是（　　）
A．在桑葚胚階段胚胎的內部開始出現(xiàn)含有液體的腔
B．胚胎干細胞是一類未分化的細胞，可以從早期胚胎中分離獲得
C．桑葚胚之前細胞一般都具有全能性，囊胚的細胞逐漸分化
D．受精卵早期分裂時，胚胎中細胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加
【答案】A
【分析】胚胎發(fā)育過程：
（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數(shù)量增加，胚胎總體積不增加；
（2）桑葚胚：32個細胞左右的胚胎，之前所有細胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細胞；
（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現(xiàn)囊胚腔。注：囊胚的擴大會導致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化；
（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。
【詳解】A、在桑葚胚階段，32個細胞左右的胚胎，胚胎的內部無含有液體的腔，A錯誤；
B、胚胎干細胞是一類未分化的細胞，可以從早期胚胎或原始性腺中分離獲得，B正確；
C、桑葚胚的細胞一般都具有全能性，囊胚的細胞逐漸分化，C正確；
D、受精卵早期分裂時，胚胎中細胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積并不增加，甚至略微縮小，D正確。
故選A。
16．下列關于人體造血干細胞的敘述，錯誤的是（　?。?br /> A．造血干細胞比胚胎干細胞的分化程度高
B．造血干細胞屬于成體干細胞，但不具有組織特異性
C．造血干細胞可不斷增殖和分化，適當捐獻造血干細胞不影響人體健康
D．造血干細胞移植是治療白血病的有效手段
【答案】B
【分析】動物和人體內仍保留著少數(shù)具有分裂和分化能力的細胞，這些細胞叫做干細胞。哺乳動物的胚胎干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。在功能上具有發(fā)育的全能性，即可以分化為成年動物體內任何一種組織細胞。人的骨髓中有許多的造血干細胞，它們能夠增殖和分化，不斷產生紅細胞、白細胞和血小板，補充到血液中去。
【詳解】A、造血干細胞可以分化成紅細胞、白細胞和血小板，胚胎干細胞可以分化為任何一種組織細胞，所以造血干細胞分化程度更高，A正確；
B、成體干細胞是成體組織或器官內的干細胞，具有組織特異性，只能分化為特定的細胞或組織，B錯誤；
C、骨髓中的造血干細胞可不斷增殖和分化，不斷產生紅細胞、白細胞和血小板，補充到血液中去，所以捐獻造血干細胞不影響人體健康，C正確；
D、造血干細胞移植可以取代白血病患者病變的造血干細胞，是治療白血病的有效手段，D正確。
故選B。
17．大腸桿菌經溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會纏繞在細胞壁碎片上，靜置一段時間，質粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質粒DNA。用三種限制酶處理提取的產物，電泳結果如圖所示。下列關于質粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（????）

A．提取DNA時可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質等物質溶解
B．將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進行鑒定
C．電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理
D．根據(jù)電泳結果，質粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點，而有限制酶III的切割位點
【答案】D
【分析】DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白質溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。
【詳解】A、DNA在冷酒精中溶解度很低，提取DNA時加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質等物質溶解，A正確；
B、將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺試劑在沸水條件進行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍色，B正確；
C、DNA帶負電，電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理，C正確；
D、因為質粒的本質是環(huán)狀的DNA，限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質粒上有一個切割位點，也可能沒有切割位點，D錯誤。
故選D。
18．為使玉米獲得抗除草劑性狀，科研人員進行了相關操作(如圖所示)。含有內含子的報告基因不能在原核生物中正確表達，其正確表達產物能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色。轉化過程中愈傷組織表面常殘留農桿菌，會導致未轉化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列敘述錯誤的是

A．T-DNA可將基因G轉移并整合到愈傷組織細胞的染色體DNA上
B．利用物質K和抗生素進行篩選1，可獲得農桿菌的藍色菌落
C．利用物質K和除草劑進行篩選2，更易于獲得抗除草劑的轉基因植株
D．愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過程中，需要添加植物激素
【答案】B
【分析】1、農桿菌轉化法的具體過程：
（1）利用土壤的Ti質粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農桿菌的Ti質粒上。
（2）將整合了目的基因的Ti質粒導入土壤農桿菌細胞內。
（3）利用土壤農桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒導入植物細胞內。
（4）含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。
2、原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。
3、農桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。
4、轉化：目的基因插入Ti質粒的T-DNA上 農桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
【詳解】A、農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農桿菌的這一特點，將目的基因（基因G）插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈傷組織細胞的染色體DNA上，A正確；
B、農桿菌屬于原核生物，含有內含子的報告基因不能在原核生物中正確表達，故不會出現(xiàn)農桿菌的藍色菌落，B錯誤；
C、根據(jù)題意可知，報告基因的產物能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色，而愈傷組織表面殘留的農桿菌會導致未轉化的愈傷組織能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長，因此利用物質K和除草劑進行篩選2，更易于獲得抗除草劑的轉基因植株，C正確；
D、愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過程中，需要添加植物激素，如生長素和細胞分裂素，D正確。
故選B。
19．作為基因工程的運輸工具——載體，必須具備的條件及理由對應不正確的是（????）
A．能夠在宿主細胞中穩(wěn)定保存并大量復制，以便提供大量的目的基因
B．具有多個限制酶切割位點，以便于目的基因的插入
C．具有某些標記基因，以便目的基因能夠準確定位與其結合
D．對宿主細胞無傷害，以不影響宿主細胞的正常生命活動
【答案】C
【分析】為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點，以便于目的基因的插入； ②要有標記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細胞中穩(wěn)定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來。
【詳解】A、作為運載體必須具備的條件之一是能夠在宿主細胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復制，以便提供大量的目的基因，A正確；
B、作為運載體必須具備的條件之一是具有多個限制酶切點，以便于目的基因的插入，B正確；
C、作為運載體必須具備的條件之一是具有某些標記基因，以便于重組后進行重組DNA分子的篩選，C錯誤；
D、攜帶外源DNA片段的質粒進入受體細胞后，停留在細胞中進行自我復制，或整合到染色體DNA上，隨著染色體DNA進行同步復制，同時運載體對宿主細胞無傷害，以使目的基因在宿主細胞中復制并穩(wěn)定保存，D正確。
故選C。
20．膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤，研究者以膀胱癌細胞特異性表達的UBC蛋白作為靶蛋白，設計出多種基因，將其分別轉入不同噬菌體DNA上，并在子代噬菌體表面表達出可與UBC特異性結合的多肽，再根據(jù)圖1、2的操作進行篩選，其中第二次洗脫時加入含UBC單抗的洗脫液，以便獲取能與膀胱癌細胞特異性結合的小分子多肽。下列敘述正確的是（????）


A．噬菌體與膀胱細胞共有的結構是核糖體
B．第一次洗脫的目的是除去多余的噬菌體
C．兩次洗脫時均需進行攪拌以使噬菌體與UBC分離
D．所獲得的小分子多肽也能與膀胱細胞特異性結合
【答案】B
【分析】單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。UBC單抗與UBC的親和力高，可以作為結合力的條件對照。
【詳解】A、噬菌體屬于病毒，病毒無細胞結構，不含核糖體，A錯誤；
BC、分析題意，要檢測哪個噬菌體能表達出與UBC特異性結合的多肽，需要將UBC與噬菌體混合，第一次洗脫掉的是洗脫洗去不能與UBC結合，沒有特異性多肽的游離在培養(yǎng)液中的噬菌體，第二次洗脫加入UBC單抗，替換下含特異性多肽的噬菌體，需要攪拌使噬菌體與UBC分開，B正確，C錯誤；
D、抗原與抗體的結合具有特異性，與細胞膜表面的糖蛋白密切相關，所獲得的小分子多肽能與膀胱癌細胞特異性結合，但不能與膀胱細胞特異性結合，D錯誤。
故選B。
21．用X酶切割DNA分子后，得到黏性末端①，用Y酶切割DNA分子后，得到黏性末端②，如下圖所示，以下說法不正確的是（????）

A．X與Y通常是不同的限制酶
B．限制酶與DNA水解酶破壞的化學鍵相同
C．具有①②的兩個DNA片段可連接成重組分子，重組后可以被X或Y切割
D．使用X和Y同時切割目的基因和載體不可以防止目的基因反向鏈接
【答案】C
【分析】限制酶主要從原核生物中分離純化出來。特異性：能夠識別雙鏈 DNA 分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。
【詳解】A 、由圖可知， X 與 Y 識別的核苷酸序列不同，因此 X 與 Y 是不同的限制酶， A 正確；
B 、限制酶與 DNA 水解酶破壞的化學鍵相同，都是磷酸二酯鍵， B 正確；
C 、具有①②的兩個 DNA 片段可連接成重組分子，核苷酸序列發(fā)生了改變，先前能識別的核苷酸序列發(fā)生了改變，所以重組后不可以被 X 或 Y 切割，C錯誤；
D、使用 X 和 Y 同時切割目的基因和載體可以防止自身環(huán)化，但不可以防止目的基因反向鏈接（因為兩種酶切割形成的黏性末端的堿基序列能互補），D正確。
故選C。
22．為了獲得抗蚜蟲棉花新品種，研究人員將雪花蓮凝集素基因（GNA）和尾穗莧凝集素基因（ACA）與載體（pBI121）結合，然后導入棉花細胞。下列敘述正確的是（????）

A．用限制酶BsaBI和DNA聚合酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因
B．與只用KpnI相比，KpnI和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉錄方向正確
C．在含卡那霉素的培養(yǎng)基上能存活的植物細胞即為成功轉入目的基因的細胞
D．用PCR技術檢測GNA和ACA基因成功導入棉花細胞后，棉花就一定表現(xiàn)抗蚜蟲性狀
【答案】B
【分析】基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2） 基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因等。（3） 將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。 將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4)）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術和PCR技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA：分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質：抗原-抗體雜交技術。 個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】A、由圖可知，GNA、ACA都含有限制酶BsaBI的酶切位點，故用限制酶BsaBI和DNA連接酶處理兩種基因可獲得GNA-ACA融合基因，DNA聚合酶是催化單個核苷酸連接，而DNA連接酶是催化DNA片段連接，A錯誤；
B、圖中質粒與ACA-GNA上都含有KpnI和XhoI的酶切位點，與只用KpnI相比，KpnI和XhoI處理融合基因和載體可保證基因轉錄方向正確，避免反向連接，B正確；
C、由于載體上含有卡那霉素抗性基因，在含卡那霉素的培養(yǎng)基上能存活的植物細胞為成功轉入目的基因的細胞或含有普通質粒的細胞，C錯誤；
D、PCR技術可用于基因探針的制備，可用來檢測目的基因是否導入受體細胞，基因GNA和ACA導入棉花細胞后不一定正常表達，所以不一定具有抗蟲性狀，D錯誤。
故選B。


23．下列關于DNA片斷擴增及其鑒定的說法錯誤的是（????）
A．在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構象等有關
B．凝膠中DNA分子通過染色，可以在波長300nm的紫外燈下被檢測出來
C．該實驗用到的緩沖液和酶，從冰箱取出直接水浴加熱
D．電泳技術可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關系的鑒定
【答案】C
【分析】DNA分子具有可解離的基團，在一定的PH下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反方向的電極移動，這個過程就是電泳。PCR的產物一般通過瓊脂凝膠電泳來鑒定。
【詳解】A、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關，A正確；
B、凝膠中的DNA分子通過染色、可以在波長為300nm的紫外線下被檢測出來，B正確；
C、該實驗所需材料可以直接從公司購買，緩沖液和酶應分裝成小份，并在-20℃儲存。使用前，將所需試劑從冰箱拿出，放在冰塊上緩慢融化，C錯誤；
D、電泳技術可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關系的鑒定，D正確。
故選C。
24．研究發(fā)現(xiàn)，人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品?？茖W家將該蛋白基因導入山羊體內使其能夠在山羊乳腺細胞中表達，從而從山羊乳汁中提取人溶菌酶。圖1表示被限制酶切割后的該蛋白基因，圖2表示培育流程。下列敘述正確的是（????）

A．切割該蛋白基因的限制酶有2種，識別的序列可分別為GATCCAT和AGCTTCC
B．①過程是基因工程的核心步驟，需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶和質粒
C．②過程常采用顯微注射的方法，受體細胞應選擇受精卵而一般不選擇體細胞
D．③過程應將山羊受精卵培育到原腸胚進行移植，移植后需進行是否妊娠的檢測
【答案】C
【分析】圖2中①為構建基因表達載體或重組質粒，②為將重組質粒導入受體細胞，③為胚胎移植。
【詳解】A、根據(jù)目的基因切割后產生的黏性末端不同，可確定切割該基因的限制酶有2種，一種酶識別的序列可為GGATCC，在G和G之間進行切割，另一種酶識別的序列可為AAGCTT，在A和A之間切割，A錯誤；
B、①過程是基因工程的核心步驟，需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶，質粒不屬于工具酶，B錯誤；
C、②過程為將重組質粒導入受體細胞，常采用顯微注射的方法，受體細胞可以選擇受精卵（全能性高），一般不選擇體細胞，C正確；
D、③過程應將山羊受精卵培育到桑椹胚或囊胚再進行移植，且移植后還需對受體是否發(fā)生妊娠反應進行檢測，D錯誤。
故選C。
25．原位PCR技術是利用原位PCR儀，在組織或細胞中靶DNA所在的位置上進行的PCR循環(huán)擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。進行擴增時，反應體系中的反應成分需滲透到組織或細胞的靶DNA處才能進行擴增。PCR反應體系中需要添加一定濃度的Mg2+，而組織細胞間的物質會吸附Mg2+，使進入細胞的Mg2+減少。下列說法正確的是（　?。?br /> A．原位PCR技術可用于人類β-地中海貧血致病基因的檢測
B．原位PCR反應體系中使用的Mg2+濃度要比常規(guī)PCR低
C．反應體系中引物的G、C堿基含量越高，其結合的特異性越強
D．反應體系中NTP作為擴增的原料，會依次連接到子鏈的5'端
【答案】A
【分析】PCR技術:
1、概念:PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。
2、原理:DNA復制。
3、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
4、過程:高溫變性、低溫復性、中溫延伸。
【詳解】A、分析題干可知，原位PCR技術是通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法，故推測原位PCR技術可用于人類β-地中海貧血致病基因的檢測，A正確；
B、因為組織細胞間的物質會吸附Mg2+，故原位PCR反應體系中使用的Mg2+濃度要比常規(guī)PCR高，B錯誤；
C、在一定范圍內，反應體系中引物的G、C堿基含量越高，其結合的特異性越強，但G、C過高，不利用退火，從而阻礙目標DNA的擴增，C錯誤；
D、dNTP作為擴增的原料會依次連接到3'端，D錯誤。
故選A。

二、綜合題
26．在農業(yè)生產研究上，常需要進行微生物的分離和計數(shù)。
(1)下表為兩種微生物的培養(yǎng)基配方：
A組：



葡萄糖
尿素
瓊脂
1.4g
2.1g
0.2g
10.0g
1.0g
15.0g
B組
纖維素粉




KCl
酵母膏
水解酪素
5g
1g
1.2g
0.9g
0.5g
0.5g
0.5g
0.5g
注：上述兩種培養(yǎng)基中的物質溶解后，均用蒸餾水定容至1000mL。
①從功能上來看，上述兩種培養(yǎng)基均屬于_______培養(yǎng)基。
②如果要對土壤中分解尿素的細菌進行分離，則需要選擇_______(填“A”或“B”)培養(yǎng)，該培養(yǎng)基中的碳源是_______。③在分離尿素分解菌所用的培養(yǎng)基中可加入_______指示劑，根據(jù)指示劑的顏色可鑒定某種細菌能否分解尿素。
(2)如圖是某同學采用的接種微生物的方法，請回答下列問題：

①本實驗采用的接種微生物的方法是_______法，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，為達到這一目的，操作上應注意：每次劃線前要_______接種環(huán)；接種環(huán)冷卻后從_______開始劃線，劃線結束的要求是：_______。除了圖示方法外，還有一種方法也可以獲得單菌落，這種方法得到的數(shù)值一般比實際值_______，原因是：_______。
②三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)量，在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)液中各取0.1ml涂布平板，得到以下統(tǒng)計結果：
甲同學涂布了2個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是236和260，取平均值248；
乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是210、240和250，取平均值233；
丙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是21、212和256，取平均值163。
在三位同學的統(tǒng)計結果中，_______同學的統(tǒng)計結果是最正確的，每毫升的活菌數(shù)是_______。
【答案】(1) 選擇 A 葡萄糖 酚紅
(2) 平板劃線 灼燒 上一次劃線的末端 第一次劃線的區(qū)域和最后一個區(qū)域不要相連 小 當兩個或者多個菌落生長在一起的時候，觀察到的往往按照一個菌落計算 乙 個

【分析】微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落。
【詳解】（1）據(jù)題表中的培養(yǎng)基的配方分析可知，A組培養(yǎng)基中的氮源為尿素，是篩選尿素分解菌的選擇培養(yǎng)基。B組培養(yǎng)基中的碳源是纖維素，是篩選纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基。對土壤中分解尿素的細菌進行分離時，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，故應當選擇A組培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的碳源是葡萄糖。尿素分解菌可以用酚紅指示劑進行鑒定。尿素分解菌產生的脲酶能夠將尿素分解為氨而使培養(yǎng)基pH升高，使酚紅指示劑呈紅色。
（2）①據(jù)圖分析，使用了接種環(huán)，圖示表示平板劃線法接種，每次劃線前接種環(huán)要灼燒，冷卻后從上一次劃線的末端開始劃線；劃線結束的要求是：第一次劃線的區(qū)域和最后一個區(qū)域不要相連。稀釋涂布平板法亦可以用來分離單菌落，同時可以用來計數(shù)，當兩個或者多個菌落生長在一起的時候，觀察到的往往按照一個菌落計算，故這種方法得到的數(shù)值一般比實際值偏小。
②在進行平板菌落計數(shù)時，應選擇落數(shù)在30 ～300之間的平板進行計數(shù)，同時為避免誤差應選擇至少3個或3個以上的平板進行計數(shù)并取平均值，因此乙同學的統(tǒng)計結果是正確的。菌落平均數(shù)是（210+212+256）÷3=233，每毫升的活菌數(shù)是=(C÷V)×M=平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)=233÷0.1×106=2.33x109個。
【點睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)等知識，要求學生識記微生物的分離和鑒定的相關知識，意在強化學生對實驗室的微生物的培養(yǎng)的相關知識的理解與掌握。
27．“白菜一甘藍”與普通白菜相比，具有生長期短、耐熱性強和易于儲藏等優(yōu)點。下圖是利用白菜（2n=20）和甘藍（2n=18）通過細胞工程育種的方法獲得“白菜一甘藍”的雜交過程示意圖，回答以下問題：

(1)可用___酶來處理白菜細胞和甘藍細胞得到原生質體A、B。
(2)誘導原生質體融合的方法有多種，常用的物理方法是___（答3種），融合完成的標志是___。
(3)通過植物體細胞雜交技術獲得的“白菜一甘藍”體細胞中染色體組數(shù)為___；“白菜一甘藍”___（填“能”或“不能”）進行有性生殖。通常情況下，白菜和甘藍有性雜交是不能成功的，原因是___。
(4)植物體細胞雜交技術和傳統(tǒng)雜交技術相比的優(yōu)點是___。
【答案】(1)纖維素酶和果膠
(2) 離心、振動、電激 再生出新的細胞壁
(3) 4/四 能 存在生殖隔離
(4)克服遠緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種

【分析】原生質體是指除去細胞壁后的植物細胞部分，包括細胞膜以內的部分，可以進行原生質體融合。植物體細胞雜交，又稱原生質體融合是指將植物不同種、屬，甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合，然后進行離體培養(yǎng)，使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁，未脫壁的兩個細胞是很難融合的，植物細胞只有在脫去細胞壁成為原生質體后才能融合，所以植物的細胞融合也稱為原生質體融合。
【詳解】（1）植物的細胞壁由纖維素和果膠組成?？捎美w維素酶和果膠酶來處理白菜細胞和甘藍細胞得到原生質體A、B。
（2）誘導原生質體融合的方法有多種，常用的物理方法是離心、振動、電激，融合完成的標志是再生出新的細胞壁。
（3）白菜和甘藍都是二倍體，都含有2個染色體組，通過植物體細胞雜交技術獲得的“白菜一甘藍”體細胞中染色體組數(shù)為4；“白菜一甘藍”含有成對的染色體組，能進行減數(shù)分裂，能進行有性生殖。通常情況下，白菜和甘藍是不同的物種，存在生殖隔離，有性雜交是不能成功的。
（4）植物體細胞雜交技術利用原生質體融合的原理，和傳統(tǒng)雜交技術相比的優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和的障礙，培育作物新品種。
28．如圖為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖。據(jù)圖回答下列問題：

(1)圖中向小鼠注射抗原后，所獲得的免疫抗血清實際上是含_____________（填寫抗體的名稱；2分）的混合物，這種方法制備的抗體不僅產量低，而且純度低。與其相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點在于它能準確識別___________的細微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結合，并能大量制備。
(2)圖中選用B細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交細胞，如果僅考慮細胞的兩兩融合，其融合細胞有________種類型。已免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合的過程體現(xiàn)了細胞膜具有_________的結構特點。在體外融合時需要誘導，與誘導植物原生質體融合不同的是圖中還可用__________誘導融合。
(3)在體外進行動物細胞培養(yǎng)時需要在合成加培養(yǎng)基的基礎上添加_________等等天然成分。同時為了維持培養(yǎng)液的pH，需要提供的氣體環(huán)境是___________。
(4)圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出_____________，篩選②的目的是篩選出__________，篩選②的方法是__________和____________。
(5)由圖中可看出，單克隆抗體的制備過程中，運用了動物細胞工程中的________和_________兩大技術。
【答案】(1) Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 不同抗原
(2) 3 流動性 滅活的病毒
(3) 血清 95%空氣和5%CO2
(4) 雜交瘤細胞 能產生所需抗體的雜交瘤細胞 克隆化培養(yǎng) 抗體檢測
(5) 動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng)

【分析】1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群。
3、雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產生特異性抗體。
4、誘導動物細胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。
5、單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)勢在于特異性強，靈敏度高，可大量制備。
6、生物導彈：單克隆抗體+放射性同位素、化學藥物或細胞毒素，借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞。療效高，副作用小，位置準確。
【詳解】（1）據(jù)圖可知，向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，所獲得的免疫抗血清實際上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物，這種方法制備的多克隆抗體不僅產量低、而且純度低。與多克隆抗體相比，單克隆抗體突出的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高（準確識別抗原），并能大量制備。
（2）B細胞和骨髓瘤細胞融合體現(xiàn)了細胞膜的結構特性-流動性；如果僅考慮細胞的兩兩融合，其融合細胞有3種類型（B細胞和B細胞融合、B細胞和雜交瘤細胞融合、雜交瘤細胞和雜交瘤細胞融合）。動物細胞融合時還可以用滅活的病毒誘導融合。
（3）動物細胞培養(yǎng)時，在合成培養(yǎng)基中還需要添加血清，以供應動物細胞生長的某些物質。培養(yǎng)時的氣體環(huán)境是95%空氣和5%CO2，CO2能維持培養(yǎng)液的pH。
（4）圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出雜交瘤細胞，篩選②的目的是篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。單克隆抗體制備第二次篩選的方法是克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。
（5）由圖中可看出，單克隆抗體的制備過程中，運用了動物細胞工程中的動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)兩大技術；其中動物細胞融合的意義是突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。
29．研究人員將抗鹽基因轉入普通煙草培育出抗鹽煙草，該過程所用的質粒與含的抗鹽基因的DNA上相關限制酶的酶切位點分別如圖1，圖2所示。限制性核酸內切酶BamHI，BeI，Sau3Al，HindⅢ，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓CATC，A↓AGCTT。圖3表示該過程中利用含目的基因的農桿菌進行轉化作用的示意圖。

(1)用圖中質粒和目的基因構建基因表達載體時，為了使目的基因準確與質粒鏈接并防止自身環(huán)化，可以用限制酶____________切割質粒和目的基因。限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的__________；構建基因表達載體時還需要__________酶參與。
(2)將上述切開的質粒與目的基因混合并胞連接后，導入受體細胞（不考慮基因突變），受體細胞的類型包含_______。
A．抗X，抗Y B．抗X、不抗Y
C．不抗X、抗Y D．不抗X、不抗Y
(3)圖3過程__________（填序號）中發(fā)生了基因重組，過程②，③所用的培養(yǎng)基中，通常要調控好_______和_______兩類激素的比例。
(4)從個體水平是鑒定抗鹽轉基因煙草是否抗鹽的方法是______________
(5)鑒定目的基因是否在煙草細胞出中轉錄出mRNA的方法是_____________。
【答案】(1) BamHⅠ、Sau3AⅠ 磷酸二酯鍵 DNA連接酶
(2)ABD
(3) ① 生長素 細胞分裂素
(4)用一定濃度鹽水澆灌轉基因幼苗或將其移栽到鹽堿地中觀察其生長狀態(tài)
(5)分子雜交技術

【分析】基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、復制原點和標記基因等。載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存，②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入，③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。
（3）將目的基因導入受體細胞：將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定。
【詳解】（1）目的基因應位于啟動子和終止子之間，根據(jù)圖中箭頭可知，為了防止目的基因和運載體的任意連接，應該不采用同種限制酶，因此應選用限制酶BamHI和Sau3AⅠ切割質粒和含目的基因的DNA片段。限制酶切割的是DNA分子中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，然后再用DNA連接酶將質粒和目的基因連接，構建形成基因表達載體。
（2）將上述切開的質粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導入受體細胞的可能有重組質?；蛸|粒，重組質粒含有X抗生素抗性基因而不含Y抗生素抗性基因，所以受體細胞可能抗X而對Y敏感；也可能抗X和抗Y；如果不含有質粒，受體細胞兩種抗性都沒有。
故選ABD。
（3）在人為條件下，基因工程的原理也屬于基因重組，故基因重組發(fā)生在圖3中①過程 ；圖3過程②、③表示的是植物組織培養(yǎng)過程，該過程中需要調控好生長素和細胞分裂素的比例，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向。
（4）從個體水平鑒定抗鹽轉基因煙草是否培育成功，可以用一定濃度鹽水澆灌轉基因幼苗或將其移栽到鹽堿地中，觀察其生長狀態(tài)。
（5）檢測基因是否表達采用抗原抗體雜交法，可用相應的抗體與提取的蛋白質雜交；檢測目的基因是否轉錄出mRNA的方法是分子雜交技術。

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