3   基因工程單元測試卷一、選擇題:本題共15個(gè)小題,每小題3分,共45分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中,只有一項(xiàng)是符合題目要求的1.腈水合酶(N0)廣泛應(yīng)用于環(huán)境保護(hù)和醫(yī)藥原料生產(chǎn)等領(lǐng)域,但不耐高溫。利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)在N0的α和β亞基之間加入一段連接肽,可獲得熱穩(wěn)定的融合型腈水合酶(N1)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(  )。A.N1與N0氨基酸序列的差異是影響其熱穩(wěn)定性的原因之一B.加入連接肽需要通過改造基因?qū)崿F(xiàn)C.獲得N1的過程需要進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯D.檢測N1的活性時(shí)先將N1與底物充分混合,再置于高溫環(huán)境2.將人胰島素A鏈上1個(gè)天冬氨酸替換為甘氨酸,B鏈末端增加2個(gè)精氨酸,可制備出一種人工長效胰島素。下列關(guān)于該胰島素的敘述,錯(cuò)誤的是(    A.進(jìn)入人體后需經(jīng)高爾基體加工 B.比人胰島素多了2個(gè)肽鍵C.與人胰島素有相同的靶細(xì)胞 D.可通過基因工程方法生產(chǎn)3.抗蟲和耐除草劑玉米雙抗12-5是我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù),采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測,反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是(    A.預(yù)變性過程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制B.后延伸過程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分C.延伸過程無需引物參與即可完成半保留復(fù)制D.轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測含有目的基因后即可上市4.關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn),下列說法錯(cuò)誤的是(    A.過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解B.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀C.在一定溫度下,DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色D.粗提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)5.下圖是剔除轉(zhuǎn)基因植物中標(biāo)記基因的一種策略,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(    A.分別帶有目的基因和標(biāo)記基因的兩個(gè)質(zhì)粒,都帶有T-DNA序列B.該方法建立在高轉(zhuǎn)化頻率基礎(chǔ)上,標(biāo)記基因和目的基因須轉(zhuǎn)到不同染色體上C.若要獲得除標(biāo)記基因的植株,轉(zhuǎn)化植株必須經(jīng)過有性繁殖階段遺傳重組D.獲得的無篩選標(biāo)記轉(zhuǎn)基因植株發(fā)生了染色體結(jié)構(gòu)變異6.某實(shí)驗(yàn)利用PCR技術(shù)獲取目的基因,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示除目的基因條帶(引物與模板完全配對)外,還有2條非特異條帶(引物和模板不完全配對)。為了減少反應(yīng)非特異條帶的產(chǎn)生,以下措施中有效的是(    A.增加模板DNA的量 B.延長熱變性的時(shí)間C.延長延伸的時(shí)間 D.提高復(fù)性的溫度7.關(guān)于物質(zhì)提取、分離或鑒定的高中生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn),敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/span>A.研磨肝臟以破碎細(xì)胞用于獲取含過氧化氫酶的粗提液B.利用不同物質(zhì)在酒精溶液中溶解性的差異粗提DNAC.依據(jù)吸收光譜的差異對光合色素進(jìn)行紙層析分離D.利用與雙縮脲試劑發(fā)生顏色變化的反應(yīng)來鑒定蛋白質(zhì)8.我國考古學(xué)家利用現(xiàn)代人的 DNA 序列設(shè)計(jì)并合成了一種類似磁鐵的“引子”,成功將極其微量的古人類 DNA 從提取自土壤沉積物中的多種生物的 DNA 中識別并分離出來,用于研究人類起源及進(jìn)化。下列說法正確的是(    A.“引子”的徹底水解產(chǎn)物有兩種B.設(shè)計(jì)“引子”的 DNA 序列信息只能來自核 DNAC.設(shè)計(jì)“引子”前不需要知道古人類的 DNA 序列D.土壤沉積物中的古人類雙鏈 DNA 可直接與“引子”結(jié)合從而被識別9.粗提取 DNA 時(shí),向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌,過濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過濾,在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出 DNA相對含量較高的白色絲狀物的處理方式是(    A.加入適量的木瓜蛋白酶B.37~40℃的水浴箱中保溫 10~15 分鐘C.加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為 95%的冷卻的酒精D.加入 NaCl 調(diào)節(jié)濃度至 2mol/L→過濾→調(diào)節(jié)濾液中 NaCl 濃度0.14mol/L10.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )。A.大腸桿菌質(zhì)粒上具有控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因B.基因工程的基本原理是讓目的基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在和高效復(fù)制C.用氯化鈣處理植物細(xì)胞,可使其成為能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)D.將乙肝抗原導(dǎo)入酵母菌可以獲得能生產(chǎn)乙肝疫苗的工程菌11.采用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器,使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有關(guān)敘述不正確的是(  )?!?/span>A.將含有人凝血因子基因的表達(dá)載體導(dǎo)入羊乳腺細(xì)胞中即可獲得乳腺生物反應(yīng)器B.將人凝血因子基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起構(gòu)建成基因表達(dá)載體C.該轉(zhuǎn)基因羊產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中可能會含有人凝血因子基因D.與乳腺生物反應(yīng)器相比,膀胱生物反應(yīng)器不受性別等限制,受體來源更廣泛12.已知生物體內(nèi)有一種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 Y,由 300 個(gè)氨基酸組成。如果將 Y 中 157 位的 L 異亮氨酸變成亮氨酸,261 位的酪氨酸變成絲氨酸,改變后的蛋白質(zhì) Y1 不但保留了原有 Y 的功能,且具備了催化活性。下列說法正確的是(  )。A.蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對象的差異B.可以通過對 Y 蛋白基因進(jìn)行修飾或人工合成獲得 Y1 蛋白基因C.蛋白質(zhì)工程操作過程中,不需要酶和載體作為工具D.細(xì)胞內(nèi)合成 Y1 蛋白與 Y 蛋白的過程中,遺傳信息的流向是相反的 13.圖甲表示某環(huán)型 DNA 分子經(jīng)限制性內(nèi)切核酸酶(EcoRⅠ)完全酶切后的片段電泳結(jié)果。若改變條件使其酶切不充分就有可能獲得如圖乙所示的電泳結(jié)果(kb 即千個(gè)堿基對)。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )A.該 DNA 分子全長至少為 7 kb,該 DNA 分子中至少含有4個(gè)EcoRⅠ酶切位點(diǎn)B.適當(dāng)縮短反應(yīng)時(shí)間,得到圖乙結(jié)果的可能性越大C.限制性內(nèi)切核酸酶的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì)D.適當(dāng)增加EcoRⅠ濃度,更可能得到圖乙的結(jié)果14.大引物PCR定點(diǎn)突變常用來研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致的功能變化。單核苷酸的定點(diǎn)誘變僅需進(jìn)行兩輪PCR反應(yīng)即可獲得,第一輪加誘變引物和側(cè)翼引物,第一輪產(chǎn)物作第二輪PCR擴(kuò)增的大引物,過程如圖所示。下列敘述不正確的是(  )A.第一輪PCR過程中退火所用的溫度與第二輪PCR退火的溫度不一樣B.PCR擴(kuò)增的定點(diǎn)誘變產(chǎn)物通常需要連接到載體分子上才能表達(dá)出相應(yīng)的性狀,該定點(diǎn)誘變產(chǎn)物需具備啟動(dòng)子、終止子等結(jié)構(gòu)才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯C.第二輪PCR所用的引物是第一輪PCR的產(chǎn)物DNA的兩條鏈D.將某功能蛋白的第17位Cys( UGU)改造成Ser(UCU),屬于蛋白質(zhì)工程15.農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán),并以此環(huán)為模板,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列,以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法錯(cuò)誤的是(  )。A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要耐高溫的DNA聚合酶,不需要解旋酶C.利用圖中的引物②③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對,可確定T-DNA的插入位置二、填空題(本大題共4小題,共55分)16.(每空1分,共11分)某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中,需要表達(dá)N蛋白胞外段,制備相應(yīng)的單克隆抗體,增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備,流程如圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時(shí),選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因,目的是___________。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞,質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體___________(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由___________組成的慢病毒,用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備,流程如圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫后,取小鼠脾組織用___________酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于含有混合氣體的___________中培養(yǎng),離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。(4)用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,將其接種到96孔板,進(jìn)行___________培養(yǎng)。用___________技術(shù)檢測每孔中的抗體,篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體,又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株,經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng),收集___________,提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合,形成___________,實(shí)現(xiàn)特異性治療17.(每空2分,共14分)中國是傳統(tǒng)的水稻種植大國,有一半以上人口以稻米為主食。在培育水稻優(yōu)良品種的過程中,發(fā)現(xiàn)某野生型水稻葉片綠色由基因C控制?;卮鹣铝袉栴}:(1)突變型1葉片為黃色,由基因C突變?yōu)镃1所致,基因C1純合幼苗期致死。突變型1連續(xù)自交3代,F(xiàn)3成年植株中黃色葉植株占_________(2)測序結(jié)果表明,突變基因C1轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物編碼序列第727位堿基改變,由5'-GAGAG-3'變?yōu)?'-GACAG-3',導(dǎo)致第______位氨基酸突變?yōu)開_____,從基因控制性狀的角度解釋突變體葉片變黃的機(jī)理___________________________________(部分密碼子及對應(yīng)氨基酸:GAG谷氨酸;AGA精氨酸;GAC天冬氨酸;ACA蘇氨酸;CAG谷氨酰胺)(3)由C突變?yōu)镃1產(chǎn)生了一個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)。從突變型1葉片細(xì)胞中獲取控制葉片顏色的基因片段,用限制酶處理后進(jìn)行電泳(電泳條帶表示特定長度的DNA片段),其結(jié)果為圖中____________(填“I”“Ⅱ”或“Ⅲ”)(4)突變型2葉片為黃色,由基因C的另一突變基因C2所致。用突變型2與突變型1雜交,子代中黃色葉植株與綠色葉植株各占50%。能否確定C2是顯性突變還是隱性突變?______(填“能”或“否”),用文字說明理由___________________________________18.(每空2分,共18分)水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材,主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一,具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu),提高其抗凝血活性?;卮鹣铝袉栴}:(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示,物質(zhì)a是_______,物質(zhì)b是_______。在生產(chǎn)過程中,物質(zhì)b可能不同,合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同,原因是_______________________。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸,基因工程中獲取目的基因的常用方法有___________、__________和利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增。PCR 技術(shù)遵循的基本原理是____________________。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后,分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性,結(jié)果如圖所示。推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的______(填“種類”或“含量”)有關(guān),導(dǎo)致其活性不同的原因是___________________(4) 若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異,簡要寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________________________________19.(每空2分,共12分)“綠水逶迤去,青山相向開”大力發(fā)展低碳經(jīng)濟(jì)已成為全社會的共識?;谀承┧缶奶厥獯x能力,有研究者以某些工業(yè)廢氣(含CO2等一碳溫室氣體,多來自高污染排放企業(yè))為原料,通過厭氧發(fā)酵生產(chǎn)丙酮,構(gòu)建一種生產(chǎn)高附加值化工產(chǎn)品的新技術(shù)。回答下列問題:(1)研究者針對每個(gè)需要擴(kuò)增的酶基因(如圖)設(shè)計(jì)一對________________,利用PCR技術(shù),在優(yōu)化反應(yīng)條件后擴(kuò)增得到目標(biāo)酶基因。(2)研究者構(gòu)建了一種表達(dá)載體pMTL80k,用于在梭菌中建立多基因組合表達(dá)庫,經(jīng)篩選后提高丙酮的合成量。該載體包括了啟動(dòng)子、終止子及抗生素抗性基因等,其中抗生素抗性基因的作用是________________,終止子的作用是________________。(3)培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)重組梭菌大量表達(dá)上述酶蛋白時(shí),出現(xiàn)了生長遲緩的現(xiàn)象,推測其原因可能是________________,此外丙酮的積累會傷害細(xì)胞,需要進(jìn)一步優(yōu)化菌株和工藝才能擴(kuò)大應(yīng)用規(guī)模。(4)這種生產(chǎn)高附加值化工產(chǎn)品的新技術(shù),實(shí)現(xiàn)了________________,體現(xiàn)了循環(huán)經(jīng)濟(jì)特點(diǎn)。從“碳中和”的角度看,該技術(shù)的優(yōu)勢在于________________,具有廣泛的應(yīng)用前景和良好的社會效益。
 

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