考綱要求 植物的組織培養(yǎng)。
1.植物組織培養(yǎng)的基本過程離體的植物細胞、組織、器官 ―――→ 愈傷組織 ―――→ 試管苗 ――→ 植物體2.菊花的組織培養(yǎng)過程(1)影響植物組織培養(yǎng)的主要因素①選材:一般選擇_______植株的莖上部新生的側枝。②培養(yǎng)基:常用__________,其主要成分有大量元素、微量元素、有機物,常需要添加_________。
(2)實驗操作過程制備MS固體培養(yǎng)基:配制好的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌 ↓外植體消毒:____________ → ___________ → 0.1%的氯化汞溶液消毒 → 無菌水清洗 ↓接種:始終在___________旁進行,對接種工具要用_________滅菌,將菊花 莖段插入培養(yǎng)基中時注意不要倒插 ↓培養(yǎng)與移栽:在18~22 ℃的_______中培養(yǎng),得到試管苗后進行移栽
3.月季的花藥培養(yǎng)(1)被子植物的花粉發(fā)育過程小孢子母細胞→ ________________ → _______ →雙核期→花粉粒(2)產生花粉植株的兩條途徑 (3)影響花藥培養(yǎng)的因素①主要因素:___________和_____________。②月季花藥培養(yǎng)一般選擇_____期。
1.判斷下列說法的正誤(1)二倍體植株的花粉經脫分化與再分化后可得到穩(wěn)定遺傳的植株(  )(2)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術是植物組織培養(yǎng)(  )(3)脫分化過程不需要植物激素,植物激素只有在再分化過程中發(fā)揮作用(  )(4)由于植物細胞都具有全能性,所以菊花的組織培養(yǎng)實驗中選材不會影響實驗的結果(  )
脫分化和再分化過程都需要植物激素發(fā)揮作用。
二倍體植株的花粉經脫分化與再分化后得到的是單倍體植株,只有一個染色體組的植株是高度不育的。
植物分生區(qū)細胞幾乎不含病毒,所以用分生區(qū)的細胞進行植物組織培養(yǎng)就可以得到脫毒苗。
同一種植物中不同細胞的全能性大小不同,培養(yǎng)的難易程度也不同。
(5)制備好的MS培養(yǎng)基用于植物組織培養(yǎng)時,需要加入植物激素(  )(6)被子植物的花粉發(fā)育要經過小孢子四分體時期、雙核期和單核期等階段(  )(7)單倍體植株的形成有兩種途徑,兩種途徑主要取決于培養(yǎng)基中植物激素的種類及其濃度配比(  )(8)如果通過植物組織培養(yǎng)從愈傷組織中提取某種成分,應先使用生長素后使用細胞分裂素(  )
在配制好的MS培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素,其中啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素是生長素和細胞分裂素。
花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑之間沒有絕對的界限,激素的種類及其濃度配比決定花藥脫分化產生胚狀體還是愈傷組織。
被子植物的花粉發(fā)育要經過小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。
先使用生長素,后使用細胞分裂素,有利于細胞分裂,但細胞不分化。
2.菊花的組織培養(yǎng)中,一般選擇菊花的何種器官或組織作為培養(yǎng)的材料?
提示 一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側枝作為實驗材料。
3.植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素發(fā)揮了重要作用,請完善下列表格中的內容:(1)使用先后順序與細胞分裂和分化的關系
3.植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素發(fā)揮了重要作用,請完善下列表格中的內容:(2)用量比例與根、芽的分化
4.鑒定花藥發(fā)育所處時期,什么樣的材料適合用醋酸洋紅法或焙花青-鉻礬法? 5.植物組織培養(yǎng)的兩種途徑中,脫分化之后的操作有何不同?
提示 如果所用材料的細胞核容易著色,則采用醋酸洋紅法,如果不易著色,則采用焙花青-鉻礬法。
提示 如果經過脫分化形成的是愈傷組織,則要及時將愈傷組織轉移到分化培養(yǎng)基上進一步分化形成植株。如果經過脫分化形成的是胚狀體,則轉移到新的培養(yǎng)基上即可(該培養(yǎng)基不是分化培養(yǎng)基)。
題組一 菊花的組織培養(yǎng)1.下列有關植物組織培養(yǎng)技術的敘述,正確的是(  )A.經脫分化和再分化過程形成的幼芽細胞不具有細胞全能性B.在愈傷組織培養(yǎng)過程中加入聚乙二醇,可獲得染色體加倍的細胞C.利用纖維素酶和果膠酶去除外植體的細胞壁有利于脫分化的發(fā)生D.培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比例將影響愈傷組織分化的方向
幼芽細胞含有本物種全套遺傳物質,具有細胞全能性。
用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁可用于原生質體融合。
生長素和細胞分裂素比例的不同將誘導愈傷組織向不同方向分化。
愈傷組織細胞含有細胞壁,加入聚乙二醇不能誘導細胞融合,因此不能獲得染色體加倍的細胞。
2.為了探究6-----BA和IAA對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6--BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n),結果如下表。
回答下列問題:(1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機鹽的元素可分為_________和_________兩類。上述培養(yǎng)基中,6--BA屬于___________類生長調節(jié)劑。
按照植物的需求量,在培養(yǎng)基中加入的無機鹽可分為大量元素和微量元素。
6--BA是細胞分裂素類生長調節(jié)劑。
回答下列問題:(2)在該實驗中,自變量是_________,因變量是_____________________________ _____________________________,自變量的取值范圍是______________。
再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)
0~0.5 mg·L-1 
6--BA的濃度在各實驗組中相同,因此實驗的自變量是IAA濃度,取值范圍是0~0.5 mg·L-1。
因變量是再生叢芽外植體的比率及再生叢芽外植體上的叢芽平均數,即表中的m和n。
回答下列問題:(3)從實驗結果可知,誘導叢芽總數最少的培養(yǎng)基是__號培養(yǎng)基。(4)為了誘導該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入_____(填“6--BA”或“IAA”)。
再生外植體數乘以外植體上的叢芽平均數即為叢芽總數,計算可知誘導叢芽總數最少的是1號培養(yǎng)基。
在植物組織培養(yǎng)中,生長素用于誘導細胞的分裂和根的分化,細胞分裂素主要促進細胞分裂和分化出不定芽,因此為了誘導生根,培養(yǎng)基中一般不加6-BA(細胞分裂素類生長調節(jié)劑)而加入IAA(生長素類生長調節(jié)劑)。
題組二 月季的花藥培養(yǎng)3.如圖是花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑,下列相關判斷錯誤的是(  ) A.圖中的a是愈傷組織B.①和②過程的實質相同C.選擇的花藥在花粉發(fā)育過程中越早越好D.整個培養(yǎng)過程中的細胞增殖方式只有有絲分裂
圖中的a代表愈傷組織,①和②表示分化和再分化。
無論是分化還是再分化,它們的實質都是基因選擇性表達。
選擇的花藥太早或太晚都不利于培養(yǎng),處于單核期的最好,尤其是單核靠邊期。
整個培養(yǎng)過程中無減數分裂,所以細胞增殖方式只有有絲分裂。
(1)利用月季的花藥離體培養(yǎng)產生單倍體時,選材非常重要。一般來說,在____________期花藥培養(yǎng)的成功率最高。為了選擇該時期的花藥,通常選擇___________的花蕾。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法有_________法;但是對于花粉細胞核不易著色的植物,需采用______________法,該法能將花粉細胞核染成_____色。
4.如圖表示被子植物花粉的發(fā)育過程,據圖完成下列問題。
被子植物花粉的發(fā)育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。材料的選擇是花粉植株能否培養(yǎng)成功的主要影響因素之一,同一植物的不同生理狀況誘導成功率都不相同,選擇月季花粉的最佳時期為完全未開放的花蕾。
確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是醋酸洋紅法,但是對于花粉細胞核不易著色的植物,需采用焙花青-鉻礬法,該法能將花粉細胞染成藍黑色。
(2)圖中所示的植物的基因型為AaBb(兩對基因遵循自由組合定律遺傳),則①的基因型為______,②的基因型可能為_________________。(3)⑦、⑧所指的結構依次是_____________、___________;兩者的基因型是否相同?_____。
已知圖中所示的植物的基因型為AaBb(兩對基因遵循自由組合定律遺傳),則①花粉母細胞的基因型為AaBb,其減數分裂產生的②小孢子的基因型可能為Ab或aB或AB或ab。
圖中⑦、⑧是由花粉粒進行分裂產生的兩個核,分別是花粉管細胞核和生殖細胞核。
Ab或aB或AB或ab
由于兩者來自于同一個花粉粒的有絲分裂產生的,所以兩者的基因型相同。
1.影響植物組織培養(yǎng)的主要因素(1)培養(yǎng)材料①不同植物的影響:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大,容易進行無性繁殖的植物也容易進行組織培養(yǎng)。②同一植物發(fā)育狀況、保存狀況的影響:同一種植物材料的年齡、保存時間的長短等對培養(yǎng)也有影響,幼齡、保存時間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。(2)無菌條件:培養(yǎng)基上有細菌等微生物存在時,它們比植物細胞生長、繁殖得更快,而且它們會產生毒素,使培養(yǎng)的植物細胞很快中毒腐爛,因此在培養(yǎng)過程中要求進行一系列的消毒、滅菌,并且要求無菌操作。(3)植物激素:在配制好的MS培養(yǎng)基中,常常需要添加植物激素。其中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。
2.植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)的比較
考綱要求 從生物材料中提取某些特定的成分。
1.提取玫瑰精油實驗(1)方法:_____________。(2)實驗流程鮮玫瑰花――→ _____________ ―→油水混合物 ――→ 分離油層 ――――→ 除水――→ 玫瑰油2.提取橘皮精油的實驗(1)方法:一般采用________。(2)實驗流程:石灰水浸泡→漂洗→_____→過濾→_____→再次過濾→橘皮油
加入____________
3.胡蘿卜素的提取(1)胡蘿卜素性質:_________,微溶于乙醇,_______石油醚等有機溶劑。(2)提取方法及流程①方法:_____法,_______最適宜作萃取劑。②實驗流程:胡蘿卜→粉碎→_____→萃取→_____→濃縮→胡蘿卜素。(3)鑒定方法:_______法。
1.判斷下列說法的正誤(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等,根據提取的芳香油的用途選擇提取的方法(  )(2)用柑橘和檸檬作為材料不適合用水中蒸餾的方法進行提取(  )(3)萃取是利用了芳香油易溶于有機溶劑的特性進行提取的一種方法(  )(4)提取玫瑰精油時,玫瑰與水的質量比是4∶1(  )
植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等,具體采用哪種方法要根據植物原料的特點來決定。
柑橘、檸檬芳香油的制備如果使用蒸餾法會導致原料焦糊和有效成分水解,通常使用壓榨法法。
萃取是利用了芳香油易溶于有機溶劑的特性進行提取的一種方法。
用水蒸汽蒸餾法從鮮玫瑰花中提取玫瑰精油時,為確保玫瑰精油的提取,應選擇鮮玫瑰花與清水的質量比是1:4。
(5)提取橘皮精油時,要將橘皮在石灰水中浸泡5 h,目的是防止壓榨時滑脫(  )(6)由于胡蘿卜素易溶于石油醚等有機溶劑中,所以可以采用萃取的方法進行提取(  )(7)胡蘿卜粉碎后可直接進行萃取(  )(8)水溶性和水不溶性有機溶劑都可以用于提取胡蘿卜素(  )(9)蒸餾法的實驗原理是利用水將芳香油溶解出來,再把水蒸發(fā)掉,剩余的就是芳香油(  )(10)影響萃取效率的因素除了萃取劑的性質和使用量之外,還有原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等(  )
橘皮在石灰水中浸泡時間為10小時以上,防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率。
胡蘿卜素易溶于有機溶劑中,據此可用有機溶劑萃取的方法提取。
胡蘿卜素的提取流程為:胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素→鑒定,萃取前要粉碎和干燥。
胡蘿卜是水不溶性的,因此用水不溶性有機溶劑。
蒸餾法的實驗原理是利用水不能溶解芳香油,再把芳香油蒸發(fā)掉,再冷卻得到就是芳香油。
2.玫瑰精油為什么適合用水中蒸餾進行提???3.在水中蒸餾的操作中,如何避免加熱時發(fā)生暴沸?
提示 因為玫瑰精油化學性質穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機溶劑,能隨水蒸氣一同蒸餾,且不會導致原料焦糊和有效成分水解等,所以適合用水中蒸餾法進行提取。
提示 蒸餾燒瓶下墊石棉網,并向液體中加入幾片碎石或瓷片。
4.下圖為水蒸氣蒸餾的裝置圖,請指出該裝置中的兩處錯誤。
提示 錯誤1:蒸餾瓶中的液體量太多,應占燒瓶容積的1/3~2/3。錯誤2:進水口和出水口裝反,下方的是進水口,上方的是出水口。
題組一 植物芳香油提取方法的比較1.某同學設計的提取玫瑰精油的實驗流程如圖所示,據圖分析不正確的是(  ) ①    ②     ③    ④   ⑤    ⑥ 原料 → 水蒸氣蒸餾 → 油水混合物 → 分離油層 → 除水 → 玫瑰油A.在②步中使用水氣蒸餾更簡便易行B.在操作時可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎瓷片防止暴沸C.提取精油時,向混合物中加入NaCl更利于油水分層D.加入無水Na2SO4,再用過濾法可除去分離的油層中的水分
由于玫瑰精油難溶于水,易溶于有機溶劑,因此在②步中使用水中蒸餾更簡便易行。
在操作時可向蒸餾燒瓶中加入幾片碎瓷片,目的是防止暴沸。
提取精油時,為了促進油水分層,要向油水混合物中加入NaCl。
分離的油層還含有一定的水分,需加入無水Na2SO4,再用過濾方法將其除去。
2.某植物園中種植的有菊花、玫瑰等花卉,還有葡萄、橘子等水果,其中玫瑰、橘子都可以作為植物芳香油提取的原料。請回答下列問題:(1)植物芳香油的提取方法有_____、壓榨和_____等。具體采用哪種方法要根據植物原料的特點來決定。(2)玫瑰精油適合用_____________提取,其理由是玫瑰精油具有易揮發(fā)、難溶于水、化學性質穩(wěn)定的特點。蒸餾時收集的蒸餾液不是純的玫瑰精油,而是___________。經冷凝管冷卻后,混合物又會重新分出____層和水層。如果蒸餾過程中不進行冷卻,則精油提取量會減少,原因是__________________________________。(3)橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用_____法提取橘皮精油,其中將橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,其目的是_________________________________。
植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等,具體采用哪種方法要根據植物原料的特點來決定。
部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失
玫瑰精油具有易揮發(fā)、難溶于水、化學性質穩(wěn)定的特點,適合用水蒸氣蒸餾法提取。
蒸餾時收集的蒸餾液不是純的玫瑰精油,而是油水混合物。
經冷凝管冷卻后,混合物又會重新分出油層和水層。
防止橘皮壓榨時滑脫,提高
橘皮精油的提取原料是橘皮,但橘皮易焦糊,宜采用壓榨法提取橘皮精油,其中將橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,其目的是防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率。
如果蒸餾過程中不進行冷卻,由于部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失,則精油提取量會減少。
題組二 胡蘿卜素提取實驗的操作分析3.作為萃取胡蘿卜素的有機溶劑,哪一項不符合實驗要求(  )A.能充分溶解色素 B.與水混溶C.對人無毒 D.易與產品分離
作為萃取胡蘿卜素的有機溶劑應該具有較高的沸點,能夠充分溶解胡蘿卜素,并且不與水混溶。此外,還需要考慮萃取效率、對人的毒性、是否易燃、有機溶劑是否能從產品中完全除去、會不會影響產品質量等問題。
4.請回答下列有關“胡蘿卜素提取”的問題。(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是______法。以下為提取胡蘿卜素的實驗流程:胡蘿卜→粉碎→干燥→A→過濾→B→胡蘿卜素。其中,A過程叫_____,B過程叫______。(2)在胡蘿卜顆粒的加熱干燥過程中,應嚴格將______和______控制在一定范圍內。(3)圖甲為提取胡蘿卜素的裝置示意圖,請指出圖中一處錯誤并改正:________________________________。
根據胡蘿卜素易溶于有機溶劑的特點,一般用萃取法提取。
應避免明火加熱,而采用水浴加熱
新鮮的胡蘿卜含有大量的水分,在干燥時要注意控制溫度和時間,溫度太高、時間太長會導致胡蘿卜素分解。
萃取過程應該避免明火加熱,因為有機溶劑都是易燃物,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸,因此采用水浴加熱。
4.請回答下列有關“胡蘿卜素提取”的問題。(4)圖乙是胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖。該鑒定方法的名稱是_______法。圖乙中⑤為_________,實驗過程中點樣時應注意____________________________。(5)在圖乙的胡蘿卜素的結果示意圖中,A、B、C、D四點中,屬于提取樣品的樣點是______。
胡蘿卜素粗品鑒定的方法是紙層析法。
快速細致并注意保持濾紙干燥
A、B、C、D四點中,標準樣品點加在基線兩側,即其中A、D是標準樣點,B、C是提取樣點。
⑤表示樣品原點,對于⑤實驗時應注意:每次點樣后,可用吹風機將溶液吹干,注意保持濾紙干燥。
1.植物有效成分的提取的三種常用方法比較
2.胡蘿卜素粗品鑒定過程中的5個易錯點(1)層析時沒有選擇干凈的濾紙,導致實驗現象不明顯。為了防止操作時對濾紙的污染,應盡量避免用手直接接觸濾紙,可以戴手套進行操作。(2)點樣時點樣圓點太大(直徑大于2 mm),會導致最終在濾紙上形成一條線,無法辨認被提取的色素。點樣圓點的直徑應為2 mm。(3)將點好樣的濾紙卷成圓筒狀,卷紙時不能將濾紙兩邊相互接觸,以避免由于毛細管現象導致溶劑沿濾紙兩邊的移動加快,溶劑前沿不齊,影響結果。(4)層析液沒及樣品原點,色素溶解于層析液中,造成實驗失敗。層析液不可沒及樣品原點,以免色素溶解于層析液中,使鑒定失敗。(5)沒有設置標準樣品作對照。層析液中是否提取到胡蘿卜素,可通過與標準樣品中的β-胡蘿卜素作對比予以確認。
考綱要求 (實驗)DNA的粗提取與鑒定。
1.實驗原理(1)DNA與蛋白質在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同
1.實驗原理(2)DNA不溶于_________,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質進一步分離。(3)DNA與二苯胺沸水浴加熱,呈___色。
2.操作流程材料的選?。哼x用______含量相對較高的生物組織↓破碎細胞(以雞血為例):雞血細胞→加_______→用玻璃棒攪拌→用紗布過濾 →收集濾液↓去除雜質:利用DNA在____________________中溶解度不同,通過控制NaCl 溶液的濃度去除雜質↓
不同濃度的NaCl溶液
DNA的析出:將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的體積 分數為95%的_____溶液↓DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,混合均勻后將試管置于 沸水中加熱5 min,溶液變成_____
1.判斷下列說法的正誤(1)進行DNA粗提取和鑒定實驗時,加入洗滌劑后用力進行快速、充分的研磨(  )(2)洗滌劑能瓦解細胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(  )(3)將制備的含有DNA的濾液加入60~75 ℃的恒溫水浴箱中保溫10~15 min,可以將DNA析出(  )
加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。
洗滌劑能瓦解細胞膜,但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。
將濾液放在60~75℃的恒溫水浴箱中保溫10~15分鐘能去除濾液中的部分雜質,其原理是利用了DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同。
(4)本實驗可以用哺乳動物的成熟紅細胞作實驗材料(  )(5)本實驗中兩次使用蒸餾水的目的不同(  )
哺乳動物的成熟紅細胞沒有細胞核和細胞器,不含DNA。
本實驗中兩次使用蒸餾水的目的不同,第一次是使血細胞吸水漲破,釋放DNA,第二次是用來稀釋NaCl溶液,使DNA析出。
2.下圖為“DNA粗提取和鑒定”實驗的相關操作,請仔細觀察并分析①~④操作的目的分別是什么?①_________________________________;②__________________________;③_________________________________;④__________________________。
提示 ①是使雞血細胞吸水漲破釋放出核物質?、谑俏龀鯠NA,去除溶于酒精的雜質 ③是使DNA溶解在2 ml/L NaCl溶液中 ④是稀釋NaCl溶液使其濃度接近0.14 ml·L-1,去除溶于低濃度NaCl溶液的雜質。
1.“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,操作正確的是(  )A.取制備好的雞血細胞液5~10 mL注入燒杯中,迅速加入物質的量濃度為0.14 ml/L的NaCl溶液20 mL,同時用玻璃棒沿同一方向快速攪拌5 min,可使血細胞破裂,釋放出DNAB.整個DNA提取過程中,兩次加蒸餾水的目的都是為了降低溶液中NaCl的濃度,使DNA分子的溶解度達到最低,析出DNA分子
取制備好的雞血細胞液注入燒杯中,迅速加入蒸餾水并用玻璃棒沿同一方向攪拌,使血細胞破裂,將DNA釋放出來。
題組 DNA的粗提取與鑒定過程分析
整個DNA提取過程中,使用兩次蒸餾水,第一次是使血細胞吸水漲破,釋放DNA,第二次是用來稀釋NaCl溶液,使DNA析出。
1.“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,操作正確的是(  )C.整個DNA提取操作中,兩次加入2 ml/L的NaCl溶液,目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中D.DNA鑒定操作中,只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺試劑,即可出現藍色
DNA在2 ml/L的NaCl溶液中溶解度很大,整個DNA提取操作中,兩次加入2 ml/L的NaCl溶液,目的都是使DNA盡可能多地溶解在NaCl溶液中。
在DNA鑒定操作中,DNA遇二苯胺試劑呈藍色需在沸水浴條件下完成。
2.在DNA的粗提取實驗過程中,對DNA提取量影響較小的是(  )A.使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂,釋放出DNA等核物質B.攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C.在析出DNA黏稠物時,要緩緩加入蒸餾水,直至黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻
攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動的目的是:為了防止將絲狀的DNA攪碎,不利于DNA絮狀物的挑出,但不影響DNA的提取量。
在析出DNA粘稠物時,要緩緩加入蒸餾水,且到粘稠物不再增加,如果加蒸餾水過快,會導致DNA的再溶解,從而影響DNA的提取量。
DNA在95%的冷酒精中凝集效果最佳。
在DNA從細胞中釋放的操作中,首先加蒸餾水使雞血細胞吸水漲破,然后用玻璃棒沿一個方向快速攪拌,目的是加速細胞的破裂,這有利于DNA的充分釋放。
DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、3、4”
知識網絡 答題語句
1.無論是菊花的組織培養(yǎng)還是月季的花藥培養(yǎng),其理論基礎都是植物細胞的全能性。2.植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化等過程,培養(yǎng)過程除了需要各種營養(yǎng)物質外,還需要植物激素的調節(jié)。3.產生花粉植株的途徑有兩條:一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株;另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導分化成植株。4.DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的改變而改變,在物質的量濃度為0.14 ml/L時的溶解度最小。
探究高考 明確考向
1.(2013·重慶,5)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關敘述,錯誤的是(  )A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對細胞的傷害B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑,可獲得染色體加倍的細胞C.出芽是細胞再分化的結果,受基因選擇性表達的調控D.生根時,培養(yǎng)基通常應含α-萘乙酸等生長素類調節(jié)劑
消毒劑的使用既要殺死材料表面的微生物,又要防止傷害組織細胞,影響組織培養(yǎng)。
植物細胞融合是指經纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質體的誘導融合。
出芽和生根都是細胞再分化的結果,其實質是基因的選擇性表達。
α-萘乙酸為生長素類似物,可誘導愈傷組織生根。
帶有細胞壁的愈傷組織細胞不能誘導融合形成染色體加倍的細胞。
2.(2014·江蘇,16)下列關于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述,錯誤的是(  )A.酵母和菜花均可作為提取DNA的材料B.DNA既溶于2 ml/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C.向雞血細胞液中加蒸餾水攪拌,可見玻棒上有白色絮狀物D.DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍
原則上含DNA的生物材料都可作為提取DNA的材料,只是DNA含量高的材料成功的可能性更大。
DNA在2 ml/L的NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大。
雞血細胞吸水破裂,玻棒攪拌會加快血細胞的破裂,但在蒸餾水中不會析出DNA。
DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱,待冷卻后變藍色。
3.(2015·新課標Ⅱ,39)回答與胡蘿卜素有關的問題:(1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中,最主要的是___________(填“α--胡蘿卜素”“β--胡蘿卜素”或“γ--胡蘿卜素”),該胡蘿卜素在人體內可以轉變成兩分子________,后者缺乏會引起人在弱光下視物不清的病癥,該疾病稱為_______,胡蘿卜素是_________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質。(2)工業(yè)生產上,用養(yǎng)殖的巖藻作為原料提取胡蘿卜素時,_____(填“需要”或“不需要”)將新鮮的巖藻干燥。(3)現有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑,應選用其中的__________作為胡蘿卜素的萃取劑,不選用另外一種的理由是_______________________________________________________________________________。
萃取胡蘿卜素的有機溶劑應不與水混溶,而乙醇屬于水溶性有機溶劑(其他答案合理也可)
胡蘿卜素的化學分子式中包含多個碳碳雙鍵,根據雙鍵的數目可以將胡蘿卜素劃分為α、β、γ三類,β--胡蘿卜素是其中最主要的組成成分。
一分子的β--胡蘿卜素在人或動物的小腸、肝臟等器官被氧化成兩分子的維生素A。
缺乏維生素A會造成夜盲(暫時性夜盲癥可補充維生素A得以痊愈)。
胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質。
提取胡蘿卜素時新鮮的巖藻具有大量的水分需要進行干燥,以提高萃取效率。
乙酸乙酯屬于水不溶性有機溶劑,能夠溶解胡蘿卜素。
乙醇是水溶性有機溶劑,因萃取中能與水混溶而影響萃取效果,所以不宜選作萃取劑。
4.(2013·山東,34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:(1)篩選產胡蘿卜素的酵母菌R時,可選用_______________或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時需先灼燒接種環(huán),其目的是_____________________。(2)培養(yǎng)酵母菌R時,培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可分別為酵母菌R的生長提供_____和_____。
接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法。
接種過程為了避免其他雜菌的污染,要做無菌操作,所以接種前需對接種環(huán)進行灼燒滅菌。
蔗糖主要提供碳源,當然也可以作為能源物質,硝酸鹽含氮元素,可提供氮源。
4.(2013·山東,34)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產胡蘿卜素的微生物菌體中提取獲得,流程如下:(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,干燥過程應控制好溫度和_________以防止胡蘿卜素的分解;萃取過程中宜采用_________方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進行過濾,其目的是___________________。(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需用胡蘿卜素標準樣品作為__________。
溫度過高、干燥時間過長會導致胡蘿卜素分解。
由于萃取劑往往有揮發(fā)性,直接加熱時揮發(fā)出來的有機溶劑遇明火易爆炸。
萃取后需將原料中不溶于萃取劑的成分濾去。
提取出來的胡蘿卜素往往不是純的,用胡蘿卜素標準品主要起一個對照的作用。
1.植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性因素。按照不同順序使用這兩類激素,會得到不同的實驗結果。若先使用生長素,后使用細胞分裂素,實驗結果是(  )A.有利于細胞分裂,但細胞不分化B.細胞既分裂也分化C.細胞分化頻率提高D.有利于細胞分化,但細胞不分裂
植物組織培養(yǎng)過程中,細胞分裂素和生長素的使用順序不同,培養(yǎng)的結果不同。先使用生長素,后使用細胞分裂素,有利于細胞分裂,但細胞不分化;先使用細胞分裂素,后使用生長素,細胞既分裂也分化;兩者同時使用,細胞分化頻率提高。
2.下圖為利用體細胞誘變育種技術獲得抗除草劑白三葉草新品種的過程,下列敘述錯誤的是(  )       γ射線        ↓照射 白三葉草組織細胞 ―→ 愈傷組織 ―→ 胚狀體 ―→ 白三葉草幼苗 ―→ 抗除草劑白三葉草A.該育種過程所依據的原理有基因突變和植物細胞的全能性B.過程①和②所涉及的培養(yǎng)基中,不同植物生長調節(jié)劑的濃度比例不同
誘變育種所依據的原理是基因突變,植物組織培養(yǎng)所依據的原理是植物細胞的全能性。
過程①和②所得到的產物不同,因此培養(yǎng)基中不同植物生長調節(jié)劑的濃度比例不同。
C.白三葉草愈傷組織和胚狀體的細胞中DNA和RNA種類相同D.過程③通常采用的篩選方法是向白三葉草幼苗噴灑除草劑
白三葉草愈傷組織和胚狀體的細胞中DNA相同,但RNA種類不完全相同。
過程③通常采用的篩選方法是向白三葉草幼苗噴灑除草劑。
2.下圖為利用體細胞誘變育種技術獲得抗除草劑白三葉草新品種的過程,下列敘述錯誤的是(  )       γ射線        ↓照射 白三葉草組織細胞 ―→ 愈傷組織 ―→ 胚狀體 ―→ 白三葉草幼苗 ―→ 抗除草劑白三葉草
3.如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉,在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過程。下列有關敘述正確的是(  ) 花藥中未成熟的花粉 ―→ 愈傷組織 ―→ 叢芽 ―→ 完整的植株A.過程①②表示脫分化,過程③表示再分化B.過程①②需要照光C.過程①②③說明花粉細胞具有全能性D.通過過程③獲得的完整植株自交后代不會發(fā)生性狀分離
過程①表示脫分化,過程②表示再分化。
通常幼小植株形成后才需要照光。
通過過程①②③,花粉細胞形成了完整的植株,體現了花粉細胞的全能性。
通過過程③獲得的完整植株是單倍體,高度不育。
4.右圖表示應用植物組織培養(yǎng)技術培育優(yōu)質玉米的過程,對此過程的描述錯誤的是(  )A.試管苗培養(yǎng)過程必須在無菌條件下進行B.D試管中組織分化的調控與激素配比有關C.培養(yǎng)成的試管苗即可用于推廣種植D.在培養(yǎng)基中加入病原體的致病毒素,可篩選出抗病突變體
組織培養(yǎng)中激素種類和比例不同會導致愈傷組織產生不同的分化結果。
培養(yǎng)成的試管苗需要經過處理之后才可以用于推廣種植。
要篩選出抗病突變體,就要制作對應的選擇培養(yǎng)基。
由于外植體和愈傷組織的生活能力較弱,微生物的生活能力較強。
不滅菌處理容易導致組織培養(yǎng)失敗。
5.下表是關于DNA粗提取與鑒定實驗中所使用的材料、操作及其作用,表述正確的是(  )
蒸餾水與雞血細胞混合,蒸餾水的作用是讓雞血細胞吸水漲破。
檸檬酸鈉溶液的作用是防止血液凝固。
蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl中,此時蒸餾水的作用是稀釋NaCl溶液的濃度至0.14 ml/L,從而析出DNA絲狀物。
將粗提取之后的DNA加入到冷卻的酒精中以純化析出DNA絲狀物。
6.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中,有兩次DNA沉淀析出,其依據的原理是(  )①DNA在物質的量濃度為0.14 ml/L的NaCl溶液中溶解度最低②DNA在冷卻的體積分數為95%的酒精中能沉淀析出A.兩次都是①B.兩次都是②C.第一次是①,第二次是②D.第一次是②,第二次是①
DNA的第一次析出是利用DNA的溶解度在0.14 ml/L NaCl溶液中最小而沉淀析出的。第二次析出是利用DNA不溶于冷卻的95%的酒精,而蛋白質等雜質可溶解于冷卻的95%的酒精這一原理,達到對第一次析出的DNA進一步分離提純的目的。
7.在DNA粗提取與鑒定實驗中,將第三次過濾獲得的紗布上含有的DNA的黏稠物(含有較多雜質)分別處理如下:上述操作過程正確的是(  )A.①② B.①②③ C.①③ D.②③
第三次過濾后在紗布上的是粗提取的DNA,此 DNA還含有雜質,因此將其溶于2 ml/L的NaCl溶液中,再進行過濾,以除去不溶于2 ml/L的NaCl溶液的雜質。然后向濾液中加入同體積的、冷卻的95%酒精即可析出 DNA,然后挑出DNA進行鑒定。
8.提取茉莉精油的正確步驟是(  )A.鮮茉莉花+清水→水蒸氣蒸餾→除水→分離油層→茉莉油B.鮮茉莉花+清水→水蒸氣蒸餾→油水混合物→分離油層→除水→茉莉油C.鮮茉莉花+清水→除水→水蒸氣蒸餾→油水混合物→分離油層→茉莉油D.鮮茉莉花+清水→分離油層→除水→水蒸氣蒸餾→茉莉油
用水蒸氣蒸餾法提取茉莉精油時,應先將新鮮的茉莉花與清水共沸進行蒸餾,然后在得到的油水混合物中加入氯化鈉使之分層,然后進行分液,為除去茉莉油中仍存在的水分,可加入無水硫酸鈉,過濾后可以得到較純的茉莉油。
9.下列關于植物芳香油提取的原料、相應精油的名稱及適宜的提取方法的敘述中,不正確的是(  )A.玫瑰花、玫瑰精油、壓榨法B.橘皮、橘皮油、壓榨法C.胡蘿卜、胡蘿卜素、萃取法D.薰衣草莖葉、薰衣草油、蒸餾法
由于玫瑰精油揮發(fā)性較強,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采用蒸餾法。
10.使用有機溶劑萃取法提取胡蘿卜素時,影響萃取效率的因素很多,其中影響最大的是(  )A.原料顆粒的緊密程度B.萃取劑的性質和使用量C.所使用原料的干燥程度D.所使用原料的新鮮程度
萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和使用量,此外原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、新鮮程度等也可以影響萃取的效率。
11.如圖是花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑,回答下列相關問題: (1)通過花藥培養(yǎng)產生花粉植株,該過程依據的生物學原理是___________________,圖示兩種產生花粉植株的途徑并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中_______________________。(2)選材時,從花粉發(fā)育來看,一般選擇處于__________________的花粉培育成功率較高。確定花粉發(fā)育時期最常用的方法是_______________。(3)材料消毒過程中用到的試劑有_________、0.1%的氯化汞溶液、無菌水。
激素的種類及其濃度配比
圖示兩種產生花粉植株的途徑并沒有絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。
通過花藥培養(yǎng)產生花粉植株,需要經過植物組織培養(yǎng),該過程依據的生物學原理是植物細胞具有全能性。
花粉植株的培養(yǎng)中,選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導成功率的重要因素,花粉應選擇細胞核由中央移向一側的單核期,此時花藥培養(yǎng)成功率高。
通常先將材料用體積分數為70%的酒精浸泡大約30 s,立即取出,在無菌水中清洗。取出后再用無菌吸水紙吸干材料表面的水分,放入質量分數為0.1%的氯化汞溶液中2~4 min,并再清洗一次。
(4)消毒后的花蕾,要在_____條件下接種到培養(yǎng)基上,培養(yǎng)過程中不需要光照,同時要控制好溫度。(5)在花藥培養(yǎng)中,常常會出現____________的變化,因此需要對培養(yǎng)出來的植株做進一步的鑒定和篩選。(6)在配制用于植物組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基時,往往需要加入適量的蔗糖,理由是_____________________________________。
消毒后的花蕾,要在無菌條件下接種到培養(yǎng)基上,培養(yǎng)過程中不需要光照,同時要控制好溫度。
在配制用于植物組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基時,往往需要加入適量的蔗糖,其既能作為能源物質,又能維持滲透壓穩(wěn)定。
11.如圖是花藥培養(yǎng)產生花粉植株的兩種途徑,回答下列相關問題:
在花藥培養(yǎng)中,由于染色體組的數目常常會發(fā)生改變,因此還需對培養(yǎng)出來的植株作進一步的鑒定和篩選。
(1)根據上圖,完成表格空白處的實驗內容。
12.實驗中對DNA進行鑒定時,做如下操作:
DNA在沸水浴的情況下遇二苯胺會被染成藍色
DNA在沸水浴的情況下遇二苯胺會被染成藍色。
(2)對于B試管,完成1、2、3的操作后溶液顏色如何?_________________(3)在沸水浴中加熱的目的是_________________,同時說明DNA對高溫有較強的________。
(4)A試管在實驗中的作用是_____。
A、B兩試管形成對照,B試管中含DNA絲狀物,A試管中不含,起對照作用,其他條件均完全相同。
(5)B試管中溶液顏色的變化程度主要與_______________________________有關。
加入試管中的DNA(絲狀物)的多少
加入試管中的DNA(絲狀物)越多,溶液顏色越深。
13.請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題:(1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、_______和_______等。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于___,易溶于_________,因此可用_________作為提取劑來提取芳香油。(3)橘子果實含有芳香油,通常可用_______作為材料提取芳香油,而且提取時往往選用新鮮的材料,理由是_______________。
植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。
芳香油溶解性的特點是不溶于水,易溶于有機溶劑,因此可用有機溶劑作為提取劑來提取芳香油。
一般采用新鮮的橘子皮來提取橘皮精油,因為新鮮的含有芳香油多。
加入氯化鈉會增加水層密度,使油和水分層。
13.請回答下列與實驗室提取芳香油有關的問題:(4)對材料壓榨后可得到糊狀液體,為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是_________________________。(5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后,芳香油將分布于液體的___層,原因是________________________________。加入氯化鈉的作用是_________________________。(6)從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉,此劑的作用是_______________________。
過濾(其他合理答案也可)法
除去液體中的固體常用方法是過濾。
油的密度比水小(其他合理答案也可)  
吸收芳香油中殘留的水分
芳香油密度比水小,且不溶于水,會浮在液體的表面。
無水硫酸鈉的作用可以吸收芳香油中殘留的水分。
增加水層密度,使油和水分層

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